Пав для незамерзайки: Отдушка для незамерзайки в России — Сравнить цены и купить на Flagma.ru

Как подобрать незамерзайку для омывателя

Грамотно подготовленный к зиме автомобиль таких перепадов не боится. Почти. Дело в том, что при такой погоде очень сложно подобрать довольно дорогую (литр концентрата стоит 30-60 гривен, а расход сравним с бензином) жидкость в бачок омывателя.

Казалось бы, сейчас, при плюсовой температуре, незамерзайку можно разбавить водой и сэкономить, но если завтра снова наступят сильные морозы? Замерзшая жидкость приведет к тому, что водитель будет ездить с грязным лобовым стеклом почти «вслепую». А это легко может привести к серьезной аварии. Как же избежать ошибок с незамерзайкой?

Читайте состав

Качество жидкости напрямую зависит от того, из чего она приготовлена. Чтобы не ошибиться, внимательно читайте информацию на канистре.

Метанол. Жидкость из метанола, как правило, наиболее доступная — литр концентрата стоит от 10 гривен. Однако метанол — сильный яд, действующий на нервную и сосудистую системы.

Изопропил. А вот если у незамерзайки резкий запах (как у ацетона) — она, скорее всего, сделана из изопропилового спирта. Это вещество тоже ядовитое, но отравиться им можно, только если принимать внутрь. Цена такой незамерзайки — от 15 грн. за литр концентрата «-20». В более дорогой товар (от 20 грн.) с целью хоть частично перебить запах добавляют ароматизаторы и отдушки.

Биоэтанол. Самая дорогая продукция (в основном, производства ЕС) — стоит порядка 30 грн. за литр — изготовлена на основе биоэтанола. Это — тот же самый пищевой спирт, смешанный с ПАВ. Соответственно, особой опасности для организма такая жидкость не представляет. Однако с такой ценой в бачок можно лить водку с примесью геля для мытья посуды — не замерзнет до -30°.

Остерегайтесь подделок

Стандартная рекомендация — выбирайте не только продукт, но и продавца. Дело в том, что товар этот настолько ходовой, что существует множество подпольных цехов, занимающихся фальсификацией продукции.

Обычно подделки продают в ПЭТ-банках (в простонародье — баклажки). Вероятность купить подделку в сетевом магазине или на хорошей заправке минимальна, а вот у дяди на раскладке вдоль окружной дороги (трассы) — запросто. Результат покупки подделки — жидкость с отметкой «-40» замерзает уже при пяти градусах мороза. Если уже другого выхода нет, например, жидкость закончилась в дороге, при выборе канистры обратите внимание на цену — низкая должна смутить. Дело в том, что в любой стеклоомыватель кроме спиртов обычно входят ПАВ — поверхностно-активные вещества (2% раствора ПАВ достаточно, чтобы идеально очистить стекло от грязи различного происхождения и даже масляных пятен), отдушки (для придания неспиртового запаха) и красители (может использоваться абсолютно любой цвет).

Но даже если цена и стандартная, все равно будьте бдительны. Если на этикетке нечетко указаны информация о производителе, состав, штрихкод и другие стандартные параметры — это должно вызвать подозрение. Есть смысл купить на пробу литровую баночку, а не большую канистру.

Если стеклоомыватель замерз

Такая ситуация происходила с каждым автомобилистом: вечером была плюсовая температура и вы залили жидкость, рассчитанную на работу до «-10», а ночью ударил мороз и вся система, от бачка до форсунок, замерзла. Что делать?

Гарантированно работающего рецепта нет — все зависит от того, где именно установлен бачок омывателя в конкретном автомобиле. Если возле двигателя — достаточно просто погреться на холостых чуть дольше, чем обычно, — вода оттает. А если под крылом — поможет только стоянка в теплом месте.

Самое простое — загнать авто в гараж и включить там обогреватель. Как только температура в помещении поднимется выше нуля — проблема решится сама собой. Но нужно сразу же выпрыскать всю воду из системы и залить незамеpзайку.

Если нет гаража, поможет стоянка в подземной парковке, например, под супермаркетом. Вот только перед тем как туда заехать, не помешает в бачок омывателя налить до конца концентрата — оттаивая, вода сама смешается с незамерзающей жидкостью.

Еще один способ — использование промышленного фена. Им нужно обогреть всю систему, в том числе и патрубки.

Автор: Владислав Бовсуновский
 

Омыватель автомобильного стекла немецкой компании Kuttenkeuler. Калиф Оил, Украина

Может показаться, что жидкость стеклоочистителя настолько ординарный продукт, что и говорить о нем нечего. Если летом — моет, а зимой еще и не замерзает — то и хорошо. Однако, как и любой другой автомобильный товар, качественная омывающая жидкость характеризуется не только функциональными свойствами, но и безопасностью.

Помимо дистиллированной воды основными компонентами жидкости являются моющие вещества, а для зимней — еще и препятствующие замерзанию (как правило — спирты). Вот тут и кроется опасность. Разница между эффективными моющими веществами и дешевыми растворителями для человека не очевидна. Точнее — становится очевидна, но не сразу — придется подождать, пока вторые приведут или к изменению цвета лакокрасочного покрытия, или растворят резиновое уплотнение стекла.

С зимними жидкостями все еще интереснее — как известно, самый дешевый спирт — метиловый. А он ядовит даже в виде паров, и при систематическом их вдыхании способен причинить вред здоровью… И лечиться нынче дорого, и ремонтировать автомобили дорого. Вот и получается, что дешевые омыватели могут обойтись дорого. Соответственно — дешевле всего обойдется качественный продукт.

Для примера рассмотрим омыватель немецкой компании Kuttenkeuler GmbH. Помимо моторных масел, смазочных материалов и топлива она предлагает также основные продукты автохимии. «Немецкая компания» в данном случае означает не только то, что фирма зарегистрирована в Германии, но и производство расположила там же, и реальную работу ведет на европейском рынке. Ее продукты реализуются на более чем 60 собственных АЗС Kuttenkeuler в Германии, что значит — сделаны они «как для себя». Не говоря уже о том, что среди клиентов фирмы и немецкая армия — «Бундесвер». Вот что в первую очередь значит «реальный европейский продукт».

Далее. Европейская сертификация продуктов снимает все вопросы касательно безопасности. Жидкости не загрязняют окружающую среду, соответствуя стандарту опасности для вод WGK (WHC) 1 — «малоопасное». Это значит, что использованы наиболее «экологически-дружественные» ПАВ (поверхностно-активные вещества) — такие же, как в качественных европейских средствах для мытья посуды, где с ними контактирует кожа человека.

Механизм действия ПАВ (поверхностно-активные вещества) — снижение поверхностного натяжения жидкостей — в противодействие жирам и другим маслянистым загрязнениям, которые его повышают. Что же касается концентрации этих веществ, которой и обеспечиваются моющие свойства, то качественный производитель уверяет — она такова, что больше уже точно не надо. Дело в том, что есть верхний порог концентрации ПАВ в моющей жидкости, после которого ее повышение уже не дает улучшения моющих свойств.

Эффективность действия ПАВ зависит от температуры жидкости, в которой они «работают». Соответственно, летом достаточная для эффективной очистки стекла концентрация в разы ниже, чем зимой — тот же эффект наблюдается при мытье посуды холодной или теплой водой.

Сырьем для производства современных ПАВ являются высшие жирные спирты, которые в зависимости от реагента дают неионогенные или анионные ПАВ. В производстве жидкостей омывателя является недопустимым использование веществ, оказывающих абразивное воздействие на микроуровне.

ПАВ имеют предел растворимости (так называемую критическую концентрацию мицеллообразования, или ККМ), при достижении которого происходит самоорганизация (агрегация) молекул ПАВ в объёмном растворе. Водные растворы ПАВ при мицеллообразовании также приобретают голубоватый оттенок (студенистый оттенок) за счёт преломления света мицеллами.

Еще одно преимущество качественных жидкостей — благодаря высокой концентрации ПАВ Kuttenkeuler рекомендует использовать зимние продукты и летом — для этого, к примеру, концентрат Antifreeze windscreen washer -60°C достаточно развести водой в соотношении 1:10.

Для разведения воду можно брать любую, но лучше — фильтрованную, а идеально — дистиллированную или из установки обратного осмоса, которая нынче продается повсеместно недорого как питьевая, т.к. она не оставляет солевых отложений на форсунках стеклоомывателя. Отложения (с виду как накипь в чайнике или кастрюле) ухудшают распыл и со временем закупоривают сопло форсунки.

В неразбавленном виде Antifreeze windscreen washer -60°C может использоваться при температурах до -60°C, эффективно удаляя загрязнения.

При использовании в климате, не предполагающем морозов ниже -20°C, с целью экономии Frostschutz-Scheibenklar -60°C разводят водой в соотношении 1:1, и даже в разведении 1:2 средство работает отлично при -14°C.

Концентрат содержит смесь из спиртов, глюколенов и ПАВ, с добавлением красителя и безопасного лимонного ароматизатора.

Опубликовано в журнале autoExpert №4 2017.
Использование материалов возможно только со ссылкой на источник.

Информация о бренде Kuttenkeuler и дистрибьюторах на сайте www.autoexpert-consulting.com — по ссылке…

Выбор незамерзайки — не такое уж пустяковое дело

Если попросить признаться, то большинство из нас, автолюбителей, скажет, что про незамерзающую жидкость мы вспоминаем чаще всего тогда, когда на лобовое стекло летят грязные частицы или уровень жидкости подходит к «нулю». Да ещё ситуация: АЗС поблизости нет, а ехать нужно.

И вот на обочине загородной трассы Вы видите жигулёнок сплошь обставленный 5-литровыми канистрами с жидкостью цвета красивой морской волны. Ну что же выход вроде найден. Только… 

…было бы лучше, если бы Вы купили незамерзайку в специализированном магазине. Потому что

не всякая жидкость может безупречно подойти для омывателя, а отдельные из них, особенно контрафакт, небезопасны для Вашего здоровья

Если Вы хотите избежать неправильного выбора незамерзающей жидкости, необходимо знать основные принципы её изготовления, обусловленные прежде всего составом. Все они должны содержать спирт, ПАВ (поверхностно-активные вещества), красители и воду. Использоваться могут различные виды спиртов. Чаще всего-этиловый или изопропиловый. Есть ещё и метиловый – ЯД при всех его проявлениях! Отравление неизбежно даже при вдыхании паров этого химического вещества. Незамерзающая жидкость на основе изопропилового спирта – более безопасный в использовании продукт. К его недостаткам можно отнести отчасти неприятный запах, который производители стараются нейтрализовать различными ароматизаторами.

И как самый предпочтительный вариант – незамерзайка из этилового спирта. Несмотря на то, что Вам придется заплатить несколько больше, Вы получите надёжное омывающее средство.

Ну а что же с жигулёнком и его красивым товаром? Хорошо, если продавец всего лишь перекупщик и решил подзаработать. Но, к сожалению, «левый» товар сегодня – не редкость. Поэтому немаловажно обратить внимание на следующие вещи:

• Этикетка. Она должна быть качественно изготовленной и указывать фирму изготовителя, содержать правила применения, состав и дату изготовления.
• Запах. Наличие резкого или ацетонового – свидетельство некачественного по изготовлению продукта.
• Тара. Удобство её для применения, наличие ручки.

И в заключение мы хотели бы назвать марки жидкостей, которые обладают не только высокими эксплуатационными свойствами, но безопасны в применении. Это:

1. Ligui
2. Cool Stream -25
3. Hi-Gear Winter
4. Moli Pingo (-20)
5. AGA D20

(вот как раз все они имеют ручки)

Про них с уверенностью скажем, что они – из числа тех, что позволят сохранить в первоклассном виде лакокрасочное покрытие автомобиля и не причинить ущерба Вашему здоровью.

Как выбрать жидкость стеклоомывателя, советы по выбору и отзывы

Жидкость стеклоомывателя предназначена для удаления грязи со стекол автомобиля посредством стеклоочистителя или вручную. Улучшает обзор для водителя, чем снижает риск ДТП.

• Емкость 5 л
• Емкость 1 л

Тип

Зимняя жидкость стеклоомывателя («незамерзайка») – очищает от нефтяных соединений, песка, снега. Благодаря спиртовой основе жидкость устойчива к отрицательной температуре. Также в состав входит ПАВ (поверхностно активные вещества), которые растворяют жиры, сажу и другие загрязнения. Температура использования – ниже 20 °С мороза.

Летняя жидкость стеклоомывателя – очищает от грязи органического происхождения (сок ягод, древесная смола). Не имеет в составе спирта и содержит ПАВ. Температура использования – выше 0 °С.

Советы по выбору

• Покупайте жидкость известного бренда с проверенной репутацией. Так вы обеспечите хорошую обзорность и защитите от преждевременного выхода из строя форсунки, патрубки и насос стеклоомывателя. Некачественная продукция может повредить даже лакокрасочное покрытие кузова, не говоря уже о вреде для здоровья.
• Не желательно приобретать омыватель, очищающий стекло от остатков насекомых. Такие средства при постоянном использовании разрушают пластиковые и резиновые трубки, форсунки и соединения.
• Рекомендуется остановиться на жидкости голубого цвета. Мутная жидкость ухудшает обзорность.
• Чтобы определить наличие ПАВ в составе средства, следует встряхнуть емкость с жидкостью. Появление плотной пены говорит о присутствии поверхностно-активных веществ.
• Не стоит выбирать омыватель, если обнаружился осадок в емкости. Подобная жидкость содержит недистиллированную воду с примесями или некачественные компоненты. Это средство принесет больше вреда, чем пользы: засорит систему патрубков или приведет к поломке насоса.

Советы по использованию

• Не рекомендуется включать насос стеклоомывателя, если в бачке слишком мало жидкости или она вообще отсутствует. В противном случае насос может выйти из строя.
• Чтобы защититься от вредных испарений омывателя, не включайте дворники на остановках (перед светофором либо в пробке). Периодически проветривайте салон во время работы стеклоомывателя.

Консистенция

Готовая жидкость – не нуждается в разведении водой. Такая жидкость проста в использовании и рассчитана на температуру 20-30 °С мороза. Подойдет в ситуации, когда нет воды, чтобы приготовить раствор из концентрата.

Концентрат-стеклоомыватель – предназначен для более суровых погодных условий и требует разведения дистиллированной водой, чтобы увеличить количество жидкости. Концентрат позволяет приготовить жидкость под нужную температуру и занимает меньший объем, чем предыдущий вариант.

Стоит знать особенность приготовления такого раствора: чем больше добавляется воды, тем слабее морозоустойчивость полученного средства.

Важно: для подготовки к зиме концентрат можно долить в бачок стеклоомывателя с оставшейся летней жидкостью и водой.

Перед заливкой обязательно разбавляйте концентрат, иначе жидкость может загореться.

Минимальная температура

Этот параметр означает температуру, ниже которой жидкость будет замерзать (другое название – температура замерзания). Чем выше концентрация спирта в составе «незамерзкайки», тем она устойчивее к морозу. Большинство жидкостей стеклоомывателя выдерживают температуру от -20 до — 30 °С, чего вполне достаточно. Также существуют составы, которые не боятся — 50 °С и даже -80 °С.

Спиртовая основа

Этиловый (этанол) – устойчив к низкой температуре и безвреден для организма. Обладает хорошими моющими качествами. Минус – высокая стоимость. Наилучший выбор, но такие «незамерзайки» мало распространены.

Метиловый (метанол) – самый стойкий к отрицательным температурам, характеризуется низкой ценой и отличными моющими свойствами. Недостаток – высокая токсичность, приводящая к утрате зрения и смерти (при попадании внутрь организма).

Метанол опасен даже в виде паров: вызывает слабость, тошноту, головную боль. Это ослабляет внимание водителя и как следствие – возрастает риск аварии. Категорически не рекомендуется.

Изопропиловый (изопропанол) – менее опасен для здоровья, чем метанол, хорошо очищает стекло от загрязнений, позитивно влияет на работу насоса стеклоомывателя. Жидкости на основе изопропанола встречаются чаще всего.

Минусы изопропилового спирта: неприятный «ацетоновый» запах, вредное воздействие на резиновые и пластиковые элементы авто (в том числе щетки дворников, уплотнители стекол).

Для устранения этих недостатков производители добавляют ароматизаторы, растворители, что увеличивает цену «незамерзайки». Омыватель на основе изопропанола не подойдет тем, кому не нравится интенсивный «химический» запах. Такая жидкость может вызывать ухудшение самочувствия.

Важно: отсутствие резкого «ацетонового» запаха, может указывать на содержание в жидкости метанола (вероятность увеличивается, если средство дешевое).

Объем

Этот показатель колеблется в пределах 0.25-5 л и более. Концентраты обычно продаются в таре меньшей емкости, чем готовые жидкости. Для одноразовой заливки в бачок требуется 2-2.5 л средства. На зимний сезон достаточно 4-5 л омывателя.

Упаковка

Эконом – одноразовая пластиковая бутылка. Такая упаковка неудобна в транспортировке, так как в горизонтальной позиции не исключен риск протекания жидкости стеклоомывателя.

Стандарт – пластиковая канистра, оснащенная ручкой. Подобная упаковка лишена недостатка предыдущего типа. Благодаря широкому горлышку канистры, водителю легко доливать средство в бачок стеклоомывателя. Упаковка «Стандарт» используются чаще всего.

Премиум – канистра с пластиковой лейкой, которая облегчает доливание жидкости в бачок.

Важно: упаковка должна быть герметичной и прозрачной с ровно приклеенной этикеткой. На таре хорошего омывателя содержится информация о составе, производителе, дате изготовления, рекомендуемой температуре использования. Если таких сведений нет, лучше откажитесь от приобретения такой жидкости.

Наличие мембраны на горловине свидетельствует о дополнительной защите от подделки.

Незамерзающий омыватель стекол Anti Ice -80°С, 1 л LAVR Ln1324

Описание незамерзающего омывателя стекол -80°С

Нужна незамерзайка для особо суровых условий?

Специально для вас LAVR разработал Концентрат незамерзающей жидкости для омывания стекол -80°C. Он позволяет готовить омыватель с температурой застывания от -33°C до -7°C и повышать свойства любой жидкости, уже залитой в бачок.

Когда использовать

Концентрат незамерзайки LAVR разработан специально для систем омывания стекол и фар автомобилей, работающих в экстремальных условиях. Немаловажно, что он не разрушает бачок омывателя в случае застывания при более низких температурах. Концентрат LAVR позволяет приготовить незамерзающую жидкость с температурой застывания от -33°C до -7°C.

• эффективно удаляет снег, изморозь и загрязнения
• не оставляет белесых разводов на стеклах
• защищает от абразивного износа
• облегчает движение стеклоочистителей и предотвращает их примерзание

В виде готового состава Концентрат незамерзающей жидкости для омывания стекол -80°C LAVR безопасен для резиновых, пластиковых, металлических деталей и лакокрасочного покрытия.

Применение

Как использовать

РАЗВЕСТИ ВОДОЙ ПЕРЕД ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ

1. Залейте концентрат в бачок омывателя.
2. Долейте воды до получения необходимой температуры застывания состава. Рекомендуется разбавлять средство дистиллированной водой LAVR.

Для корректного приготовления незамерзающей жидкости воспользуйтесь таблицей:

Состав

Спирт изопропиловый  > 90 %, вода дистиллированная < 1 %, неиногенное ПАВ < 1 % , краситель < 1 %, отдушка < 1 %.

Как выбрать незамерзайку

Незамерзайка представляет собой специальную жидкость, которая используется для очищения автомобильных стёкол. Основной особенностью данной субстанции является устойчивость к низким температурам – она не замерзает даже в условиях сильного холода. Описываемое вещество заливается с соответствующий бачок, из которого подаётся на лобовое и заднее стекло машины.

Мы реализуем высококачественную незамерзайку от производителя. Указанное обстоятельство гарантирует надёжность и эффективность применения вышеупомянутой жидкости. Кроме того, мы располагаем различными видами незамерзайки, что позволяет потребителям выбрать оптимальный вариант продукта.

Как выбрать незамерзайку?

Покупая рассматриваемую субстанцию, важно учитывать её состав. Основными компонентами данного продукта являются вода и различные виды спиртов:

— этанол. Это отлично смывает грязь со стекла. Кроме того, этиловый спирт практически не оказывает негативного воздействия на здоровье самого водителя и пассажиров. Однако такая моющая жидкость имеет довольно высокую стоимость;

— изопропиловый спирт. Незамерзайка на основе указанного вещества является наиболее популярной. Это обусловлено доступной стоимостью и относительной безопасностью продукта. Однако такое моющее средство имеет очень неприятный запах;

Производство незамерзайки подразумевает также использование различных дополнительных компонентов. К ним относятся специальные красителя, всевозможные поверхностно активные вещества, прочие субстанции. Чтобы получить качественную незамерзайку без запаха, производители применяют соответствующие отдушки. В результате продукт может пахнуть фруктами либо источать лёгкий запах морского бриза. При этом присутствие спирта в составе моющего средства практически не ощущается.

Надо заметить, что иногда для производства незамерзайки используется метанол. Такая смывающая жидкость получается максимально дешёвой. Однако метиловый спирт очень плохо влияет на здоровье человека. Он может спровоцировать расстройства зрения и прочие подобные проблемы.

Основные характеристики продукции

Выбирая незамерзайку от производителя, следует обращать внимание на следующие параметры приобретаемого средства:

— химическая формула спирта, который содержится в данном продукте;

— способность вещества эффективно смачивать требуемую поверхность и проникать в структуру грязи;

— вязкость субстанции, от которой зависит пропускная способность форсунок при различных параметрах т\внешней температуры;

— наличие и тип поверхностно активных веществ, которые отвечают за показатели эффективности незамерзайки;

Также стоит учитывать коэффициент заявленной температуры замерзания описываемой жидкости. От данной характеристики зависит возможность эксплуатации незамерзайки в конкретном регионе РФ.

как правильно выбрать незамерзающую жидкость для автомобиля

Как правильно выбрать незамерзающую жидкость для автомобиля

От выбора незамерзающей жидкости зависит не только состояние автомобиля, но и ваше собственное здоровье. В первую очередь следует избегать покупок «незамерзайки» у продавцов, которые с наступлением холодов выстраиваются на трассах. Однозначно приобретать жидкость нужно только в магазине, так как в магазине на эту продукцию есть сопроводительная документация, в которой можно проверить соответствие ее единым требованиям Таможенного союза, которые распространяются на такие изделия.

Самые сильные «незамерзайки» чистят стекло до минус сорока и более. Состоят очистители из раствора спирта с моющими добавками (поверхностно-активными веществами), отдушки (чтобы не пахло плохо) и красителя.

Приобретая незамерзающую жидкость, обратите внимание на то, чтобы товар был разлит в прозрачные канистры с хорошими, качественными пробками. Соответствующая тара поможет выявить недостатки жидкости еще при покупке: стоит лишь посмотреть дно емкости на просвет. Если в канистре вы увидели осадок, «незамерзайку» брать не стоит — едва ли она сослужит вам добрую службу. При встряхивании канистры на поверхности должно образоваться хотя бы небольшое количество пены – это означает, что в составе жидкости присутствует моющее вещество, без которого пленку из реагента, бензина и прочих загрязнений с лобового стекла просто не смыть. Не лишним будет проверить, герметично ли закручена пробка.

В качестве основного незамерзающего компонента в стеклоомывающих жидкостях применяется один из видов спирта: метиловый, изопропиловый или этиловый. Затем спирт разбавляется водой, добавляются так называемые ПАВ (поверхностно-активные вещества, котореы и призваны мыть), «парфюмерный компонент» для благородного запаха и краситель цвета. Именно количеством воды и определяется рабочая температура «незамерзайки».

Теперь о спирте. Самый дешевый и эффективный метиловый спирт — метанол. Метанол очень удобен для подделки «незамерзайки». Он смешивается во всех соотношениях с водой и с большинством органических растворителей. Он дешевле изопропилового спирта, из которого добросовестные производители делают незамерзайки, не говоря уже о спирте этиловом. Но метанол — яд.

Метанол еще называют древесным спиртом. Это крайне ядовитая бесцветная жидкость. При попадании внутрь организма она поражает нервную и сосудистую систему человека. 5-10 граммов метанола приводят к полной и безвозвратной потере зрения, а доза в 30 граммов, как правило, смертельная. С воздухом в объемных концентрациях 6,72-36,5% метанол образует взрывоопасные смеси.

У него нет ярко выраженного запаха, и поэтому определить его наличие невозможно. Отравиться метанолом можно не только при его питье, достаточно просто вдохнуть его пары, когда они проникнут в салон автомобиля через систему вентиляции. В результате головная боль, головокружение, слабость.

Постановлением Главного государственного санитарного врача РФ от 11.07.2007г. № 47 «О прекращении использования метилового спирта в средствах по уходу за автотранспортом» был введен запрет на производство, продажу и использование стеклоомывающих жидкостей содержащих метанол. И с тех пор вся «незамерзайка» на территории РФ должна по закону производиться исключительно на основе изопропилового или этилового спиртов, которые имеют резкий неприятный запах. Причем он характерен как для дешевых, так и для дорогих стеклоомывателей. Именно изопропиловый спирт является источником неприятного запаха. Однако, в отличии от метанола, он не наносит человеку серьезный вред.

В этом плане необходимо обратить внимание на рекомендации производителя применять ли жидкость в виде концентрата или разбавить ее. Для того, чтобы сбить неприятный запах, производитель часто использует различные отдушки. Однако, здесь нужно насторожиться людям с аллергией: некоторые из ароматизаторов могут вызвать у них реакцию.

Если они содержатся в достаточно большом количестве, производители обязаны указывать их на этикетках. Как правило, их можно увидеть после слова «отдушка». Эти известные аллергены, которые производители обязаны указывать: если их содержится больше определенного процента, тогда человек, у которого есть определенная чувствительность к каким-то веществам, сможет это проверить.

Следует как можно реже пользоваться «незамерзайкой» на стоянках и в пробках – именно тогда концентрация вредных паров в салоне достигает максимума. Если при работе стеклоочистителей и стеклоомывателя вы почувствовали слабость, головную боль, стали вдруг рассеянными – немедленно остановите машину, выйдите из нее и подышите воздухом 5 – 10 минут. Если при дальнейшей поездке самочувствие не улучшилось, тогда лучше всего слить подозрительную «незамерзайку».

Идентификация белков-антифризов на основе ключевой информации об эволюции

Abstract

Протеины-антифризы — важные антифризы, которые широко используются в промышленности, в том числе для криоконсервации, защиты от обледенения и хранения пищевых продуктов. Однако количество некоторых коммерчески производимых белков-антифризов недостаточно для крупномасштабного промышленного применения. Кроме того, многие антифризы обладают такими свойствами, как цитотоксичность, что серьезно затрудняет их применение.Поэтому срочно необходимо понимание механизмов, лежащих в основе взаимодействий белок-лед, и выявление новых белков-антифризов. В этом исследовании, чтобы раскрыть механизмы, лежащие в основе взаимодействий белок-лед, и предоставить эффективный и точный инструмент для идентификации белков-антифризов, мы оценили различные эволюционные особенности на основе позиционно-зависимых матриц оценок (PSSM) и оценили их важность для различения антифриза и не замораживания. -антифризы протеины. Затем мы скупо выбрали семь ключевых характеристик, имеющих наибольшее значение.Мы обнаружили, что выбранные характеристики демонстрируют противоположные тенденции (в отношении сохранения определенных аминокислот) между антифризами и белками, не являющимися антифризами. Пять из семи характеристик имели относительно высокий вклад в различение белков антифриза и белков, не являющихся антифризами, как показал анализ основных компонентов, то есть сохранение замены Cys, Trp и Gly в белках антифриза на Ala, Met , и Ala, соответственно, в родственных белках и сохранение замены Arg в белках, не являющихся антифризами, на Ser и Arg в родственных белках.Основываясь на семи тщательно отобранных ключевых функциях, мы создали классификатор с использованием машины опорных векторов, которая превзошла современные инструменты. Эти результаты предполагают, что понимание эволюционной информации имеет решающее значение для разработки точных автоматизированных методов различения антифризов и неантифризовых белков. Таким образом, наш классификатор является эффективным инструментом для аннотирования новых белков с функциями антифриза на основе информации о последовательности и может облегчить их применение в промышленности.

Ключевые слова: белков-антифризов, машина опорных векторов, эволюция, машинное обучение, позиционно-зависимая оценочная матрица

Введение

Белки-антифризы могут защищать клетки и жидкости организма от замерзания, препятствуя зарождению, ингибируя рост кристаллов льда, и препятствуют перекристаллизации льда (Kandaswamy et al., 2011) и, таким образом, являются важными природными антифризами, которые широко используются для консервирования пищевых продуктов (Zhan et al., 2018; Provesi et al., 2019; Song et al., 2019), медицина (Lee et al., 2012; Khan et al., 2019) и биотехнологические приложения (Naing and Kim, 2019). Впервые они были обнаружены в крови антарктических рыб около 50 лет назад (DeVries, Wohlschlag, 1969; DeVries et al., 1970). Более поздние исследования показали их существование у других живых организмов, которые должны выдерживать отрицательные температуры в течение своей жизни, включая растения (Griffith et al., 1992; Duman and Olsen, 1993), насекомых (Husby and Zachariassen, 1980), грибы (Duman и Olsen, 1993) и бактерии (Duman and Olsen, 1993).Однако, несмотря на их превосходные характеристики на молекулярном уровне, количество многих белков, которые можно получить в промышленных масштабах, недостаточно для крупномасштабных промышленных применений (Nishimiya et al., 2008). Кроме того, некоторые важные антифризы цитотоксичны, что серьезно ограничивает их потенциальное применение (Naing and Kim, 2019). Поэтому срочно необходима разработка инструментов для идентификации новых белков с функциями антифриза.

Однако, несмотря на схожие функции среди белков-антифризов, традиционные инструменты, которые ищут гомологичные белки на основе сходства последовательностей, такие как Basic Local Alignment Search Tool (BLAST) и Position-Specific Iterative (PSI) -BLAST, плохо работают при попытке для идентификации антифризовых белков (Kandaswamy et al., 2011; Эслами и др., 2018; Nath and Subbiah, 2018), поскольку белки-антифризы обладают большим разнообразием среди видов по своей структуре и свойствам последовательности. Например, участки связывания льда у рыб умеренно гидрофобны (Jia and Davies, 2002), тогда как у растений они в основном гидрофильны (Ramya, 2017). Отчетливые физико-химические и структурные свойства также очевидны даже среди филогенетически родственных видов. Предыдущие исследования костистых рыб выявили четыре неродственных типа антифризовых белков, классифицированных по их различиям в последовательности и структурных характеристиках (Ewart et al., 1999). Антифризы типа I представляют собой богатые аланином α-спиральные белки; тип II имеет лектиновые складки С-типа из смешанных α-спиралей и β-цепей и состоит в основном из Cys, Ala, Asn, Gln и Thr; тип III — глобулярные белки без особой повторяющейся структуры; тип IV в основном состоит из Glu и Gln и имеет складчатые α-спиральные пучки (Cheung et al., 2017). У насекомых есть два типа белков-антифризов, которые принципиально различаются по своей первичной, вторичной и третичной структурам, несмотря на то, что оба содержат два ряда остатков Thr, которые образуют β-спирали (Jia and Davies, 2002).Точно так же в растениях было очищено и охарактеризовано 15 белков-антифризов (Gupta and Deswal, 2014), и они обладают низкой гомологией и очень разнообразными свойствами в отношении аминокислотных последовательностей (Atici and Nalbantoglu, 2003). В целом, эти результаты предполагают, что белки-антифризы, возможно, независимо развили свою способность связывать лед (Cheung et al., 2017), и это помешало нашему пониманию взаимосвязи между последовательностью и функцией.

Несмотря на эти проблемы, некоторые исследователи попытались создать классификаторы для идентификации антифризовых белков на основе в основном свойств, определяемых последовательностью (Doxey et al., 2006; Кандасвами и др., 2011; Чжао и др., 2012; Appels et al., 2018). Например, Doxey et al. (2006) разработали алгоритм прогнозирования белков антифриза на основе физико-химических свойств поверхности. Их метод, к сожалению, не подходит для большинства белков, поскольку для большинства белков недоступны трехмерные кристаллографические структуры. В более поздних исследованиях по прогнозированию белков-антифризов использовались современные алгоритмы машинного обучения, которые продемонстрировали свою способность в других исследованиях, связанных с белками, таких как идентификация мембранных белков и их подкатегорий (Chou and Shen, 2007), прогнозирование внутриклеточной локализации мульти-меточных белков (Javed и Hayat, 2019) и классификации вторичных структур белков (Ge et al., 2019). Большинство этих исследований были сосредоточены на особенностях, связанных с аминокислотным составом, а различные физико-химические свойства аминокислотных последовательностей широко использовались для идентификации белков антифризов (Kandaswamy et al., 2011; Yu and Lu, 2011; Mondal and Pai, 2014; Pratiwi и др., 2017). Напротив, несмотря на предполагаемую конвергентную эволюцию антифризовых белков, Zhao et al. (2012) построили классификатор с высокой производительностью, основанный исключительно на эволюционных особенностях, полученных из позиционно-зависимых матриц оценок (PSSM), предположив, что эволюционная информация также важна для идентификации антифризовых белков.He et al. (2015) далее сравнили характеристики эволюционных функций с двумя метриками аминокислотного состава (то есть аминокислотным составом и псевдоаминокислотным составом) и показали, что функции, полученные из PSSM, достигли более высокой производительности. Аналогичным образом Ян и др. (2015) сообщили, что среди различных характеристик, имеющих отношение к идентификации белков антифризов, особенности, полученные из PSSM, составляют наибольшую долю, хотя другое исследование показало, что физико-химические свойства были более важными (Eslami et al., 2018). Тем не менее, эти результаты предполагают, что определение эволюционной информации, лежащей в основе дифференциации антифризов и неантифризовых белков, важно для улучшения нашего понимания взаимодействий белок-лед.

В этом исследовании, чтобы раскрыть механизмы взаимодействия белков со льдом и предоставить эффективный и точный автоматизированный инструмент для идентификации белков-антифризов, мы определили ключевую эволюционную информацию, лежащую в основе различий между антифризами и белками, не являющимися антифризами.Сначала мы извлекли эволюционные особенности из PSSM. Проблема, которая не была решена в большинстве предыдущих исследований по созданию классификаторов на основе алгоритмов машинного обучения, заключается в том, что белки-антифризы встречаются редко по сравнению с белками, не являющимися антифризами. Это может привести к тому, что модели будут сосредоточены на белках, не являющихся антифризами, что ухудшит процесс обучения и оценку точности модели (ACC) (Yang et al., 2015). Таким образом, мы создали предварительно обработанный набор обучающих данных, используя методику передискретизации взвешенного меньшинства (MWMOTE) для генерации синтетических белков антифриза на основе взвешенных информативных белков антифриза в необработанном наборе данных обучения, чтобы исправить проблему несбалансированного обучения (Barua et al. ., 2014). Этот метод использует кластерный подход, чтобы гарантировать, что все сгенерированные белки антифриза находятся в некоторых кластерах сырых белков антифриза, и, как было показано, превосходит некоторые другие методы (Barua et al., 2014). После этого мы экономно выбрали ключевые функции, чтобы уменьшить избыточную и зашумленную информацию на основе процедуры выбора функций. Затем классификатор, основанный на выбранных ключевых характеристиках, был обучен с использованием метода опорных векторов (SVM) для различения антифризов и неантифризовых белков.

Материалы и методы

Наборы данных

Контрольные наборы данных для антифризов и неантифризовых белков были получены от Kandaswamy et al. (2011). Ранее в исследовании Kandaswamy et al. Были отобраны 481 антифриз и 9439 неантифризных белков с низким сходством (≤40%). (2011), а 221 антифриз и все белковые последовательности, не являющиеся антифризами, были извлечены из белков семян в базе данных Pfam (Sonnhammer et al., 1997). В этом исследовании мы дополнительно удалили последовательности, содержащие неоднозначные остатки, т.е.е., «X», «B», «U» и «O». Всего было сохранено 479 последовательностей антифриза и 9139 неантифризовых протеиновых последовательностей, чтобы унаследовать характеристики от PSSM.

PSI-BLAST использовался для оценки PSSM для каждой последовательности на основе последовательностей в неизбыточной базе данных Swiss-PROT, которые имеют значительное сходство, с тремя итерациями и порогом электронного значения 0,0001 (Bhagwat and Aravind, 2007; Zhu и др., 2019). Необработанные PSSM представляют собой матрицы размером n × 20; В n строках указаны остатки запрашиваемого белка, где n — длина последовательности белка, а 20 столбцов представляют 20 стандартных аминокислот, которые могут присутствовать в связанных последовательностях белка.Элемент в строке i и столбце j оценивает частоты конкретной аминокислоты (X) в положении i в запрашиваемой последовательности, мутирующей на j -ю альтернативную аминокислоту (Z) в соответствующей белковые последовательности в процессе эволюции. Некоторые аминокислоты в строках каждого необработанного PSSM могут появляться несколько раз. Затем ряды тех же аминокислот были суммированы, чтобы сформировать матрицу 20 × 20. После этого матрица была преобразована в вектор с 400 измерениями [функции; подробнее см. Zhao et al.(2012)]. Таким образом, каждый элемент в векторе представляет собой возникновение замены определенной аминокислоты (X) в запрашиваемом белке альтернативной аминокислотой (Z) в родственных белках, что указывает на сохранение аминокислоты X в каждом запрашиваемом белке. . Отрицательное (низкое) значение X – Z или положительное (высокое) значение X – X предполагает, что скорость мутации аминокислоты X в Z или другие аминокислоты ниже, чем ожидалось случайно, и, таким образом, X является консервативным. Некоторые последовательности не могли быть оценены в анализе PSSM и поэтому были исключены.Наконец, векторы на основе 398 антифризов и 7423 неантифризовых белков были объединены в единый набор данных, и 80% антифриза и неантифризовых белков были использованы в качестве обучающего набора данных, а остальные 20% были использованы в качестве тестовых данных. установленный.

Затем набор обучающих данных был предварительно обработан на основе MWMOTE с использованием пакета «imbalance» R (Cordn et al., 2018) с соотношением 0,78 между антифризом и незамерзающим белком.

Выбор функций

Функции были сначала ранжированы на основе взаимной информации с использованием подхода минимальной избыточности – максимальной релевантности (mRMR) ансамбля (De Jay et al., 2013; Wang et al., 2018; Юань и др., 2018). Таким образом, характеристики, занимающие первое место, были как наиболее важными для различения белков-антифризов, так и белков, не являющихся антифризами, и дополняли друг друга (Ding and Peng, 2003). Затем к моделям были добавлены функции, начиная с модели с наивысшим рангом, и классификатор был обучен и оценен на основе пятикратной перекрестной проверки и набора данных независимого тестирования с использованием метода SVM (см. Ниже). Чтобы экономно выбрать ключевые особенности для построения классификатора для различения антифризов и неантифризовых белков, была сохранена модель, предшествующая модели с пониженной производительностью в независимом наборе тестовых данных.

Обучение и оценка модели

Машина опорных векторов — это популярный классификатор, который решил несколько проблем биоинформатики (Li et al., 2016; Chen et al., 2017; Bu et al., 2018; Zhang et al., 2018; Chao et al., 2019a, b; Sun et al., 2019; Wang et al., 2019). Пакет R «caret» использовался для обучения моделей и настройки гиперпараметров модели на основе SVM (Kuhn, 2008). Характеристики модели оценивались на основе ACC, чувствительности (SN), специфичности (SP) и площади под кривой рабочих характеристик приемника (AUC) с использованием пятикратной перекрестной проверки и независимого набора данных испытаний (Tan et al., 2019). ACC — это отношение количества правильно выделенных белков к общему количеству белков, оценивающее общую производительность модели. SN — это отношение количества правильно выделенных белков антифриза к количеству всех истинных белков антифриза. SP — это отношение количества правильно выделенных белков, не являющихся антифризами, по отношению к количеству всех истинных белков, не являющихся антифризами. Напротив, AUC учитывает как SN, так и SP, оценивая способность модели распознавать антифризные белки среди немеченых антифризовых белков и неантифризные белки среди немеченых неантифризовых белков.Таким образом, он устойчив к несбалансированным данным. Более высокие значения AUC указывают на то, что модель лучше разделяет антифриз и неантифризные белки.

Кроме того, для сравнения производительности классификаторов на основе набора необработанных данных с классификаторами на основе предварительно обработанного набора данных (созданного с помощью MWMOTE) и производительности классификаторов на основе тщательно отобранных нами ключевых функций с классификаторами на основе всех функций, Классификаторы также были обучены и оценены с использованием набора необработанных данных и набора предварительно обработанных данных со всеми функциями.Кроме того, был использован анализ главных компонентов (ПК) для дальнейшего уменьшения размерности во всех наборах данных, и классификаторы на основе первых двух ПК были затем обучены, и их характеристики были нанесены на график, чтобы наглядно проиллюстрировать характеристики модели. Чтобы оценить важность каждой выбранной ключевой функции для первых двух ПК, их вклад был оценен на основе следующего уравнения:

Вклад = ri⁢j2 / ∑ri⁢j2

, где ri⁢j2 — коэффициент корреляции между i -я ключевая особенность и j -й ПК.

Результаты

Выбор ключевых характеристик для различения белков-антифризов и неантифризов

Семь характеристик, полученных из PSSM, были экономно выбраны в качестве ключевых характеристик для различения белков-антифризов и белков, не являющихся антифризами (). Добавление дополнительных функций привело к начальному снижению производительности в наборе данных независимого тестирования в отношении AUC, ACC и SN, хотя с включением еще большего количества функций производительность увеличилась (). Основываясь на семи характеристиках, большинство белков были правильно выделены в наборе обучающих данных, то есть 96% и 97% белков антифриза и белков, не являющихся антифризами, были правильно идентифицированы, соответственно ().Общие ACC и AUC составили 0,91 и 0,96 соответственно (). В наборе данных независимого теста была успешно идентифицирована немного более низкая доля (63%) белков-антифризов, и 97% белков, не являющихся антифризами, были правильно предсказаны, что привело к увеличению ACC, но снижению AUC по сравнению с тренировкой. набор данных ().

(A) Выбор ключевых характеристик, полученных из позиционно-зависимых матриц оценок (PSSM), для различения антифризов и неантифризовых белков.Сначала функции были ранжированы на основе взаимной информации с использованием подхода минимальной избыточности – максимальной релевантности (mRMR). Начиная с объекта с наивысшим рейтингом, к моделям последовательно добавлялись 200 лучших объектов. Характеристики модели оценивались с использованием пятикратной перекрестной проверки и независимого набора тестовых данных на основе AUC, ACC, SN и SP. Семь основных характеристик были тщательно отобраны для построения классификатора, позволяющего различать антифриз и неантифризные белки, а затем AUC, ACC и SN уменьшились в независимом наборе данных испытаний. (B) Распределение антифризов и неантифризовых белков по первым двум основным компонентам (ПК). Стрелки указывают корреляцию между каждой из семи функций и ПК1 и ПК2. (C) Вклад каждой из семи функций в ПК1 и ПК2. Функции отсортированы в порядке убывания их вклада. Ожидаемый средний вклад составлял 1/7, поскольку было семь функций, и вклад каждой функции предполагался однородным (Kassambara and Mundt, 2017).

ТАБЛИЦА 1

Показатели, касающиеся различения антифризов и неантифризовых белков на основе метода опорной векторной машины (SVM) в различных наборах данных.

Первые два на выбранные ключевые функции приходилось 70% вариаций между функциями (). Наряду с PC1, замены Cys и Trp в белках, не являющихся антифризом, на Ala и Met, соответственно, в родственных белках увеличивались в соответствии с увеличением встречаемости белков, не являющихся антифризами (2).Аналогичным образом, вдоль PC2, Gly и Arg в белках, не являющихся антифризами, чаще заменялись на Ala и Arg, соответственно, в родственных белках. Напротив, в антифризных белках было меньше замен Cys, Trp и Gly, но больше Arg было заменено на Ser (). Только с первыми двумя ПК были достигнуты относительно высокие характеристики в отношении различения антифризов и неантифризовых белков (и). Классификатор правильно определил 94% белков-антифризов и 78% белков, не являющихся антифризами, в наборе обучающих данных и 61% белков-антифризов и 95% белков, не являющихся антифризами, в наборе данных независимого тестирования ().ACC и AUC составили 0,87 и 0,90 в наборе обучающих данных соответственно и 0,93 и 0,82 в наборе независимых тестовых данных соответственно ().

Характеристики моделей для различения белков антифриза и белков, не являющихся антифризом, на основе первых двух основных компонентов (PC), полученных из (A) , всех функций, полученных из позиционно-зависимых матриц оценок (PSSM) с использованием набора необработанных данных, ( B) всех функций, полученных из PSSM с использованием предварительно обработанного набора данных, основанного на методике передискретизации взвешенного меньшинства (MWMOTE), и (C) семи выбранных ключевых функций с использованием предварительно обработанного набора данных.Верхние цифры основаны на пятикратной перекрестной проверке, а нижние цифры основаны на наборе данных независимого тестирования. См. Точные значения производительности. Кроме того, показаны значения решения, которые использовались для прогнозирования белков антифриза и неантифриза.

Производительность метода MWMOTE

Использование метода MWMOTE для создания предварительно обработанного набора данных значительно повысило производительность модели. При использовании всех функций почти каждый белок был правильно идентифицирован в наборе обучающих данных со значениями SN и SP равными 1.00, и в независимом наборе данных испытаний 70% белков-антифризов и 100% белков, не являющихся антифризами, были правильно различены (и). Напротив, хотя классификатор, обученный со всеми функциями и набором необработанных данных, показал в целом высокие характеристики с точки зрения AUC, ACC и SP, это произошло за счет правильной идентификации белков антифриза, то есть низкого SN (). Было предсказано, что большинство белков не являются белками-антифризами, и только 65% и 67% белков-антифризов были правильно распознаны в наборах данных для обучения и независимого тестирования, соответственно (и).

Обсуждение

Мы обнаружили, что предварительная обработка, основанная на методе MWMOTE, улучшила нашу способность различать антифризы и белки, не являющиеся антифризами. Семь из 400 функций, полученных из PSSM, были экономно выбраны в качестве ключевых функций, которые привели к относительно высокой производительности. Среди этих функций все еще оставалась избыточная и зашумленная информация, которая была сведена к минимуму с помощью компьютерного анализа с незначительной потерей способности различать. Эти результаты предполагают, что антифризы и белки, не являющиеся антифризами, могут быть дифференцированы на основе нескольких характеристик, полученных из PSSM, и, следовательно, небольшой информации об эволюции.

Дифференциация белков-антифризов и неантифризов

Было показано, что белки-антифризы конвергентно эволюционировали из разных семейств белков (Ewart et al., 1999; Nath et al., 2013; Nath and Subbiah, 2018). Здесь мы обнаружили, что между белками антифриза могут существовать общие эволюционные отношения, то есть Cys, Trp и Gly консервативны, а их замены на Ala, Met и Ala, соответственно, редки в белках антифриза. Этот результат удивителен, поскольку Cys, Trp, Gly, Met и Ala являются наиболее гидрофобными аминокислотными остатками (Rose et al., 1985), было показано, что они имеют большое сходство между собой с точки зрения гидрофобности (Riek et al., 1995), и, таким образом, скорости мутаций или замен Cys, Trp и Gly на Ala, Met и Ala, соответственно. , должно быть высоким (Riek et al., 1995). Следовательно, сохранение Cys, Trp и Gly в белках антифриза предполагает, что эволюционное давление могло существовать, чтобы сохранить эти аминокислоты в белках антифриза, а сохранение Cys, Trp и Gly может наделить белки антифризовой функцией, хотя лежащие в основе механизмы все еще неясны.Точно так же Graham и Davies (2005) показали, что, несмотря на удивительное расхождение в первичных последовательностях, обе изоформы высокоэффективного антифриза, обнаруженного у снежных блох, начинаются с Gly. Gly считается очень уникальным и очень конформационно гибким, и он может занимать положения, такие как крутые повороты, которые невозможны для всех других аминокислот (Betts and Russell, 2003). Наличие Gly может иметь важное значение для образования различных связывающих лед поверхностей в антифризных белках (Jia and Davies, 2002; Doxey et al., 2006). Более того, дисульфидные связи, образованные парными остатками Cys, широко распространены среди белков-антифризов в различных таксонах, включая насекомых (Li et al., 1998; Graether et al., 2000), бактерии (Bar et al., 2006), растения (Hon et al., 1994; Bar et al., 2006) и рыб (Davies and Hew, 1990), что может позволить белкам противостоять разрушению из-за адсорбции льда или денатурационного стресса во время замораживания (Li et al., 1998). Trp — это ароматическая аминокислота с гидрофобной боковой цепью, которая имеет тенденцию быть скрытой в гидрофобных ядрах белка, потенциально образуя сайты связывания со льдом (Betts and Russell, 2003).Другое возможное объяснение сохранения Cys, Trp и Gly в антифризных белках состоит в том, что эти аминокислоты имеют более высокую склонность к образованию α-спиралей (Koehl and Levitt, 1999), что важно для подавления роста кристаллов льда (Knight et al. др., 1991). В отличие от консервирования Cys, Trp и Gly в белках антифриза, Arg в белках антифриза чаще заменялся на Ser и реже заменялся самим собой в родственных белках, что свидетельствует об отсутствии консервации Arg в белках антифриза.Аналогичным образом Nath et al. (2013) сравнили эволюционные различия между тремя типами белков-антифризов у ​​рыб и соответствующими им гомологичными белками, не являющимися антифризами, и обнаружили, что Arg обычно избегают во всех типах белков-антифризов. Однако важно отметить, что PSSM наших белков-антифризов были основаны на сравнении сходства последовательностей с родственными белками, но не обязательно с белками с функцией антифриза. Белки-антифризы встречаются редко и отличаются по своим последовательностям, и PSI-BLAST и BLAST испытывают трудности с использованием белка-антифриза в качестве последовательности запроса для поиска новых белков-антифризов на основе сходства (Kandaswamy et al., 2011; Эслами и др., 2018; Нат и Суббия, 2018). Таким образом, некоторые из последовательностей, которые использовались для расчета PSSM наших белков-антифризов, могли быть последовательностями белков, не относящихся к антифризу. Если это так, то высокая частота замены Arg в белках антифриза на Ser в белках, не являющихся антифризами (или, другими словами, высокая частота замены Ser в белках, не являющихся антифризами, на Arg в белках антифриза) может указывать на важную мутацию, влияющую на функцию антифриза.Более строгий отбор белков во время оценки PSSM может помочь прояснить это. Тем не менее, наши результаты, а также результаты предыдущих исследований показывают, что определение ключевой эволюционной информации важно для понимания взаимодействий белок-лед и для понимания развития белков-антифризов из ранее существовавших белков, не являющихся антифризами.

Сравнение наших семи основных характеристик с современными инструментами для различения антифризов и неантифризовых белков

С развитием секвенирования генома было накоплено большое количество секвенированных белков, которые необходимо функционально аннотировать.Существует множество инструментов автоматической аннотации для идентификации белков-антифризов, таких как TargetFreeze (He et al., 2015), AFP_PSSM (Zhao et al., 2012), CryoProtect (Pratiwi et al., 2017) и afpCOOL (Eslami et al. , 2018). Однако в этих инструментах используется слишком много функций (), которые часто могут быть избыточными и приводить к переобучению. Мы обнаружили, что высокая производительность была достигнута с использованием только семи ключевых функций, полученных из PSSM. По сравнению с другими методами наш метод использовал наименьшее количество признаков при достижении наивысшего коэффициента корреляции Мэтьюза (MCC), который представляет собой корреляцию между предсказанной и истинной классификациями и устойчив к несбалансированным данным (Boughorbel et al., 2017) и ACC, а также высокие значения SN и SP (). Эти результаты показывают, что наша модель превосходит современные инструменты и поэтому может быть более подходящей для различения антифризов и неантифризовых белков.

ТАБЛИЦА 2

Сравнение наших семи ключевых характеристик, полученных на основе позиционно-зависимых матриц оценок (PSSM), с существующими методами машинного обучения для различения антифризов и неантифризовых белков с использованием независимых наборов тестовых данных.

(PDF) Идентификация основных белков антифриза

fbioe-08-00244 24 марта 2020 г. Время: 15:58 # 7

Sun et al.Эволюционная информация идентифицирует белки-антифризы

ССЫЛКИ

Appels, R., Eversole, K., Feuillet, C., Keller, B., Rogers, J., Stein, N., et al. (2018).

Сдвиг границ в исследованиях и селекции пшеницы с использованием полностью аннотированного эталонного генома

. Наука 361: eaar7191. DOI: 10.1126 / science.aar7191

Атичи, О., и Налбантоглу, Б. (2003). Белки-антифризы высших растений.

Фитохимия 64, 1187–1196. DOI: 10.1016 / s0031-9422 (03) 00420-5

Бар, М., Бар-Зив, Р., Шерф, Т., и Фасс, Д. (2006). Эффективное производство свернутого

функционального антифриза β-спирали с высокой степенью дисульфидных связей в бактериях.

Протеин Экспресс. Purif. 48, 243–252. DOI: 10.1016 / j.pep.2006.01.025

Баруа, С., Ислам, М. М., Яо, X. и Мурасе, К. (2014). MWMOTE – большинство

метод взвешенной передискретизации меньшинства для обучения несбалансированному набору данных.

IEEE Trans. Знай. Data Eng. 26, 405–425. DOI: 10.1109 / TKDE.2012.232

Беттс, М. Дж., И Рассел, Р. Б. (2003). «Аминокислотные свойства и последствия

замен», в «Биоинформатике для генетиков», ред. М. Р. Барнс и И. К. Грей

(Лондон: Wiley).

Бхагват М. и Аравинд Л. (2007). «Учебное пособие по PSI-BLAST», в Comparative

Genomics, ed. Н. Х. Бергман (Тотова, Нью-Джерси: Humana Press).

Boughorbel, S., Jarray, F., and El-Anbari, M. (2017). Оптимальный классификатор для несбалансированных данных

с использованием метрики коэффициента корреляции Мэтьюза.PLoS ONE

12: e0177678. DOI: 10.1371 / journal.pone.0177678

Бу, Х. Д., Хао, Дж. К., Гуань, Дж. Х. и Чжоу, С. Г. (2018). Прогнозирование

энхансеров из нескольких клеточных линий и тканей на разных стадиях развития

на основе метода SVM. Curr. Биоинформат. 13, 655–660. DOI: 10.2174 /

1574893613666180726163429

Чао, Л., Цзинь, С., Ван, Л., Го, Ф. и Цзоу, К. (2019a). AOPs-SVM: классификатор антиоксидантных белков на основе последовательности

с использованием машины опорных векторов.Передний.

Bioeng. Biotechnol. 7: 224. DOI: 10.3389 / fbioe.2019.00224

Чао, Л., Вэй, Л. и Цзоу, К. (2019b). SecProMTB: классификатор на основе SVM для

секреторных белков Mycobacterium tuberculosis с несбалансированным набором данных.

Протеомика 19: e1

7. DOI: 10.1002 / pmic.201

7

Chen, W., Xing, P., and Zou, Q. (2017). Обнаружение сайтов N6-метиладенозина

из транскриптомов РНК с использованием машин векторов поддержки ансамбля. Sci. Реп.

7: 40242.DOI: 10.1038 / srep40242

Чунг, Р. К. Ф., Нг, Т. Б. и Вонг, Дж. Х. (2017). Белки-антифризы из

различных организмов и их применение: обзор. Curr. Prot. Peptide Sci.

18, 262–283. DOI: 10.2174 / 1389203717666161013095027

Чжоу, К. К., и Шен, Х. Б. (2007). MemType-2L: веб-сервер для прогнозирования

мембранных белков и их типов путем включения информации об эволюции

через Pse-PSSM. Biochem. Биофиз. Res.Commun. 360, 339–345. DOI: 10.

1016 / j.bbrc.2007.06.027

Кордн, И., Гарка, С., Фернндес, А., и Эррера, Ф. (2018). дисбаланс: предварительная обработка

алгоритмов для несбалансированных наборов данных. Пакет R, версия 1.0.2. Доступно в Интернете по адресу:

https://rdrr.io/cran/imbalance/ (по состоянию на 21 июля 2019 г.).

Дэвис П. Л. и Хью К. Л. (1990). Биохимия рыбных антифризовых белков. FASEB

J. 4, 2460–2468. DOI: 10.1096 / fasebj.4.8.2185972

Де Джей, Н., Papillon-Cavanagh, S., Olsen, C., El-Hachem, N., Bontempi, G., и

Haibe-Kains, B. (2013). mRMRe: пакет R для параллельного выбора функций ансамбля mRMR

. Биоинформатика 29, 2365–2368. DOI: 10.1093 / bioinformatics /

btt383

ДеВриз, А. Л., Комацу, С. К., и Фини, Р. Э. (1970). Химические и физические свойства

свойств гликопротеинов антарктических рыб, снижающих температуру замерзания.

J. Biol. Chem. 245, 2901–2908.

ДеВриз, А.Л. и Вольшлаг Д. Э. (1969). Морозостойкость некоторых видов антарктической рыбы

. Science (Нью-Йорк, Нью-Йорк) 163, 1073–1075. DOI: 10.1126 / science.163.3871.

1073

Дин К. и Пэн Х. С. (2003). «Выбор минимальной избыточности из данных экспрессии генов на микрочипах

», в Proceedings of the 2003 Ieee Bioinformatics

Conference, Los Alamitos, 523–528. DOI: 10.1109 / csb.2003.1227396

Докси, А. К., Яиш, М. У., Грайт, М., и МакКонки, Б.Дж. (2006). Упорядоченные

поверхностных атомов углерода

различают антифризные белки и их связывающие со льдом области.

Нат. Biotechnol. 24, 852–855. DOI: 10.1038 / nbt1224

Думан, Дж. Г., и Олсен, Т. М. (1993). Термический гистерезис активности белков у

бактерий, грибов и филогенетически разнообразных растений. Криобиология 30, 322–328.

doi: 10.1006 / cryo.1993.1031

Эслами, М., Ширали Хоссейн, Заде, Р., Такалло, З., Махдевар, Г., Эмамджомех,

A., и другие. (2018). afpCOOL: инструмент для прогнозирования протеина антифриза. Heliyon

4: e00705. DOI: 10.1016 / j.heliyon.2018.e00705

Эварт, К. В., Линь, К., и Хью, К. Л. (1999). Структура, функции и эволюция белков-антифризов

. Клетка. Мол. Life Sci. 55, 271–283. DOI: 10.1007 / s000180050289

Ge, Y., Zhao, S., and Zhao, X. (2019). Пошаговый алгоритм классификации вторичных структур белка

на основе двухслойной модели SVM. Геномика 112,

1941–1946.doi: 10.1016 / j.ygeno.2019.11.006

Грейтер, С. П., Койпер, М. Дж., Ганье, С. М., Уокер, В. К., Цзя, З., Сайкс, Б. Д. и др.

(2000). Структура β-спирали и ледяные свойства гиперактивного антифриза

, белка насекомого. Nature 406, 325–328. DOI: 10.1038 / 35018610

Грэм, Л. А., и Дэвис, П. Л. (2005). Богатые глицином антифризы из снега

eas. Science 310, 461–461. DOI: 10.1126 / science.1115145

Gri ffi th, M., Ала, П., Ян, Д. С. С., Хон, В. К., и Мо Атт, Б. А. (1992).

Белок-антифриз, продуцируемый эндогенно в листьях озимой ржи. Plant Physiol.

100, 593–596. DOI: 10.1104 / pp.100.2.593

Гупта Р. и Десвал Р. (2014). Протеины-антифризы позволяют растениям выжить в условиях замораживания

. J. Biosci. 39, 931–944. DOI: 10.1007 / s12038-014-9468-2

He, X., Han, K., Hu, J., Yan, H., Yang, J.-Y., Shen, H.-B., et. al. (2015). TargetFreeze:

, идентифицирующий антифризы с помощью комбинации весов с использованием информации об эволюции последовательности

и псевдоаминокислотного состава.J. Membr. Биол.

248, 1005–1014. DOI: 10.1007 / s00232-015-9811-z

Hon, W. C., Grith, M., Chong, P., and Yang, D. S. C. (1994). Экстракция и выделение

белков-антифризов из листьев озимой ржи (Secale cereale L.). Завод

Physiol. 104, 971–980. DOI: 10.1104 / pp.104.3.971

Husby, J. A., and Zachariassen, K. E. (1980). Антифризы в организме жидкость

зимних активных насекомых и пауков. Experientia 36, ​​963–964. DOI: 10.1007/

BF01953821

Джавед Ф. и Хаят М. (2019). Предсказание субклеточной локализации мультиметочных белков

путем включения характеристик последовательности в Chou’s PseAAC. Геномика

111, 1325–1332. DOI: 10.1016 / j.ygeno.2018.09.004

Цзя, З. К., и Дэвис, П. Л. (2002). Белки-антифризы: необычное взаимодействие рецептор-лиганд

. Trends Biochem. Sci. 27, 101–106. DOI: 10.1016 / s0968-0004 (01)

02028-x

Кандасвами, К.K., Chou, K. C., Martinetz, T., Moller, S., Suganthan, P. N.,

Sridharan, S., et al. (2011). AFP-Pred: метод случайного леса для прогнозирования

антифризовых белков на основе свойств, полученных из последовательности. J. Theor. Биол. 270, 56–62.

DOI: 10.1016 / j.jtbi.2010.10.037

Кассамбара А. и Мундт Ф. (2017). factoextra: Извлечение и визуализация результатов

многомерного анализа данных. Пакет R версии 1.0.5. Доступно в Интернете по адресу:

https: // cloud.r-project.org/web/packages/factoextra/index.html (дата обращения:

,

, 9 июня 2019 г.).

Хан, М. С., Ибрагим, С. М., Адаму, А. А., Рахман, М. Б. А., Бакар, М. З. А.,

Нордин, М. М. и др. (2019). Гистологические исследования перед трансплантацией кожных трансплантатов

, криоконсервированных в антифризном пептиде, ориентированном на антарктические дрожжи αhelix (Afp1m).

Криобиология [в печати]. DOI: 10.1016 / j.cryobiol.2019.09.012

Knight, C. A., Cheng, C. C., and DeVries, A. L. (1991).Адсорбция альфа-спиральных пептидов антифриза

на определенных плоскостях поверхности кристаллов льда. Биофиз. J. 59, 409–418.

DOI: 10.1016 / s0006-3495 (91) 82234-2

Koehl, P., and Levitt, M. (1999). Конформационные предпочтения

аминокислот на основе структуры. Proc. Natl. Акад. Sci. США 96, 12524–12529. DOI: 10,1073 / PNAS.

96.22.12524

Кун, М. (2008). Построение прогнозных моделей в R Использование пакета каретки. J. Stat.

Софт. 28, 1–26.DOI: 10.18637 / jss.v028.i05

Ли, С. Г., Кох, Х. Й., Ли, Дж. Х., Кан, С. Х. и Ким, Х. Дж. (2012).

Криоконсервативное действие рекомбинантного ледяного связывающего белка из арктических

дрожжей Leucosporidium sp на эритроциты. Прил. Biochem. Biotechnol. 167,

824–834. DOI: 10.1007 / s12010-012-9739-z

Li, D., Ju, Y., and Zou, Q. (2016). Прогнозирование белковых складок с помощью

SVM с иерархической структурой. Curr. Proteom. 13, 79–85. DOI: 10.2174/

157016461302160514000940

Ли, Н., Кендрик, Б.С., Мэннинг, М.С., Карпентер, Дж. Ф. и Думан, Дж. Г. (1998).

Вторичная структура белков-антифризов перезимовавших личинок жука Dendroides canadensis

. Арх. Biochem. Биофиз. 360, 25–32. DOI: 10.1006 /

abbi.1998.0930

Мондал С. и Пай П. П. (2014). Псевдоаминокислотный состав Chou улучшает предсказание белка антифриза на основе последовательности

.J. Theor. Биол. 356, 30–35. DOI:

10.1016 / j.jtbi.2014.04.006

Наинг, А. Х., и Ким, К. К. (2019). Краткий обзор применения белков антифриза

в криоконсервации и метаболической генной инженерии. 3 Биотех 9: 9.

doi: 10.1007 / s13205-019- 1861-y

Границы биоинженерии и биотехнологии | www.frontiersin.org 7 марта 2020 г. | Том 8 | Статья 244

Как секс, ложь и антифриз привели к смерти «Ангела», Черрил Делл

.

Например, что можно сказать о ВИЧ-инфицированной женщине или гомосексуалисте, которая является восприимчивым партнером при вагинальном или анальном сексе и чей партнер не пользуется презервативами? А как насчет орального секса, сломанных презервативов, других ЗППП, вертикальной передачи? Суд промолчал по этим важным вопросам.Но даже если посмотреть на факты дела Мабиора, риск передачи ВИЧ при высокой вирусной нагрузке и отсутствии презервативов при интродукционном вагинальном сексе оценивается Центром по контролю и профилактике заболеваний США на уровне 5 из 10, i.

Канада: Верховный суд ухудшает плохой закон о раскрытии информации о ВИЧ

Теперь обвиняемый должен будет доказать, что он использовал презерватив и имел низкую вирусную нагрузку во время предполагаемого акта по обоюдному согласию. Такое неразглашение информации по-прежнему рассматривается канадским законодательством как мошенничество, лишающее законной силы согласие на секс.Это считается сексуальным посягательством при отягчающих обстоятельствах, которое влечет за собой максимальное наказание в виде пожизненного заключения и регистрации в качестве сексуального преступника.

Мобилизация ресурсов домашних хозяйств для обеспечения безопасности городского водоснабжения в странах Африки к югу от Сахары. Медицина, которая работает и имеет приятный вкус: антикоррупционные программы транснациональных корпораций.

Дом — —

Молодежная безработица: исследование взаимозависимости студентов и родителей в процессе поиска работы. Курирование музея истории: практики трансмедиа, интерактивные выставки и молодежное гражданство.Наказание в общественных интересах: эмпирическое исследование карательного правосудия и соблюдения налоговых требований. Информирование педагогических практик для обучения аспирантов-психотерапевтов: взгляд на роль структуры позитивной психологии в контексте супервизии. Превращаются ли из великих последователей в великих лидеров? Распутывание качеств, ценимых в последователях и лидерах.

Социальные роботы в доме: исследование влияния разумных нечеловеческих агентов на поведение человека в домашних условиях.

О ACCM

Различия в характеристиках между теми, кто практиковал безопасный и небезопасный секс, оценивали с помощью бинарной логистической регрессии. Раскрытие информации также было в значительной степени связано с использованием презервативов, что подчеркивало пользу раскрытия информации о снижении риска передачи для этих участников. ВИЧ и безопасный, здоровый секс. Половые различия в отношении к неверности партнера. CL XIX. Интернет стал популярным местом для встреч с сексуальными партнерами. В многофакторном анализе факторы, которые были независимо связаны с ВИЧ, включали пожизненное употребление инъекционных наркотиков, начало полового акта в возрасте до 15 лет, положительный результат теста на одну или несколько ИППП и овдовение.Доступен полный текст Характеристика вирусов в парах передачи ВИЧ-1 poz gay dating Saint Hippolyte Canada помогает определить биологические детерминанты заразности и оценить возможные меры по снижению передачи. Основными темами были: 1 упущенные возможности для бесед о профилактике ВИЧ e. Поперечное исследование с использованием структурированной анкеты было проведено среди финансовых мальчиков в Чанша, Китай, в период с июля по январь

.

Гуманизация подходов к сокращению долга через исследование сообщества, эмоций и благополучия.На пути к структуре приверженности лидерству: изучение индивидуальных, командных и организационных результатов. Расшифровка происхождения: использование отметин на теле для обнаружения африканских идентичностей во время работорговли. Энергетический переход и трансформация сельских районов: размещение «сельских» в управлении переходом на энергоносители.

Сохранение лесов, самоопределение коренных народов и изменение климата: эмпирический анализ программы Эквадора Socio Bosque. Исследование государственного учета для устранения системных недостатков финансового управления государственными закупками.

Совместное видео как метод и средство высказывания и защиты в контексте членовредительства. Понимание связи между межличностными отношениями и путями бездомности для молодых людей.

ВИЧ-инфицированный мужчина, который предотвратил заражение тысячей людей — BBC

Программа спортивного образования на уровне сообществ: Изучение положительного развития молодежи у элитных подростков-студентов-спортсменов. Междисциплинарный подход к разработке и оценке поддерживаемого мобильными технологиями и учитывающего культурные особенности лексического вмешательства для студентов-аборигенов.Отзывчивость канадских избранных представителей своим избирателям: полевой эксперимент. Совместное управление и разрешение споров в горнодобывающем секторе в районе великих озер Африки.

Влияние отношения родителей к математике и домашних заданий на успехи детей в математике. Раскрытие своей судьбы: исследование программы правительства Канады по защите меховой промышленности. Работа в рыболовстве: объяснение неприемлемых условий труда в исключительном секторе. Встречи с поставщиками услуг как посредниками в переходе от бездомности: межсекторное исследование.Наука, технологии, инженерия и математика STEM в дошкольном образовании: возможности и проблемы.

Суровость приговора и депортация: отображение преступности и побочных последствий наказания в Управлении по делам иммиграции и беженцев Канады. Может ли это быть место для нас? Home Base: всесторонняя макроэкономическая перспектива условий жизни молодых людей во всем мире. Как советы директоров увольняют генеральных директоров?

Информационная роль финансовых рынков и финансовых инноваций.Работа за пределами гендерной бинарности: разработка количественных исследовательских стратегий, отражающих гендерную идентичность и выражения для данных на рабочем месте. Жилище в возможностях: крошечные домики как проводники материальных, социальных и этических преобразований. Изучение взаимосвязи транснационализма и интеграции: исследование среди иммигрантов из Нигерии и Эритреи в Торонто. Что такое человеческий сон? Глобальное сравнительное исследование сна в традиционных обществах. Сообщалось об общем количестве мест встречи сексуальных партнеров, включая уникальные места.

Среди интернет-сайтов 3 из 5 сайтов, о которых чаще всего сообщалось за последние 5 лет, также входили в пятерку самых популярных сайтов за последний год. Это исследование дает более полное представление о местах встречи сексуальных партнеров, о которых МСМ сообщают с течением времени, и информацию для департаментов здравоохранения о типах мест для доступа к группе населения с высоким риском передачи ВИЧ.

Самостоятельное раскрытие мужчинами своего ВИЧ-положительного серологического статуса половым партнерам: обзор литературы. ВИЧ-инфицированные мужчины сталкиваются с множеством проблем при принятии решения о раскрытии своего серологического статуса половым партнерам.Цель этого обзора литературы — выявить достоверные и надежные результаты исследований, которые определяют факторы, влияющие на раскрытие серологического статуса половым партнерам ВИЧ-положительными мужчинами. Статьи, включенные в обзор, были идентифицированы посредством электронного поиска с использованием подходящих терминов, связанных с раскрытием информации половым партнерам, с последующим поиском ссылок на дополнительные статьи.

Обобщение результатов исследований по 17 статьям представлено под заголовками «Общие сведения, контекстные и психосоциальные факторы, влияющие на раскрытие информации».Анализ данных показывает, что различия в степени раскрытия информации зависят от факторов полового партнера, включая серостатус, статус отношений и количество половых партнеров.

Кроме того, предполагаемая эффективность и ожидаемые положительные результаты были наиболее частыми теоретическими конструкциями, включенными в исследования, связанные с раскрытием информации, предполагая, что эти факторы играют важную роль в процессе раскрытия информации половым партнерам. Межличностные факторы, которые положительно повлияли на самораскрытие, включали супружескую поддержку, эмоциональные инвестиции и общение о безопасном сексе, включая вопросы о серостатусе партнера.Самораскрытие не всегда ассоциировалось с безопасным сексом.

Рекомендации для будущих исследований представлены на основе результатов, включенных в этот обзор. Раскрытие информации о ВИЧ половым партнерам облегчает совместное принятие решений и стратегии снижения риска для более безопасного сексуального поведения, но на раскрытие информации могут влиять симптомы депрессии. Раскрытие также связано с самоэффективностью раскрытия информации, которая, в свою очередь, также может зависеть от депрессивных симптомов.

В этом исследовании изучалась взаимосвязь между депрессией и раскрытием информации о ВИЧ партнерам после постановки диагноза среди мужчин, практикующих секс с мужчинами-МСМ, опосредованная самоэффективностью раскрытия информации.Более одной трети выборки сообщили об усилении депрессивных симптомов вскоре после постановки диагноза, и в равных пропорциях, каждая треть которых не была раскрыта никому, некоторым или всем партнерам в течение 3 месяцев после постановки диагноза. Симптомы депрессии были отрицательно связаны с самоэффективностью раскрытия информации и раскрытием информации партнерам, в то время как самоэффективность раскрытия информации была положительно связана с раскрытием информации.

Эти данные подчеркивают важность борьбы с депрессией, возникающей после постановки диагноза, для улучшения последующего раскрытия информации сексуальным партнерам.Самостоятельное раскрытие мужчинами факта ВИЧ-инфекции половым партнерам: выборка из Гавайев. В этом исследовательском исследовании использовался план перекрестного опроса с самоотчетом для описания раскрытия серологического статуса недавним сексуальным партнерам среди многонациональной группы ВИЧ-инфицированных мужчин с Гавайев, b изучения факторов, влияющих на раскрытие информации, и c изучения взаимосвязи между раскрытием информации и презервативами. использовать.

Респонденты вспомнили о своем сексуальном опыте с тремя последними СП за 3 месяца до проведения исследования.На раскрытие информации значительно влияли серостатус SP, статус отношений, самоэффективность при принятии решений о раскрытии информации и употребление кокаина перед сексом. Раскрытие информации также было в значительной степени связано с использованием презервативов, что подчеркивало пользу раскрытия информации о снижении риска передачи для этих участников.

Канада: Верховный суд усугубляет плохой закон о раскрытии информации о ВИЧ

Суд постановил, что лица, которые знают, что они ВИЧ-инфицированы, несут ответственность за то, что было законом до этой даты — и что постановление подтвердило — было, например, в отношении ВИЧ-инфицированной женщины (или мужчины-гея), которая является.лесбиянки, геи, бисексуалы, транссексуалы или интерсексуалы (ЛГБТИ) St George’s, University of. Лондон, Лондон, литература о миграции дат и источники данных. Например, в канадских школах Совместная инициатива ООН по миграции, здоровью и ВИЧ в Азии Ипполит д’Альбис · Экрам Бубтейн · Драман Кулибали.

Лица, осуществляющие уход за ВИЧ, должны регулярно сообщать о раскрытии информации СП и предлагать меры по более широкому использованию презервативов. Меры по укреплению убеждений в эффективности принятия решений о раскрытии информации должны быть адаптированы для помощи мужчинам с несколькими СП и тем, кто недавно употреблял кокаин.Уведомление ВИЧ-партнера включает в себя обращение к половым партнерам людей с положительным результатом теста на ВИЧ и направление их в службы тестирования, лечения и профилактики ВИЧ.

Чтобы понять ценности и предпочтения ключевых и общих групп населения в Ракаи, Уганда, мы провели 6 обсуждений в фокус-группах и 63 глубинных интервью в сообществах с высокой распространенностью рыбаков и с сообществами с низкой распространенностью на материке. Среди участников были рыбаки и секс-работники из рыбацких сообществ, мужчины и женщины из континентальных сообществ, а также медицинские работники.

Вопросы исследовали три подхода: пассивное направление, направление к поставщику услуг и направление по контракту. Качественные данные были закодированы и проанализированы с использованием группового матричного подхода. Участники согласились, что пассивное направление больше всего подходит для основных партнеров.

• .
• Канада: Верховный суд усугубляет плохой закон о раскрытии информации о ВИЧ — POZ;
• Субсидии развития Savoir: concours de;
• .

Направление поставщика было приемлемым в рыболовных сообществах для уведомления нескольких случайных партнеров.Поставщики медицинских услуг выразили озабоченность по поводу ограниченного времени, ресурсов и обучения для подходов с привлечением поставщиков. Варианты уведомления партнера могут помочь людям преодолеть препятствия на пути к раскрытию серологического статуса по ВИЧ и помочь охватить ключевые группы населения. Однако мало исследований, изучающих механизмы, связывающие стигму с раскрытием информации. Это специальное исследование для оценки взаимосвязи между предполагаемой стигмой и раскрытием информации о ВИЧ случайным половым партнерам на основе социальной когнитивной теории.

Анализ моделирования траектории был использован для оценки структурных взаимосвязей, основанных на теории.Воспринимаемая стигма отрицательно ассоциировалась с отношением, намерениями и поведением раскрытия информации о ВИЧ случайным половым партнерам.

Панель навигации правительства Канады

Ассоциация была полностью опосредована оценкой раскрытия информации, включая ожидания результатов раскрытия информации, затраты и самоэффективность. Результаты этого исследования добавляют новые знания о стигме в связи с ВИЧ и раскрытии информации, а также предоставляют своевременные данные, поддерживающие более эффективные поведенческие вмешательства для поощрения раскрытия информации о ВИЧ среди МСМ.Большинство предыдущих исследований факторов передачи ВИЧ было сосредоточено на индивидуальных характеристиках, а не на поведении на диадическом уровне, таком как выбор полового партнера. Участники были набраны через мобильное приложение для мужчин, чтобы они могли познакомиться с другими мужчинами, и заполнили онлайн-опрос о поведении, связанном с риском заражения ВИЧ.

Все анализы выборки МСМ проводились в целом. МСМ, использующие мобильные приложения, в целом отметили, что они отдают предпочтение белым и латиноамериканским мужчинам, а темнокожим и азиатским мужчинам — как по половому признаку, так и по партнерам.Эти предпочтения партнеров, вероятно, влияют на структуру сексуальных сетей МСМ и могут способствовать усилению кластеризации в сексуальных сетях с высоким уровнем инфицирования ВИЧ.

• топ платных сайтов знакомств для геев Steinbach Canada.
• .
• .
• РАЗМЕСТИТЬ НАЗВАНИЕ ЗДЕСЬ.

участников — ЖСБ с нынешним супругом или постоянным партнером. Средний возраст участников составлял 33 года, а среднее количество лет работы секс-работником — 6 лет.Используя многомерную логистическую регрессию, факторы, независимо связанные с ИПВ, включали в себя переживание жестокого обращения в детстве, партнера, который занимался сексом с кем-то еще, и более низкую силу сексуальных отношений.

Наши результаты свидетельствуют о необходимости ранее предоставленных услуг по скринингу и профилактике насилия для ЖСБ в Мексике. При оценке риска ИПВ необходимо внимательно учитывать динамику отношений, такую ​​как неверность и сила отношений.

Архив блога по пожарной безопасности — Пожарное оборудование, профилактика, защита

1 февраля 2011 г. — Обновление CASA по антифризовым системам — Из бюллетеня NFSA e-Tech Bulletin — Обновление по новым предложениям TIA по антифризу NFPA

Предварительные промежуточные поправки (TIA) к NFPA 13, 13R и 13D, выпущенные Советом по стандартам NFPA в августе 2010 года, фактически запретили использование антифриза в новых жилых помещениях.Эти TIA не касались использования антифриза в других помещениях, а также не содержали никаких ограничений или инструкций по использованию антифриза в существующих системах. Персонал NFPA попытался предоставить свои собственные рекомендации, выпустив в том же месяце обновленное предупреждение Fire Safety Alert , в котором рекомендовалось ограничить существующие системы максимальной концентрацией по объему 50% глицерина или 40% пропиленгликоля, и только Для обеспечения надлежащего перемешивания следует использовать заводские предварительно приготовленные растворы.

Комитеты по дождеванию NFPA и Комитет NFPA по проверке, тестированию и техническому обслуживанию систем противопожарной защиты на водной основе теперь имели время изучить вопрос, проанализировать соответствующие исследования и предложить свои собственные предварительные временные поправки к стандартам NFPA. Голосование в комитетах завершено, и новая серия TIA будет передана Совету по стандартам NFPA для рассмотрения и возможного выпуска на его заседании в конце февраля.

Четыре TIA получили необходимые три четверти (75%) голосов своих соответствующих комитетов как по техническому содержанию, так и по чрезвычайному характеру, и будут переданы Совету по стандартам, по одному для NFPA 13D (TIA 1012), NFPA 13R (TIA 1013), NFPA 13 (TIA 1015) и NFPA 25 (TIA 1014). TIAs приведут к добавлению определения термина предварительно смешанный раствор антифриза вместе с ограничениями для спринклерных систем как в новых, так и в существующих системах во всех типах помещений.Хотя TIA состоят из множества страниц удаленного и добавленного текста, суть того, где они заканчиваются, можно резюмировать следующим образом:

Определение:
Предварительно смешанный раствор антифриза — Смесь антифриза с водой, приготовленная производителем с соблюдением процедуры контроля качества, обеспечивающей однородность раствора антифриза.

Для новых систем:
Растворы антифризов будут ограничены растворами-премиксами глицерина с максимальной концентрацией 48% по объему или пропиленгликолем с максимальной концентрацией 38% по объему.Производители антифризов должны будут предоставить сертификат с указанием типа, концентрации по объему и точки замерзания.

Другие готовые растворы будут разрешены для использования, если они специально перечислены, включая существующие решения, перечисленные для использования с системами ESFR.

Для существующих систем:
Растворы антифризов будут ограничены растворами глицерина с максимальной концентрацией 50% по объему или пропиленгликоля с максимальной концентрацией 40% по объему.

Ежегодно будут проверяться антифризы. Если какой-либо образец существующего раствора превышает допустимые концентрации или если тип антифриза в системе не может быть надежно определен, систему необходимо будет полностью слить и снова заполнить новым приемлемым раствором. Если для предотвращения замерзания требуется концентрация, превышающая допустимую в настоящее время, необходимо использовать альтернативные методы предотвращения замерзания трубы.

Для NFPA 25 новые введенные растворы будут ограничиваться предварительно приготовленными растворами глицерина с максимальной концентрацией 48% по объему или пропиленгликолем с максимальной концентрацией 38% по объему.Для NFPA 13D вновь представленные растворы могут включать предварительно приготовленные растворы глицерина с максимальной концентрацией 50% по объему или пропиленгликоль с максимальной концентрацией 40% по объему.

Другие готовые растворы будут разрешены для использования, если они специально перечислены. Когда система сливается, обычно нет необходимости сливать капли, но следует рассмотреть возможность слива капель более 36 дюймов, если есть доказательства накопления недопустимо высоких концентраций антифриза.

Для NFPA 25 был предложен отдельный TIA 1016, который позволил бы сохранить более высокие концентрации антифриза в незанятых зонах здания. Ему не удалось получить необходимую поддержку комитета на три четверти, поскольку некоторые члены, озабоченные субъективностью определения обычно незанятых территорий, присоединились к тем, кто выступал против любых ограничений на антифриз в существующих системах.
Редактировать

15 декабря 2010 г. — Обновленная информация о спринклерных системах антифриза
В августе 2010 года NFPA запретило установку всех новых спринклерных систем для защиты от замерзания в жилых помещениях.Это связано с рядом инцидентов, когда система антифриза не подавляла возгорание, но, к сожалению, вызвала вспышку или воспламенение смеси антифриза и воды.

Когда NFPA запретило использование антифризов в новых установках, оно начало изучать возможность того, действительно ли антифризы представляют опасность для общественной безопасности. Это исследование было разбито на два этапа. NFPA завершило оба этапа исследования и в настоящее время рассматривает результаты и применяет любые модификации кода.

Для получения дополнительной информации просмотрите обновление от NFPA, касающееся спринклерных систем с антифризом. | Вы также можете просмотреть заключительный отчет исследования для получения дополнительной информации.

25 октября 2010 г. — Новый продукт Potter: вентиляционное отверстие Potter и автоматический выпуск воздуха

Potter только что объявил о единственном в отрасли вентиляционном отверстии, внесенном в список UL для пожарных спринклерных систем. Уменьшение количества воздуха в спринклерной системе пожаротушения необходимо для защиты трубопроводов системы от воздействия коррозии, которая часто встречается на границе раздела воздух / вода в трубопроводе системы пожаротушения.

Недавно обновленный автоматический выпуск воздуха Potter (PAAR-B) использует PAV и автоматически удаляет воздух, попавший в спринклерные системы под давлением.

Вентиляционное отверстие Potter (PAV) внесено в список для применения в ответвлениях пожарных спринклерных систем в соответствии с UL 2573 — «Автоматические клапаны выпуска воздуха для службы противопожарной защиты».

19 октября 2010 г. — тело найдено после пожара в гараже
СЕВЕРНАЯ ДЕЛЬТА — Тело мужчины было обнаружено в гараже механика в Северной Дельте после того, как пожарные тушили пожар там поздно вечером в понедельник.Полиция забаррикадировала небольшой магазин на 94-й авеню, 11945, желтой полицейской лентой и констеблем, охранявшим его, в то время как механики из ближайших гаражей сновали вокруг.

Сержант полиции Дельты. «В настоящее время полиция Дельты рассматривает смерть как подозрительную и сохраняет место преступления как место преступления до тех пор, пока не будет установлено иное по результатам вскрытия и дальнейшего расследования», — сказал Брукс.

Для получения дополнительной информации просмотрите полный рассказ о пожаре в гараже.

18 октября 2010 г. — Пожар в больнице Альберты нанес ущерб в размере 200 000 долларов
Горящий диванчик вынудил эвакуировать 106 пациентов в больнице Альберты в воскресенье вечером.Сотрудник 12-го корпуса психиатрической больницы около 21:30 почувствовал запах гари. и прошел через здание. Пламя повредило диванчик, некоторые стулья и занавески, причинив тепловое повреждение стене и легкое дымовое повреждение здания. Пациенты были эвакуированы в другое здание больницы.

Для получения дополнительной информации просмотрите полную статью «Пожар в больнице Альберты нанес ущерб в размере 200 000 долларов США».

15 октября 2010 г. — акция «Месяц противопожарной защиты»!
Active Fire & Safety Services предлагает 10% скидку на все планы противопожарной безопасности, действующие с октября по ноябрь 2010 г.

Индивидуальные планы и руководства по конкретным проектам для коммерческих, жилых и промышленных проектов. У нас прекрасные отношения со всеми местными пожарными командами на нижнем материке. Приветствуются срочные работы.

Почему моя машина перегревается ?. Майк Эйлс | Компания Hogan & Sons Tire and Auto

Майк Эйлс

Лисбург, Вирджиния — Вы, наверное, знаете, что двигатель вашего автомобиля сильно нагревается. Слишком жарко на ощупь. Но знаете ли вы, что это действительно хорошо? Ваш двигатель предназначен для работы в определенном диапазоне температур — обычно около 200 градусов по Фаренгейту.Жара нормальная и необходимая.

С другой стороны, слишком много тепла — это , а не — это хорошо. Предупреждающая лампа или индикатор на приборной панели, пар, идущий из-под капота, скопившаяся жидкость на земле под двигателем или сладкий запах кленового сиропа, исходящий от автомобиля, — все это признаки того, что двигатель может быть слишком горячим. А перегрев может вызвать серьезное повреждение двигателя, что приведет к затратам на ремонт в тысячи долларов.

Итак, что вызывает перегрев автомобиля? Какой ущерб может произойти, если это случится? Как вы вообще можете предотвратить возникновение проблемы? И что делать, если это с тобой случится?

Почему мой двигатель перегревается?

Ваш автомобиль оборудован системой охлаждения, предназначенной для регулирования температуры двигателя, как правило, в пределах 195–220 градусов.Система состоит из множества компонентов и использует жидкий хладагент (также известный как «антифриз»), чтобы отводить часть тепла от двигателя, чтобы оно могло быть выпущено в воздух. Если проблема возникает в любой точке системы охлаждения, может произойти перегрев.

Например, если охлаждающая жидкость не может свободно проходить через систему, тепло будет задерживаться внутри двигателя, и температура двигателя повысится. Этот ограниченный поток охлаждающей жидкости может происходить несколькими способами. Водяной насос нагнетает охлаждающую жидкость через двигатель к радиатору.Если водяной насос неисправен, охлаждающая жидкость не сможет двигаться. Аналогичным образом, если термостат (клапан, который открывается и закрывается для регулирования температуры) неисправен, охлаждающая жидкость может не течь. Забитый радиатор или сердцевина нагревателя — или сломанный шланг охлаждающей жидкости — также могут ограничивать движение охлаждающей жидкости через систему охлаждения.

Помимо забитой охлаждающей жидкости, другой причиной перегрева двигателя является ограниченный поток воздуха . Нагретая охлаждающая жидкость покидает двигатель и направляется к радиатору, где тепло передается крошечным алюминиевым ребрам, через которые проходит воздух.Когда воздух проходит мимо ребер, тепло уходит вместе с ним. Если ребра радиатора забиты грязью и мусором, воздух не сможет пройти. Охлаждающий вентилятор предназначен для увеличения этого воздушного потока. Если вентилятор не работает, через ребра радиатора проходит недостаточное количество воздуха. В любом случае, засорение ребер охлаждения или неисправный вентилятор охлаждения может привести к перегреву.

Еще одна проблема — течь охлаждающей жидкости . Чтобы охлаждающая жидкость выполняла свою работу, она должна полностью заполнять систему охлаждения.Когда он протекает, его заменяет воздух. Любой воздух, присутствующий в системе, создает проблемы, в том числе пузырьки воздуха, которые блокируют поток охлаждающей жидкости. Утечки охлаждающей жидкости могут быть внешними (из радиатора, шлангов или уплотнений двигателя) или могут быть внутренними (в результате износа прокладки впускного коллектора, прокладки головки или деформированной / треснувшей головки блока цилиндров). Иногда утечки очевидны снаружи автомобиля (например, лужа жидкости на земле), а иногда они менее очевидны, особенно если утечка внутренняя.

Что произойдет, если двигатель перегреется?

Независимо от причины, если двигатель слишком долго перегревается, последствия могут быть серьезными. И действительно, повреждение не занимает много времени. Перегрев двигателя может привести к:

• Сниженной компрессии двигателя и отсутствию мощности
• Глохению
• Разрыву шланга радиатора
• Пожару в моторном отсеке
• Деформированной головке блока цилиндров или повреждению прокладки головки
• Повреждению клапанов, поршней, или цилиндры

Профилактическое обслуживание может помочь снизить вероятность перегрева.Следите за температурой двигателя и не игнорируйте сигнальные лампы на приборной панели. Периодически проверяйте систему охлаждения, чтобы убедиться, что охлаждающий вентилятор работает, а шланги в хорошем состоянии. Держите глаза открытыми на предмет утечек жидкости. Промывайте систему охлаждения каждые 30–60 км. И заменяйте термостат при каждом обслуживании системы охлаждения.

Что мне делать, если моя машина перегревается?

Если вы заметили какой-либо из симптомов перегрева двигателя во время вождения, выполните следующие действия, чтобы обезопасить себя и своих пассажиров и защитить двигатель от повреждений.

1. Включите обогреватель, чтобы отвести часть тепла двигателя в салон.
2. Остановите автомобиль как можно скорее — безопасно.
3. Выключите двигатель.
4. Выйдите из машины и откройте капот. Это позволит уйти большему количеству тепла. Но этого не делает, если пар идет из-под капота.
5. Отбуксируйте автомобиль в надежную ремонтную мастерскую.

Примечание: Не снимайте крышку радиатора при горячем двигателе! Пар изнутри радиатора может вызвать сильные ожоги и ожоги.Если вам нужно снять крышку (для добавления охлаждающей жидкости), подождите, пока шланг радиатора остынет на ощупь — не менее получаса — и накройте крышку полотенцем.

Перегрев двигателя случается не часто. Но если это все же произойдет, выполните следующие действия, чтобы не повредить двигатель. И получите профессиональную помощь как можно скорее. Еще лучше проверять систему охлаждения в рамках планового технического обслуживания, чтобы полностью избежать перегрева двигателя.

Hogan & Sons Шины и автомобили | Автор: Майк Эйлс | Авторские права Январь 2018 г.

Эта статья предназначена только в качестве общего руководства, и вы полагаетесь на ее материалы на свой страх и риск.Используя этот общий руководящий документ, вы соглашаетесь защищать, возмещать убытки и оградить Hogan & Sons Tire and Auto и ее дочерние компании от любых претензий, убытков, издержек и расходов, включая гонорары адвокатов, возникающих в связи с вашими или связанными с ними. использование этого руководящего документа. В той степени, в которой это полностью разрешено действующим законодательством, Hogan & Sons Tire and Auto не делает никаких заявлений или гарантий любого рода, явных или подразумеваемых, в отношении информации, содержания или материалов, включенных в этот документ.Это резервирование прав должно быть настолько широким и всеобъемлющим, насколько это разрешено законодательством государства вашего проживания.

Amazon.com: Алюминиевый сплав AntiFreeze Ice Cream Лопатка для мороженого Лопатка для печенья Лопатка для льда Лопатка для мороженого Лопатка для льда Маленькая мерная ложка Ложка для мороженого Металлическая ложка для льда Лопатка для печенья Лопатка для мороженого: Hogar y Cocina

---

Нет доступных пор эль моментов.
No sabemos si este producto volverá a estar disponible, ni cuándo.

• Asegúrate de que esto совпадают al ingresar tu número de modelo.
• Лопатки для мороженого Лопатки для печенья Металлический совок Лопатка для льда из нержавеющей стали Лопатка для мороженого из нержавеющей стали Металлическая ложка для мороженого Лопатка для мороженого Металлические совки Стальная ложка
• Изготовлен из прочного алюминиевого сплава с жидкостью для размораживания, запечатанной внутри ручки. Круглая ложка для мороженого. Маленькие ложки для мороженого.
• Только ручная стирка Лопатка для мороженого из нержавеющей стали Лопатка для мороженого из нержавеющей стали Ложки для мороженого из нержавеющей стали Ложка для мороженого из нержавеющей стали Лопатка для мороженого из нержавеющей стали

Bony Levy Pav? Ожерелье с подвеской в ​​виде символа бесконечности с бриллиантами сбоку (эксклюзив Nordstrom) Отзывы

Проверить специальное предложение — Ограниченное по времени предложение

[Проверить специальное предложение! ]

Я с большим энтузиазмом и преданностью приступил к реализации этого желания.Намного больше для проживания, творчества, удовольствия. Ведущая праздника должна знать, что нравится и не нравится будущей маме, и убедиться, что она уверена как в выбранной игре, так и в выбранной теме. лягте рядом с ними, положив камеру на пол. Такое ощущение, что твоя мечта осуществилась. Уилтси III, создатель Lypossage, в Мидлтауне, Коннектикут. Если вы собираетесь выйти за дверь, чтобы прогуляться, убедитесь, что ваша собака сидит и ждет, чтобы вы могли пойти первым, прежде чем ему разрешат выйти самостоятельно.Врачи и группа специалистов могут обнаружить рак под электронным микроскопом. Наиболее частая причина подвывиха у младенцев — это растяжение, скручивание и сжатие позвоночника младенца во время родов. Рассмотрите возможность использования превосходных жалюзи из искусственного дерева от Мы все пользуемся услугами высококачественных производителей, таких как Wood, Royal plus Prestige. Домашний компьютер лучше всего разместить в семейном пространстве или офисе дома, а не в гостиной. У нее не было плакатов с изображениями звезд на стене, но она никогда не выбирала их.От традиционного до современного и от белого до деревянного — шкафы с радиаторами сами по себе являются очень привлекательными предметами мебели. Для точки g (и для очень крупных мужчин, или если ей иногда неудобно, когда проникновение слишком глубокое), попробуйте это. Лучшее, что вы можете сделать, — это попробовать различные возможности секса вместо обычного миссионерского места, чтобы избавиться от особой скуки. Свидетельствование всех желаний, мечтаний, целей, проекций и иллюзий своего разума (то, что называется Майей) приносит эту свободу.Мы пришли к этому месту, потому что все мы хотим, каждый по своим причинам, что-то понять о семейных констелляциях, которые характерны для феноменологического подхода Берта Хеллингера к системным решениям. Как вы себя чувствуете, наблюдая за агентом 007, потягивающим мартини с водкой Finlandia, созданием мощного МАШИНЫ и многофункциональным обзором Omega? Вы бы хотели жить в роскоши, как агент 007? Тогда у Арона произойдет нечто гораздо более немыслимое. Вы всегда должны излучать чувство спокойствия, уверенности в себе, мужественности и внутренней энергии.Темно-синий пиджак — он производит впечатление. Повторите 10-15 раз, по 2-3 раза на каждую голень. Более того, многое зависит от процесса изготовления бронзовых мемориальных пушек. Способ размещения блюд происходит естественным путем, при этом вам не нужно слишком много думать о «лучшем месте» для того или иного конкретного объекта. Когда мы сможем легко найти время, чтобы поразмышлять о Нашем боге (или титулах Бога), словах святых, а также зайти внутрь, в то место в глубине сердца, мы обнаружим умиротворение, которое мы ищем и которое будет просто увеличиваться по мере того, как мы медитируем чаще.Все мы начинаем связывать определенные события с определенным поведением. Uphold Flight предлагает изменения в последнее время. Может случиться так, что ваша машина была конфискована, дом лишен права выкупа, ваш близкий друг или сопоставимый или даже человек сам может бороться с болезнью. -Автомобиль и информация о страховании здоровья, регистрация транспортных средств. Туалетная бумага без сердечника Jumbo идеальна для помещений с интенсивным движением, например офисов, столовых или пабов, где очень часто используются туалетные документы, поскольку большие объемы туалетной бумаги помогают сократить выбеги и минимизировать затраты, так как вам приходится заменять туалетную бумагу без сердечника менее регулярно чем стандартные рулоны туалетной бумаги.Если вам не приходится сталкиваться с щеткой, вы можете использовать вместо скраба для лица. При выборе надувных кроватей Simmons инновационным и эргономичным выбором будет надувная кровать Simmons Hi-Loft Express Raised Air Bed. Скачать Transporter 3 Movie можно бесплатно на многих легальных интернет-сайтах. Имейте в виду, что вы можете выбирать, что бы ни отправило вас на танцпол. А затем, когда мы свернули с шоссе 78, я посмотрел в свое окно и увидел величественное существо, идущее по краю ближайшей вспомогательной дороги.Есть много разных объяснений, почему украшения Pandora уникальны, и в этом посте мы обсудим, что они из себя представляют. И недолгий момент, связанный с паникой, понимаете, теперь так что же мне делать с руками, когда я стою здесь и слушаю это удивительное вступление обо мне? Таблетки льняного масла или 1000 магния в день. Это самое первое правило привлечения женщин с твердой анодированной посудой может показаться несколько очевидным, но это действительно необходимо для того, чтобы вы демонстрировали гигиену и очень большую личную чистоту, когда вы собираетесь вместе с азиатскими женщинами.Моя система интернет-маркетинга и рекламы MLM, на которую он или она подписался, автоматизирует контакты с вашими потенциальными клиентами, подписки, автоматически выплачивает человеку авансовый доход и даже автоматизирует дублирование в вашей сети, полностью обучая ваших новых членов команды, что означает использование та же система и предоставление им реестра всего 4 вещей, которые им нужно выполнять ежедневно, чтобы дублировать себя. Вы откроете для себя проверенные привычки и секреты успеха людей, которые, несмотря на трудности, дискриминацию, жестокое обращение, жесткие или угрожающие образу жизни трудности, сформировали свою собственную судьбу, чтобы стать успешными и эффективными лидерами.На самом деле я еще не знал, за кем он собирался следовать, но я мог бы забрать четки, когда она успеет их упасть. Мы работаем с пятновыводителем или швейным пакетом, как только что-то случится. Какой бы из этих вариантов вы ни выбрали, убедитесь, что конкретный стиль плюс функция хорошо сбалансированы. Проверьте наличие ржавчины, особенно на нижней части, шасси на передней стороне, желобах крыши, подоконниках, панелях нижней части, колесных арках. Все, что у вас есть, — это успешный (и вкусный) тест! Я только для одного человека высокого роста 183 см.Великолепный дизайн оборудования в сочетании с изысканной черной отделкой придают шкафу неповторимый вид. Так что, даже если вам нужно вымыть пол только в одной маленькой уборной, с вас могут потребовать сто пятьдесят — 250 долларов за это. Наполните ведро грецкими орехами и шелухой примерно на 50%. * Изменение рабочих часов или возобновляемых графиков работы. Существует рассказ, который говорит, что когда Dr Goh увидел конкретное предложение, ldquo; Этого достаточно, rdquo; он или она спросили обязательно слово ldquo; достаточноrdquo; делать? Смысл рассказа ndash; когда дело доходит до конечного содержания вашего общения ndash; подумайте о своей аудитории и подумайте, какое слово они поймут больше всего.Они могут быть последней тенденцией в стиле одежды консервных банок. Вылечился 10 декабря этого года. Во-первых, выберите тему, которой ваши зрители-участники смогут заниматься в долгосрочной перспективе. Многочисленные проблемы могут повлиять на кровоток как в области полового члена, так и во всем. Боковые шкафы для документов — это действительно более широкая и укороченная версия вертикального шкафа для подачи документов. Мы отдаем себя через нашу любовь, нашу дружбу, заботу и наши усилия. Многие люди задаются вопросом, насколько удобные матрасы, позволяющие спать всю ночь, могут быть вредны для организма.Может быть, вы были на Луне? Нет! Тогда садись на мою ракету, и я возьму туда человека. Процент питьевой воды в вашем организме резко падает по мере того, как вы достигаете старшего возраста. Конкретный мотоцикл превосходен по характеристикам, но он не нуждается в таком привлекательном внешнем виде, как Glamour, особый конкурент Hero Honda. Итак, кому нравятся часы G-Shock? Какие люди делают эту модель такой популярной? Часы G-Shock нравятся просто полицейским и космонавтам, пожарным и фельдшерам.Нормальное перемешивание необходимо для эффективного компостирования по 2 причинам: Психологическая энергия проявляется на физическом уровне в теле. Ежегодное истончение собственного гардероба и передача неиспользованной одежды благотворительной организации также являются долгим способом помочь вашему гардеробу оставаться в порядке. Eral изменил внешний вид нижнего пальто и разработал множество новых дизайнов, которые могут сделать людей стройнее. Чему они вас научили? Фаза 2. Вы можете существовать только в настоящем, в СЕЙЧАС.Стулья загружены, и это был один из первых периодов, когда я разговаривал с более чем 1000 человек. rdquo; Это поместит вашу кровать как можно дальше от двери, но при этом позволит вам видеть дверь с кровати. Целый дисплей, отображаемый в различных стилях черных рамок для картин, — это действительно забавный, изощренный и современный способ выделить ваши фотографии. Таким образом, движение на несколько пунктов в любом направлении может обернуться большой прибылью или огромными убытками — причем очень быстро! 1) Как я могу ожидать, что моя жизнь изменится, когда я выйду замуж? (Думаешь, не пойдет? Ой!).Это действительно помогает растянуть поясницу. Женщина родилась в Сассари, маленьком городке на севере Сардинии, где ей удалось получить высшее образование перед отъездом в Милан. Если вы энтузиаст, то вспомните тетю Итт. Твердость, связанная с зеркалом из сапфирового стекла, уступает только алмазу, в семь раз больше, чем у металла, но это не значит, что их нельзя поцарапать, это должно быть непросто, хотя и не никогда. 5-дюймовые ролики. В основном такие платья для женщин больших размеров в форме груши помогают вывести зрение вдали от проблемных зон.Детские зоны могут не быть основным элементом дома, но они требуют особого внимания со стороны мамы и папы. Затем тихий внутренний стон через ролевую игру! Вы будете выглядеть короче, чем есть на самом деле, если будете держать вас сгорбленным и опущенным. Что на самом деле дает чудо-пояс для тела, чем некоторые другие пояса. Эффективным будет изменение концентрации парниковых газов в атмосфере. Практически всегда в нем не используется фон, а ключевой компонент музыки, который влияет на то, как вы слышите, действительно чувствуете, видите и переживаете праздник.Такие уникальные условия сидения сегодня считаются намного лучше, чем обычные стулья. Быть благодарным; искусство благодарного исследования позволяет вам сосредоточиться на хороших вещах вокруг вас, а не на плохих вещах; сконцентрируйтесь на солнце, или возможности поиграть с ребенком, или выпить кофе с девушкой, или, может быть, на том факте, что у вас есть работа.

Вы найдете Cheap Bony Levy Pav? Ожерелье с подвеской Diamond Sideways Infinity Symbol (эксклюзив Nordstrom). Магазин по отзывам о продаже.Получите самые лучшие цены на этот товар. Получите в сети, приобретите быстро и сократите. решите представить, очень рад, чтобы не тратить зря. Приобрести срочно. Независимо от того, что вы должны знать об этом, скидка на товары. Примите участие в наших покупках, чтобы получить специальные скидки на выбор товара. Получите лучшую сделку по выгодной сделке в этом магазине в сети прямо сейчас. Очень выгодные предложения по выгодной цене. На этот магазин товаров можно не тратить зря.Лучший товар, спасающий от разумной стоимости. Удивительные специальные предложения по магазинам.

Покупки в Интернете стали наиболее выгодным способом вовлечения вещей. В результате перестаньте стоить человеку усилий, и вы, вероятно, избежите множества неприятностей. Вы получите полную свободу делать все, что пожелаете, без снобистского помощника, который был бы вам на руку. По этой причине Интернет дает вам возможность сравнить с уверенностью, чтобы купить именно то, что вы хотели бы, по самой низкой цене с невероятно хорошей сохранностью, связанной с Offer Bony Levy Pav? Ожерелье с подвеской в ​​виде символа бесконечности, сбоку и бриллиантом (эксклюзивно для Nordstrom) Купить .Имея достоверные мысли и оценивая просто покупателями, получите быструю сверхэкономичную доставку! через всех нас. Мы гарантируем, что у вас будут отличные предложения по продуктам и экстраординарные. Если вы ищете этот дешевый продукт. Вы можете найти его в магазине здесь. Мы надеемся, что вы очень довольны тем, что узнали о продукте.

Недавние посетители

Алабама, Аляска, Аризона, Арканзас, Калифорния, Колорадо, Коннектикут, Делавэр, Округ Колумбия, Флорида, Джорджия, Гавайи, Айдахо, Иллинойс, Индиана, Айова, Канзас, Кентукки, Луизиана, Мэн, Мэриленд, Массачусетс, Мичиган, Миннесота, Миссисипи, Миссури, Монтана, Небраска, Невада, Нью-Гэмпшир, Нью-Джерси, Нью-Мексико, Нью-Йорк, Северная Каролина, Северная Дакота, Огайо, Оклахома, Орегон, Пенсильвания, Род-Айленд, Южная Каролина, Южная Дакота , Теннесси, Техас, Юта, Вермонт, Вирджиния, Вашингтон, Западная Вирджиния, Висконсин, Вайоминг

(Иер 6:16).Есть доля секунды, чтобы сделать этот выбор, когда соблазн надуть. Также очень важно, чтобы он был устойчивым и не двигался и не раскачивался при каждом небольшом движении. в) перец. путешествие. Один из изысканных, но заметных вариантов — это итальянские дизайны с текстурированными висячими серьгами из бамбука Stefano 14K. Когда вам будет за 30, вы начнете замечать небольшие морщинки на коже. Тот, кто первым найдет кольцо, всегда будет иметь преимущество в браке! Диарея или даже синдром раздраженного кишечника.В конце девятнадцатого века викторианские дамы обращались с просьбами о каретах, отражающих их процветание, настаивая на улучшенном внешнем виде и привлекательных аксессуарах для экипажей. Потратьте пару минут на изучение каждого из них. Он покрывает большинство участков вашего тела, которые обычно подвергаются солнечным истязаниям. Все они должны быть в том, что мы называем «операционным форматом». Каждый, независимо от того, старше он или моложе, хочет иметь собственное красивое пространство, где он может проводить большую часть своего периода для релаксации и отдыха.Камера выдержки для испытания солевой струей используется, в частности, для проверки устойчивости образцов с покрытием и металлических компонентов к коррозии. В конце концов, без слов замечательного писателя мы, скорее всего, получим трогательные и вдохновляющие истории из «Уродливой сладости», «Новая одежда императора» или «Русалочка» (оригинальная версия, конечно). ЭМП могут быть необходимы только для коротких периодов воздействия, в то время как эффекты длятся в течение многих часов, вызывая в движении изменения клеток и всего тела, чтобы вернуть и поддержать баланс, а также здоровье.Разместите мебель для семейной комнаты так, чтобы гости смотрели, возможно, на юг или восток, когда сидите, и готовьтесь. Среди достоинств этого платья — то, что оно невероятно тепло холодным вечером или днем, а также чудесно прохладно, если я оказываюсь в душной церкви или даже в зале, где перестает работать кондиционер, небеса нам в помощь! Затем осторожно откройте его, приложив немного усилий к роще. Будьте честны, высказывая свое мнение об игре, и отметьте, какие трудности вам понадобились во время игры.Сама по себе коробка с розарием, очевидно, была подарком ручной работы от Кита Риджуэя, соседа в Бейпорте Миннесота, который подарил ее нам на Келлирско; ч смерть в 1987 году. значение, значение плюс цель ложь, затем раскрывается. И это должна быть дизайнерская сумочка. Сумки от Prada предназначены для того, чтобы выделить человека из группы, придать гламур и блеск владельцу Prada, а не проводить кампании в магазинах или даже на рынке. Сегодня, через мою собственную практику, а также через Божественные текстовые сообщения, которые я все еще получаю, Ирско; Мы пришли к некоторым представлениям о Нашем боге, Вселенной, энергии и о том, как психическое развитие и духовное пробуждение взаимосвязаны.Хорошее здоровье — величайший ресурс. Это занимает много времени, но является неотъемлемой частью любого лечения от вшей. Стеклянная ручка очень привлекательна, так как ее шейка хорошо видна. Люди, чьи височные доли не работают должным образом, могут рассматриваться просто другими людьми из-за их эмоциональной нестабильности, угрюмости, смущения и раздражительности. Конкретная ткань, используемая в Куртисе, в основном зависит от времени года. По мере того, как его выздоровление развивается, он может спонсировать других, поскольку его продолжают спонсировать. Начните с одного: вы не должны ограничивать просмотр страниц и покупок одним или, возможно, двумя или тремя соседними рынками.Разработки жемчужных украшений. колеса вездеходного велосипеда и насос для автомобильных шин, чтобы поддерживать их по завышенной цене, множество сумок для хранения, многопозиционное кресло с мягкой подкладкой и легкая система складывания курка. На выбор предлагаются модели с электроприводом и батарейным питанием из металла, мрамора, никеля, нержавеющей стали или аналогичных металлических материалов. Сейчас людей больше, чем когда-либо, беспокоит сила, которую мы используем в этом сообществе. Мебель для дома для ванной отлично подходит для создания аккуратной, беспорядочной ванной комнаты и даст вам место для покупки всего необходимого для туалета и любых запасных полотенец.Вы будете смотреть на свое открытое запястье, и вам захочется получить его. Почему бы и нет? Что, если я сомневаюсь в вашем решении, что это может значить для меня? Ощущение, которое я испытываю, подсказывает мне, что принятие информации от моего инстинкта означает, что я принимаю модификацию, а это означает хеллип; Я признаю, что ошибаюсь! Ага! Я donrsquo; t, например, исправлено, потому что для меня если означает, что я ошибаюсь. Они с радостью попробуют что-то для вас, если вы подойдете к ним в правильном духе, поэтому, когда это сработает, это приведет к фотографиям, которые будут игривыми и одухотворенными.Есть также шкафы для хранения вещей, которые можно разместить над ванной. Давайте проверим ассортимент, который копает — людей, которые упорно роются в конце вашего безопасного ограждения, чтобы попасть внутрь. То, что мы, как любители кошек, должны понимать, что не все разделяют наш энтузиазм. Это особенно важно, если у вашей собаки длинные волосы. Есть два разных типа струн для браслетов; один из них называется The Stiff и имеет овальную или круглую форму, а также тот, который может быть с удерживанием или без него.Свадебные церемонии и приемы в иудаизме богаты культурой и традициями, которые ознаменуют новое совместное путешествие молодой пары. Не каждой семье было дано право заниматься оружием, чтобы создать для себя герб. Успешное функционирование на физическом уровне кажется естественным. Это поддерживает баланс, в то время как мы больше работаем над повседневной функциональностью. Обычно они могут познакомить вас со многими людьми в этом районе, которые могут помочь распространить информацию о человеке.Встаньте примерно в футе от него и сфокусируйтесь на изображении, пока оно (возможно, быстро) перемещается. Все дело в том, чтобы знать лучшие приемы для создания великолепного плаката. Мальчик-сирота, который столкнулся с трудностями и в чьей опеке 3 раза трансформировал руки с рождения до взрослого возраста, Мухаммед превратился в бесспорного новатора во всех смыслах. Я уверен, что то же самое и со многими матерями, оказавшимися в бедственном положении. Запланируйте сотрудничество с местными общественными организациями или отделениями выпускников в новом месте.КОМПОЗИЦИЯ:. Они погружаются в суматоху жизни, руководствуясь знаменитым организаторским кредо: если не уверены, выбросьте это. Если вы взвесите карту на счете, общая сумма навсегда останется на вашем счете. rdquo; Стадия ключицы, ldquo; Изменение моего решения означает, что со мной что-то не так. Среди всех способов общения самый новый способ общения в наши дни — это киносеминары. Такие простыни для детских кроваток могут быть как для мальчиков, так и для юных леди или детей-унисекс.В противном случае вы можете настроить себя на провал. Сегодня хорошее настроение как токсины, и люди продолжают блевать, чистить и колоть, только сейчас мы называем это очищением. На самом деле мы замечаем отсутствие всего цвета, и как таковое будет ассоциироваться с тайной и прочим, что скрыто. По этой причине не следует носить одежду, которая заставляет вас выглядеть больным и уставшим, а лучше выбирать цвета, которые все еще льстят и подчеркивают ваш образ. Последнее, что вы хотите сделать, — это обычно вкладывать деньги в покупку программ, например, осознавая, что ваш компьютер не может их запускать, это может сэкономить вам головную боль и время, проверив это.В нее легко играть, она доставляет огромное удовольствие и вызывает сильное привыкание. Колеса: основная часть рулевого колеса, край удерживает конкретную шину с камерой и соединяется со спицами. Вы всегда находитесь точно в середине. Когда-нибудь делать? Модель Rado V10K сделана из «твердого алмаза». Поэкспериментируйте и найдите видеоигры, которые больше всего волнуют ваших детей. Это единственное препятствие между вами и камнями, которые швыряют на дороге. Нет другого экзотического места, где человек хотел бы пойти за покупками.Поддержание хорошей осанки и хорошая форма могут изменить умы. и так далее, считая почти все это большим развлечением. Приседания ndash; Начните с расставления ступней на ширине плеч. Люди могут критиковать ваши действия или даже убеждения, однако вам не нужно терпеть нападения на то, кем вы являетесь как личность. Помните, если вам было шесть лет, и вы также были так готовы подарить маме свою личную открытку на день рождения, сделанную вручную. С учетом того, что кресло-качалка появилось около 1700-х годов, оно продолжает помогать тысячам людей лучше спать за счет расслабления, облегчения боли в пояснице у пожилых людей и беременных женщин и успокаивает плачущих и хрипящих младенцев.Бирюза является обычным камнем, и из-за этого замечательного элемента необходимо осторожно чистить ювелирные изделия из драгоценных металлов с бирюзой и серебром. Этого никогда не должно происходить. Оставляя антифриз там, где его могут достать собаки. Метод всего проекта: метод полной задачи — это именно то, о чем говорит его название. Целиакия. Одно из эффективных домашних средств от ушных клещей — смесь миндального масла и витаминного масла. Она могла потратить девушке последние деньги на все эти новые туфли и сапоги, чтобы дама могла хорошо выглядеть для вас, поэтому не скупитесь, но если женщина хочет что-то купить, позвольте ей.И здесь будет первая синхронность, когда время стало зависать между двумя мирами. Новые сандалии были обычной обувью как для мужчин, так и для женщин. Самая первая часть упражнения — это техника релаксации, используемая учениками многих традиций, вторая часть советует вам настроиться на ваше внутреннее Я, а последняя часть содержит зародыши мысли относительно уравновешивания пар противоположностей. Но будет ли такая книга, как Whorsquo; s Боишься большого плохого босса? помочь вам? Неужели; Может быть, вам будет проще анонимно подсунуть девушке копию Super Skills, предназначенную для супервайзеров? Повреждение документа операционной системы.

No related posts.