Цены снижены! Бесплатная доставка контурной маркировки по всей России

Островочек: островочек — это… Что такое островочек?

Содержание

Мои осенние цветы как островочек красоты!

Мои осенние цветы —  островочек красоты!
или

Моя цветущая планета! 
Нынче я посадила немало цветов, но немногие выжили из-за засушливого лета. Но тем не менее, то, что взошло и выросло — радует глаза и душу!

Конечно же, милые георгины!
Даже пчёлка пожелала попасть в кадр! 
( Кстати, это пчёлка или шмель? )

Расплескались радугой краски,
Сколько нежности, прелести в них!
Георгины, будто из сказки,
Так и просятся, милые, в стих.
Чудо-цветики рвать я не стану…

Я грущу о тебе,уходящее лето.

Забираешь с собой ароматы цветов
«Георгин остается» — тихо шепчет об этом
Ветер летний из сказочно-призрачных снов…

А крылатый друг тут как тут — хочет быть во всех кадрах.
Он приглядел космеи! Какие же они нежные, эти простые на вид цветы, космеи! Я их очень люблю. Их невозможно не любить. Они — будто звезды, упавшие с неба. Вообще-то, я где-то читала,
что космеи — это космические цветы! 

Космея… Хрупкая мечта небес осенних, 

Весной укутанная в тонкую парчу 
Волшебных грёз… Столь невесомых! Драгоценных! 
С таким искрЕньем красоты нежнейших чувств!..

А это — красавицы цинии! 
В неё , в цинию, невозможно не влюбиться с первого взгляда.
Без них — мой огород или сад — не огород и не сад.
Они — обязательные жители моей территории.

Цинния-красавица утром просыпается,
В бархатное красное платье наряжается.
Пышная корзиночка на ветру качается… 

Расцветать под солнышком славно получается…

А тут к цинниям в гости со мной приземлилась другая красавица крылатая. Бабочка! А порхала она долго, с цветочка на цветочек, будто просила обязательно поместить её в кадр 🙂
Заметили?

Мне милым циниям оду посвятить надо,
Ведь их красота для взора — отрада!
Сверкают перья, словно у жар-птицы.

Ну, нельзя цветком ни восхититься!..

Ну а белая циния — как невеста среди всех других подруг своих. 
Восхитительные цветы! А как любят их шмели и бабочки!
Нам же они дарят хорошее настроение,
разве можно пройти мимо такой красоты без улыбки!  

На будущий год вся картинка сложилась:
цветник засверкает азартным огнем!
Я вижу, как ЦИНИЯ там разместилась
и буйно и радостно царствует в нем!

На Украине циннию называют майоры, майорить — означает радовать яркими, живыми красками, так будем же и мы, как Майоры майорить и радоваться и радовать близких и чужих, ибо нет чужих, все мы близкие и родные и на Земле и на волшебных Звездах.

Далее в кадр попали … огуречные цветочки!
Середина сентября — и грядка огурцов всё ещё цветёт на открытом грунте и дарит свежие огурчики! 
Огурцы осенью с грядки — это нечто!

Огурец, он — молодец, Витаминный удалец!
Летом он на грядке зреет, А зимой – в оранжерее!

Вот таков он, мой осенний островочек красоты. 

Напоследок, я дарю своим читателям очень милый и красивый клип.
Двухминутное наслаждение музыкой и очаровательными цветами осени. Спасибо нужно сказать YouTube 🙂

 

Источник:
Стихи о георгинах http://chto-takoe-lyubov.net/stixi-o-georginax/
Немного отдыха среди цветов https://www.liveinternet.ru/users/galzi/post391433764/
Изображения взяты из личного архива.
Видеоролик взят с    https://youtu.be/AXC4ZDknrqA
Условия использования материалов –https://www.youtube.com/static?gl=RU&template=terms  
 

Космеи, мои милые цветы — мой островочек красоты — 22 Октября 2019

Отцвели цинии. Отцвели сальвии. Отцвели ромашечки. Всё отцвело. Всё стало серо в огороде. Единственные цветы, которые улыбнулись мне, были космеи. Единственное украшение на грядках, где давно уже пустым пусто. Милые мои космеи, они встретили меня! Будто радостно улыбался каждый цветочек, на ветру слегка покачиваясь и дрожа от осеннего холодка… Нет боле тепла. Нет солнышка. День хмур, влажен и холоден. Моросил мелкий дождь. Несмотря на непогоду, я долго ходила вокруг кустов космей, долго любовалась. Мне очень хотелось, чтоб они ещё пожили. А ветер будто торопит, как бы предупреждая, что вот-вот он сорвет все лепесточки с цветочков и скоро сад потускнеет. Если приглядеться, уж больно они хрупкие стали, мои космеи, в эти осенние деньки. Но зато!..Зато полно черненьких бутончиков, которые, несмотря на первые холода и нетеплые дожди, всё раскрываются и раскрываются! Невероятно, но это так! Даже если они долго не продерживаются в своем цветении, они успевают подарить хорошее настроение моей маме каждый день и каждый раз, когда она делает обход вокруг огорода и сада.   Вот ведь повелось! Решила я уехать обратно с космеями — не удержалась, сорвала букет и уехала с ними домой, в город. И опять меня охватило такое настроение, что я решила с внучкой снова окунуться в своё хобби — создать … натюрморты! То ли это натюрморты, то ли просто фотографии а ля натюрморты, но нам такое занятие очень уж нравится. Урок создания красоты. Разве не красота получается в результате? Всё по порядку это выглядит так:

Как всегда, мои космеи  вырастают выше меня. Они такие ещё пушистые, махровые, с очень густой зеленью на веточках. Выглядят очень красиво. Недаром в народе их называют красотками, а в переводе с греческого вовсе означают украшение. Украшение любого сада, которое цветет до снегов.

У меня они растут кустами. Сейчас октябрь и на них ещё полным ходом рассеяны черные головки, которые изо дня в день превращаются в цветы. В цветочки такие легкие, порхающие на ветру, как бабочки. Никто и не поспорит, они осенью особенно очень нежно выглядят .

Как заметили читатели, фон для натюрморта выбран тот же, как и со случаем с хризантемами в предыдущем блоге. Видимо для меня это уже классический стиль 🙂

В этот этюд я добавила веточки осеннего хмеля. Мне очень нравится это растение. Напоминает виноградную лозу. Обожаю хмель. Кстати, он для нашего региона — флористический символ республики.

Думаю, что шиповник придает картине особый колорит. Его «нерасчесанные» усики так естественны, что выглядят своеобразно интересно без особого «ухода», то есть в природном виде, без обработки. А черный лебедь-сахарница — мой любимый кухонный атрибут 🙂

Тут я космеи расположила вместе с веточками укропа. Уж космея и укроп очень похожи стебелечками . Будто они из одной семьи. Даже у меня на грядке никогда не расстаются — всегда вместе растут и вырастают.

Пушистые космеи «решили» побыть вместе в одном букете с мелкими колючками. Интересно смотрятся, но увы — не друзья. На фотографии колючки, вижу, не столь фотогеничны, как в реальности. В реальности, они намного привлекательнее. 

Без ромашек была бы жизнь скучна. Вот и решила я их примерить в друзья к космеям. А смотрятся они вместе довольно дружно и симпатично, дополняя друг друга своими нежностями. 

Спасибо за просмотр, уважаемый читатель.

Интересно было бы узнать Ваше мнение по теме. Спасибо!





Николай Лудков — Всем выбор надо принимать. Лирика жизни читать онлайн бесплатно

Всем выбор надо принимать

Лирика жизни

Николай Анатольевич Лудков

© Николай Анатольевич Лудков, 2017

ISBN 978-5-4483-4994-2

Создано в интеллектуальной издательской системе Ridero

Отважных каравелл потёртые бока

Запутавшись в долгах и в бурях невезенья,
Не трусь и не ропщи, не отступай пока
Маячат вдалеке Колумбовым свершеньем
Отважных каравелл потёртые бока.

Навалится когда весь океан напастей,

Чтоб разорвать тот круг, взгляни на облака:
В их пелене мелькнут надеждою на счастье
Отважных каравелл потёртые бока.

В крутые времена и в лихолетья годы
Знакомым фонарём мигнут наверняка
Предвестники любви, удачи и свободы
Отважных каравелл потёртые бока.

В благополучный час и в торжества минуты
Сквозь глубину веков погладь издалека
Их мачты, паруса, узлов канатных путы,
Отважных каравелл потёртые бока.

Островочек надёжности

Синие горы дождём занавешены,
Капелек рябь поглощает река,
Странные чувства в сознании смешаны:
Сверху вода, да и снизу вода!

И на границе двух вод разной плотности,
В точке, где сходятся дождь и река,
Есть пароход – островочек надёжности,
Сухости, света, жилья и тепла.

В час, когда счастье ушло по оплошности,
Пасмурно в сердце и холод в спине,
Вспомни, что есть островочек надёжности
Где-то внутри у тебя, в глубине.

На островке том тепло и ухожено,
Сухо, светло и не давит в груди,
И хотя небо дождями обложено,
Солнечный лучик в себе ты найди.

И разорвёт он туман этот слякотный,
Ласковый штиль вслед за бурей придёт,
Станет опять и уютно и радостно,
Вновь попадёшь ты на тот пароход!

Утро вечера мудреней

Если кажется все печали
Навалились на нас, поверь
Перемелется всё с годами:
Утро вечера мудреней!

Что казалось проблемой жуткой
Еще, даже позавчера —
Нынче кажется просто шуткой,
Что сыграла с тобой судьба.

Если ты в этот час не сдрейфил,
Сумел стойко перенести
Испытания для проверки
Своей воли, сил и души —

Значит, ты у судьбы достоин
Доли лучшей, совсем иной,
Если выстоял – значит воин,
Не хиляк, не слабак – герой!

Потому не горюй в невзгоде,
Улыбнись и не хмурь бровей —
Ведь не зря говорят в народе:
Утро вечера мудреней!

Воспари над темнотой

Если кажется,
Мир сужается
И качается
Под тобой,
Опустилась тьма
В середине дня,
И всё рушится
За спиной.

Знай, что скоро ночь
Переменит цвет,
И пробьётся свет
В липкой мгле.
В глубине души
Лучик тот найди —
Жизнь не кончилась
На земле.

Воспарить сумей
Над туманами,
Ураганами,
Суетой,
Беспросветностью,
Неизбежностью,
Безысходности
Темнотой.

И откроется
Небо синее,
Горы в инее
И заря,
Солнце красное,
Даль прекрасная,
Бесконечности
Глубина.

И отступят прочь
Страхи колкие,
Камни скользкие,
Ветра вой,
Пропасть чёрная,
Топь бездонная
Безнадёжности
Роковой.

Поверни на восход

На закатном песке
Заалели следы
В непонятной тоске
Словно символ беды.
Заалели следы —
Просигналил закат:
Всего шаг до беды —
Возвращайся назад.

Возвращайся назад,
Возвращайся живой,
За кровавый закат
Шаг не делай другой…
На кровавом песке
Заалели следы:
В предзакатной тоске
Всего шаг до беды.

Поверни на восход
От закатной беды —
Темнота пропадёт,
Будет свет впереди.
Засыпает следы
Заалевший песок.
Уходи от беды —
Поверни на восток.

Встречай все трудности достойно

Не трусь, не плачь, а просто помни:
Все блага в жизни – не за так,
И достигает цели – воин,
Не трус, не нытик, не слабак.

Встречай все трудности достойно,
Не отворачивай лица,
Возможно, будет очень больно —
Но закаляются сердца.

Преодолев одну преграду,
Другие – больше не страшат.
Уверенность придёт в награду,
А это – не какой-то блат,

Не закулисное шуршанье,
А характерная черта
Людей, не знавших подаянья,
И независимых всегда.

Тех, что судьбу свершают сами,
В невзгодах волю закалив.
Их неудачи не сломали.
Мир опирается – на них!

Держитесь, улыбаясь, господа

Когда судьба, вас ухватив за холку,
Поддав копытом, вскинет на рога,
Сквозь стиснутые зубы втихомолку
Вы все же улыбнитесь, господа.

Пускай улыбка будет кривоватой
И более похожей на оскал,
Но это знак Всевышнему, ребята,
Который вас на прочность испытал.

Несчастным быть легко и очевидно:
Как просто слечь, напиться и стонать.
Чтоб избежать сей доли незавидной,
Насилу улыбнитесь вы опять.

Если обманет друг, предаст коллега,
Даст сбой здоровье, нелады с семьей:
Не горе то – досадная помеха.
Всё образуется – не летом, так зимой.

И как бы вас по жизни не скрутило,
Чтоб наступили лучшие года,
Один секрет вам даст желанной силы:
Держитесь, улыбаясь, господа!

В час, когда скребут на сердце кошки
И душе тяжело в груди —
Вдруг появится свет в окошке,
Стоит только тебе прийти.

Ты придешь – и тоски нет прежней,
Мгла растает, печаль уйдет,
И в душе незабудкой нежной
Что-то светлое расцветет.

И уже ничего не гложет:
Боль, печали – всё позади.
Сразу всё измениться может —
Стоит только тебе прийти.

Поддержка друга

Как здорово почувствовать внутри
Поддержку от товарища и друга,
Когда гора напастей на пути
И закрывает свет тревоги вьюга.

И пусть не говорится вовсе слов,
В тяжёлый час, когда ничто не лечит,
Ты твёрдо знаешь: друг всегда готов
Помочь, поднять, свои подставить плечи.

Как чувство это силы придаёт,
Незримая опора душу греет.
И никакой уже не страшен чёрт —
Он нас двоих уже не одолеет!

Когда на сердце туча и что-то жмёт в груди —
Сложи дровишки в кучу, костёрчик разведи!

Когда дымок пахучий почувствует ноздря,
И с огоньком весёлым начнут трещать дрова,
Ты посмотри на угли горящего костра —
Исчезнут все невзгоды в тех сполохах огня!

То розовым, то красным, то жёлтым подмигнёт
Покрытый нежным пеплом волшебный огонёк,
То синий, то зелёный, то бледно голубой
Появится цветочек на угольке живом!

И каждый лепесточек колышется, живёт,
И цвет свой изменяет, и в высоту растёт:
То выше он, то ниже, то ярче, то слабей —
Глядишь на них, и на сердце становится светлей!

И разгоняет тучу тот огонёк костра,
Уходит тяжесть с сердца, и не болит душа!
Всего то и делов то, чтоб в норму вновь войти:
Сложи дровишки в кучу – костёрчик разведи!

Простой секрет

Читать дальше

Читать онлайн «Спешите жить сейчас» — автор Николай Лудков

К читателям

Я не профессиональный литератор, не поэт и не философ, а инженер, несколько десятков лет занимавшийся испытаниями в научно-техническом центре крупного завода. Эта работа привила мне навыки объективной оценки сложных ситуаций для выявления и устранения причин различных сбоев и неисправностей.

Поэтому, когда передо мной совершенно неожиданно встал знаменитый Гамлетовский вопрос, и у меня вдруг появилось время для размышлений о жизни (раньше его просто не было), стало ясно, что утилитарные житейские ценности, на достижение которых мы тратим столько времени и сил, а фактически нашу жизнь, — не совсем тот приоритет.

Это прозрение породило желание успеть обобщить накопленный опыт, свои наблюдения и размышления и поделиться этими, казалось бы банальными истинами, с другими людьми, но не в виде трудно усваиваемых философских трактатов, а в легкой, красивой, доступной и понятной каждому человеку стихотворной форме.

А, как известно, любая творческая работа увлекает и захватывает. Философия трансформировалась затем в романтику и лирику, в юмористические зарисовки, картинки природы, сказки, байки, гражданскую тематику и прочее. Действительно: нет худа без добра.

В итоге десятилетней работы, на базе нескольких предшествующих книжек и совершенно новых стихов, и появился этот сборник, а каким он получился — судить только Вам. Очень надеюсь, что не разочарую.

Николай Лудков

Островочек надёжности

С добрым утром

Заалело утро нежной дымкой,

Отблеск перламутра в облаках,

И небес чарующая синька

В лепестки упала василька.

Птичья радость трелями разлилась,

Засверкали росами поля.

Ночь прошла, природа пробудилась:

С добрым утром добрая земля!

Зачерпну ладонями рассвет

Зачерпну ладонями зарю

И умоюсь свежестью лучистой.

Полотенце трав возьму душистых —

Синь небес в него я заверну.

И вдохну пьянящий аромат

Ожиданий сказочных, манящих,

Щебет птиц, и ветерок бодрящий,

И рассвет — и больше нет преград!

Никаких уже сомнений нет,

Нет тревог и нет ночных терзаний.

В новый день войдя без колебаний —

Зачерпну ладонями рассвет.

Здравствуйте

Здравствуй солнце золотое,

Здравствуй небо голубое,

Здравствуй лес, луга, поля,

Здравствуй, щедрая земля!

Здравствуйте, конечно, люди —

Пусть здоровья вам прибудет!

Здравствуйте на свете все —

Просто так вот: здрав — ствуй — те!

Как хорошо, что встречи есть разлукам вопреки

Приятно снова повстречать друзей родные лица,

Улыбку ровно в пол лица, пожатие руки.

И что-то светлое в душе поднимется зарницей —

Как хорошо, что встречи есть разлукам вопреки.

Один лишь взгляд в глаза друзей поднимет настроенье,

В них смех, и радость, озорства шальные огоньки,

И испарятся без следа тревоги и сомненья —

Как хорошо, что встречи есть разлукам вопреки.

С друзьями просто и легко, и всё опять как надо:

И неба звёздный хоровод, костёрчик у реки,

И соловьёв ночная трель, и прежняя отрада —

Как хорошо, что встречи есть разлукам вопреки.

Как всё же здорово, друзья, нам снова пообщаться,

И даже просто помолчать с улыбкой, без тоски:

Когда ещё придётся нам и суждено ль обняться —

Как хорошо, что встречи есть разлукам вопреки.

Года быстрее всё летят, кого-то нет уж с нами,

Но в сердце память сохранит знакомые черты,

И хоть мы заняты всегда различными делами —

Как хорошо, что встречи есть разлукам вопреки.

Осенний настрой

Слякоть и грязь, облетели кусты,

Стайками молча сидят воробьи.

Мокрые листья прибило к земле,

Пасмурно, хмуро в любой стороне.

Низкое небо и морось-туман,

Сумрачный свет предвещает обман.

Ветер скелетами веток трясёт,

Снег вперемежку с дождями идёт.

Солнце неделями скрыто во мгле,

И неуютно в промокшем дворе,

Люди уже не сидят на скамейках,

Нет ребятишек на голых аллейках,

Мяч не гоняют, не роют песок,

Их не звенит во дворе голосок.

Ранние сумерки гонят людей

У телевизоров греться скорей.

Лес уж не манит к себе грибников,

По берегам не видать рыбаков.

И физкультурники бросили бег —

Лыжи готовят и ждут первый снег.

Но, если даже в такую погоду

Всё-таки выбраться нам на природу

Тёплой компашкой приятных людей,

Молодость вспомнить, увидеть друзей,

Накоротке у костра пообщаться,

Повеселиться и посмеяться,

Выпить немного и закусить,

Побалагурить и почудить,

То, что удивительно и несомненно —

Тут же в природе пройдёт измененье:

Слякоть исчезнет и мгла пропадёт,

Станет яснее и солнце мелькнёт,

Краски унылые сочными станут —

Сосны и осенью ведь не завянут,

Запах появится и аромат,

И необычно прекрасный закат,

Звёзды покажутся в небе ночном —

Не обязательно быть колдуном!

Надо лишь только в ненастную пору

Чаще друзей приглашать к разговору,

Чаще общаться в приятном кругу —

Солнце прорвётся тогда через мглу!

Затяжные дожди

Затяжные дожди, обложные дожди,

Нескончаемый дождь, непогода.

Затяжные дожди: их гони, не гони —

Есть особое время у года.

Затяжные дожди могут быть и весной,

Затяжные дожди — в разгар лета.

Затяжные дожди всё смывают порой:

Радость, грусть, и любовь, и рассветы.

Затяжные дожди — потемневшая даль,

Сырость, лужи, свинцовое небо.

Обложные дожди, затяжная печаль,

Уносящая прошлое в небыль.

Затяжные дожди — дождь опять и опять,

Беспросветность, размытые формы.

Затяжные дожди — надо их переждать:

Исключение это — не норма.

Пережди

Завывает метель сиплым волком,

Из сугробов возводит мосты.

Ни дорогой теперь, ни просёлком

Не проехать уже, не пройти.

Пеленою слепящего снега

Застилает пространство окрест

И колючим зарядом с разбега

Угощает гостей этих мест.

С непогодой бессмысленно спорить,

Разве в случае крайней нужды.

Лучший путь — уклониться от ссоры:

Коль начался буран — пережди.

Отважных каравелл потёртые бока

Запутавшись в долгах и в бурях невезенья,

Не трусь и не ропщи, не отступай пока

Маячат вдалеке Колумбовым свершеньем

Отважных каравелл потёртые бока

Навалится когда весь океан напастей,

Чтоб разорвать тот круг, взгляни на облака:

В их пелене мелькнут надеждою на счастье

Отважных каравелл потёртые бока.

В крутые времена и в лихолетья годы

Знакомым фонарём мигнут наверняка

Предвестники любви, удачи и свободы

Отважных каравелл потёртые бока.

В благополучный час и в торжества минуты

Сквозь глубину веков погладь издалека

Их мачты, паруса, узлов канатных путы,

Отважных каравелл потёртые бока.

Островочек надёжности

Синие горы дождём занавешены,

Капелек рябь поглощает река,

Странные чувства в сознании смешаны:

Сверху вода, да и снизу вода!

И на границе двух вод разной плотности,

В точке, где сходятся дождь и река,

Есть пароход — островочек надёжности,

Сухости, света, жилья и тепла.

В час, когда счастье ушло по оплошности,

Пасмурно в сердце и холод в спине,

Вспомни, что есть островочек надёжности

Где-то внутри у тебя, в глубине.

На островке том тепло и ухожено,

Сухо, светло и не давит в груди,

И хотя небо дождями обложено,

Солнечный лучик в себе ты найди.

И разорвёт он туман этот слякотный,

Ласковый штиль вслед за бурей придёт,

Станет опять и уютно и радостно,

Вновь попадёшь ты на тот пароход!

Утро вечера мудреней

Если кажется все печали

Навалились на нас, поверь:

Перемелется всё с годами —

Утро вечера мудреней!

Что казалось проблемой жуткой

Еще, даже позавчера —

Нынче кажется просто шуткой,

Что сыграла с тобой судьба.

Если ты в этот час не сдрейфил,

Сумел стойко перенести

Испытания для проверки

Своей воли, сил и души —

Значит, ты у судьбы достоин

Доли лучшей, совсем иной,

Если выстоял — значит воин,

Не хиляк, не слабак — герой!

Потому не горюй в невзгоде,

Улыбнись и не хмурь бровей —

Ведь не зря говорят в народе:

Утро вечера мудреней!

Воспари над темнотой

Если кажется,

Мир сужается

И качается

Под тобой,

Опустилась тьма

В середине дня,

И всё рушится

За спиной.

Знай, что скоро ночь

Переменит цвет,

И пробьётся свет

В липкой мгле.

В глубине души

Лучик тот найди —

Жизнь не кончилась

На земле.

Воспарить сумей

Над туманами,

Ураганами,

Суетой,

Беспросветностью,

Неизбежностью,

Безысходности

Темнотой.

И откроется

Небо синее,

Горы в инее

И заря,

Солнце красное,

Даль прекрасная,

Бесконечности

Глубина.

И отступят прочь

Страхи колкие,

Камни скользкие,

Ветра вой,

Пропасть чёрная,

Топь бездонная

Безнадёжности

Роковой.

Встречай все трудности достойно

Не трусь, не плачь, а просто помни:

Все блага в жизни — не за так,

И достигает цели — воин,

Не трус, не нытик, не слабак.

Встречай все трудности достойно,

Не отворачивай лица,

Возможно, будет очень больно —

Но закаляются сердца.

Преодолев одну преграду,

Другие — больше не страшат.

Уверенность придёт в награду,

А это — не какой-то блат,

Не закулисное шуршанье,

А характерная черта

Людей, не знавших подаянья,

И независимых всегда.

Тех, что судьбу свершают сами,

В невзгодах волю закалив.

Их неудачи не сломали.

Мир опирается — на них!

Держитесь, улыбаясь, господа

Когда судьба, вас ухватив за холку,

Поддав копытом, вскинет на рога,

Сквозь стиснутые зубы втихомолку

Вы все же улыбнитесь, господа.

Пускай улыбка будет кривоватой

И более похожей на оскал,

Но это знак Всевышнему, ребята,

Который вас на прочность испытал.

Несчастным быть легко и очевидно:

Как просто слечь, напиться и стонать.

Чтоб избежать сей доли незавидной,

Насилу улыбнитесь вы опять.

Если обманет друг, предаст коллега,

Даст сбой здоровье, нелады с семьей:

Не горе то — досадная помеха.

Всё образуется — не летом, так зимой.

И как бы вас по жизни не скрутило,

Чтоб наступили лучшие года,

Один секрет вам даст желанной силы:

Держитесь, улыбаясь, господа!

Приди

В час, когда скребут на сердце кошки

И душе тяжело в груди —

Вдруг появится свет в окошке,

Стоит только тебе прийти.

Ты придешь — и тоски нет прежней,

Мгла растает, печаль уйдет,

И в душе незабудкой нежной

Что-то светлое расцветет.

И уже ничего не гложет:

Боль, печали — всё позади.

Сразу всё измениться может —

Стоит только тебе прийти.

Поддержка друга

Как здорово почувствовать внутри

Поддержку от товарища и друга,

Когда гора напастей на пути

И закрывает свет тревоги вьюга.

И пусть не говорится вовсе слов,

В тяжёлый час, когда ничто не лечит,

Ты твёрдо знаешь: друг всегда готов

Помочь, поднять, свои подставить плечи.

Как чувство это силы придаёт,

Незримая опора душу греет.

И больше никакой  не страшен чёрт —

Он нас двоих уже не одолеет!

Костёр

Когда на сердце туча и что-то жмёт в груди —

Сложи дровишки в кучу, костёрчик разведи!

Когда дымок пахучий почувствует ноздря,

И с огоньком весёлым начнут трещать дрова,

Ты посмотри на угли горящего костра —

Исчезнут все невзгоды в тех сполохах огня!

То розовым, то красным, то жёлтым подмигнёт

Покрытый нежным пеплом волшебный огонёк,

То синий, то зелёный, то бледно голубой

Появится цветочек на угольке живом!

И каждый лепесточек колышется, живёт,

И цвет свой изменяет, и в высоту растёт:

То выше он, то ниже, то ярче, то слабей —

Глядишь на них, и на сердце становится светлей!

И разгоняет тучу тот огонёк костра,

Уходит тяжесть с сердца, и не болит душа!

Всего то и делов то, чтоб в норму вновь войти:

Сложи дровишки в кучу — костёрчик разведи!

В любое время солнце в доме

Родное, близкое, своё

Желтеет солнце на балконе.

Туманным и ненастным днём

Оно лучей своих не скроет.

В любое время ночи, дня

Оно готово поделиться

Теплом чудесного огня,

Улыбкой, что так красит лица.

Роскошным венчиком лучей,

Как благодарность и награду,

То солнышко вернёт душе

Покой, уверенность, усладу.

А ароматным лепестком

С такой живительною силой

Изменит сразу всё кругом,

Всё сразу сделает красивым.

И чтоб осталась радость в доме

И счастье, что так нужно всем —

Растёт подсолнух на балконе,

Цветок — не комнатный совсем.

Простой секрет

Талая пришла вода —

Что же здесь такого?

Просто уходящий след

Царства ледяного,

Наста снежного дорог,

Холодов атаки.

Вдруг, одним чудесным днём

Поменялись знаки:

Твёрдый неприступный лёд

Стал живой водою,

Залежавшийся сугроб —

Свежестью парною.

Кардинальных перемен

Таинства основа —

И всего-то ничего:

Теплоты два слова.

Цветочек аленький

Скальный букет

В отроге сумрачной скалы,

В ложбинке небольшой,

Цветы чудесные росли

Как будто за стеной.

Их мшелый камень заслонял

От бурь и всех невзгод,

От посторонних глаз скрывал,

Загородив подход.

Угрюмо вздыбленный утёс,

Щербатый и крутой,

Не раз букет тот преподнёс

В мечтах горе одной,

Что, подбоченясь, за рекой,

Улыбки не тая,

Качала лесом, как рукой,

Волнуя и маня.

Всю нежность каменной души,

Сокрытой в глубине,

Утёс тот воплотил в цветы,

Проросшие в скале,

Где ни деревья, ни кусты,

Трава-то не растёт.

Но распустились лепестки,

Мечту пустив в полёт.

Достигнул той горы посыл,

И аромат цветов

С утёса ветер доносил

На взмах её лесов.

Цветущий на камнях овал,

Суровых скал букет,

Поведал всё ей, что скрывал

Утёс так много лет.

Цветочек аленький

Цветочек аленький —

Подарок маленький,

Подарок маленький

Любви большой

Красавца-юноши

В обличье чудища

К отважной девушке

С тугой косой.

Подарок маленький —

Цветочек аленький,

Цветочек аленький —

Волшебный знак:

Есть сердце нежное

У зверя прежнего,

И он не зверь совсем,

Не вурдалак.

Его душа внутри

Как ал цветок горит,

Но виден этот свет

Только тому,

Кто всё отдать готов

Без корысти и слов

За светлую любовь,

За доброту.

Любовь снимает все

Заклятья прежние,

И злого колдовства

Закончен пир.

Цветочек аленький —

Подарок маленький,

Но как меняет он

Весь этот мир.

Пахли губы твои цветами

Пахли губы твои цветами,

Вились волосы лебедой,

Ненаписанными стихами

Разливалися под луной.

Были чувства новы и свежи

Расцветающей в нас весны.

Были трепетными надежды,

Нежно-страстыми были сны.

Были ласковыми объятья,

Била дрожь от касанья тел.

Несравненные волны счастья

Уносили нас в беспредел.

Ослепляли глаза ночами,

Шёпот громом пронзал сердца…

Пахли губы твои цветами,

Лунным веяло от лица.

Нечаянный взгляд

Нежданно, случайно оброненный взгляд

Ответным наполнился светом —

С таким откровением только глядят,

А слов и не надо при этом.

Флюидный обмен, разговор внеземной

Понятней любой страстной речи,

И взгляд мимолётный бывает порой

Сильней ожидаемой встречи.

Решают мгновенья за ночи и дни,

За годы пустых ожиданий:

Не упустите подарок судьбы

И взгляда того обещаний!

Я тебя подожду

Вот уже зажигаются звёзды,

Гаснет отблеск вечерней зари.

Приходи, ведь не так ещё поздно,

Не томи ты меня, приходи.

Приходи, ведь я знаю наверно

Встречи ты с нетерпением ждёшь.

Я запомнил твой взгляд откровенный

И ресниц твоих трепетных дрожь.

Приходи, позабудь предрассудки,

Ведь хотим мы с тобою одно —

Чтоб опять зацвели незабудки

Словно в старом прекрасном кино.

Приходи, не терзайся сомненьем,

Приходи поскорее ко мне —

Ведь не так много чудных мгновений

Происходит на этой земле.

Приходи. Вечер скрылся за крыши.

Звёзды блеском затмили зарю.

Приходи — предначертано свыше,

Приходи — я тебя подожду.

Вечернею порою

Несёт с покоса запах пряный,

И нетерпением дыша,

Приходит вечер столь желанный —

И вслед за ним спешит душа.

Спешит в объятья сладкой ночи,

В травы пушистую кровать,

Туда, где кто-то тебе хочет

Слова заветные шептать.

Слова затихнут звуком чудным,

Погаснут звёзды-светлячки,

Останутся в сиянье лунном

Блаженство, счастье… и сверчки.

Тихий вечер

Тихий вечер,

Ближе плечи,

Откровенней взгляд.

Непонятного томленья

Сладкий аромат.

Ветерок попался в сети

Золотых волос,

И один ответ на свете

На любой вопрос.

Тонкий искус,

Дивный привкус

Чуть припухших губ.

Опьяняющее чувство

Распирает грудь.

Искромётное сиянье

Лучезарных глаз.

Тихий вечер на свиданье

Приглашает нас.

И не уснуть теперь до рассвета

Мёдом дурманят свежие травы,

Лёгкой прохладой тянет с дубравы,

Зорькой вечерней вспыхнули крыши.

Шёпот всё глуше, губы всё ближе.

Сердце всё громче, очи всё ярче,

А поцелуи жарче и жарче.

В сумраке млеет пьяное лето.

И не уснуть теперь до рассвета.

Опьяняющая весна

Приосанились, распогодились

Загулявшие вечера.

И под птичий свист нарядился лист

В нежно-свежие колера.

От заката полоска рыжая —

На черемухе у окна.

И такая вокруг бестыжая,

Опьяняющая весна.

Позабылись хандра с недугами,

Замороченные дела.

Стали гибкими и упругими

Отогревшиеся тела.

Закипела сирень медовая,

Разгоняя по жилам кровь.

Каблучком застучала снова к нам

Оживляющая любовь.

Как много мы друг другу не сказали

Как много мы друг другу не сказали,

Всё лучшее скрывая про запас,

А мелочи пустые обсуждали,

Как будто они главные для нас.

О подлинных же чувствах мы молчали,

Чтоб ненароком их не повредить —

Как много мы друг другу не сказали,

Придётся ли ещё поговорить?

Боялись мы, что чувства потускнеют

От фраз затёртых, что твердят всегда,

И говорить стеснялись мы, немея —

Сердца всё говорили, не слова.

Когда ж уйдём мы в голубые дали —

Померкнут те сокровища души:

Как много мы друг другу не сказали,

И, может быть, в том были не правы.

Когда мы вместе

Пусть дождь идёт и ветер воет,

И мгла царапает окно —

Нам хорошо с тобою в доме,

Где так уютно и тепло.

Пусть проклинают непогоду

Собаки, дворники, коты —

Всегда прекрасно время года,

Когда мы вместе: я и ты.

Прекрасное время

Пусть холод, мрак, для кошек драма,

Дождь с ветром ломятся в окно:

Плевать на всё — такая Дама!

Постель, закуска и вино!

Ты запала почему-то в душу мне

Ты запала почему-то в душу мне.

И теперь живу я будто бы во сне.

И с тех пор все мысли только об одном,

И никак их не отложишь на потом.

А от этих мыслей кругом голова —

Вот такая приключилась ерунда.

А от этих мыслей пользы никакой —

Что же это всё же сделалось со мной?

Что такое, что же это за навет,

Разорву я эти цепи или нет,

Возвращу ли я себе былой покой,

Иль не выйти мне из власти колдовской?

Эти чары не осмыслить, не понять,

И не скрыться мне от них, не убежать.

И живу теперь я словно бы во сне —

Ты запала почему-то в душу мне.

Как хорошо вдвоём

Как хорошо сидеть с тобой на берегу реки,

Как хорошо смотреть и слушать плеск речной волны,

Как хорошо ходить по лесу в поисках грибов,

И на полянах любоваться красотой цветов.

Как хорошо смотреть на птиц, щебечущих в кустах,

Как хорошо гулять с тобою в парках и садах,

Как хорошо глядеть на звёзды тихою порой,

И загадать одно желанье — быть всегда с тобой.

Как хорошо идти вдвоём под проливным дождём,

И укрываться хорошо нам под одним зонтом,

И без зонта нам хорошо по ручейкам бежать,

Промокшим нам на ветерке так хорошо дрожать.

Как хорошо бывает нам и в стужу, и в пургу,

Когда горит огонь живой во сне и наяву,

И греет он сильней всех шуб, сверкает как алмаз,

Название тому огню — сиянье твоих глаз.

И потому так хорошо глядеть на облака,

На лес, на поле, на траву и просто на дома,

На мостовую, на забор, на иву у реки,

Как хорошо с тобой вдвоем по жизни нам идти.

И надо сделать всё, чтобы огонь тот не угас,

Чтобы не стало плохо вдруг ни одному из нас,

И пусть сияют нам глаза до окончанья дней,

Тогда всё будет хорошо у нас и у друзей.

Всё будет очень хорошо, поверьте мне друзья,

Такая вот счастливая пусть выпадет судьба!

И пусть сияют нам глаза у остальных людей,

Тогда всем будет хорошо нам на планете всей!

Маяк

Когда шторма гнут звенья

У жизненной цепи,

Тревоги и сомненья

Рвут душу на куски,

Что заблужусь, наверно,

И просто пропаду —

Ты как маяк мгновенно

Зажжешь свою звезду!

И этот лучик света

Сквозь морось, страх и мглу

Почувствую я где-то

Внутри и оживу,

Воспряну новым свойством,

Вновь силы обрету,

С утроенным упорством

Сквозь бури я пойду!

Как лайнер в океане,

Поймав твою волну

Локатором в тумане,

Прорвусь я сквозь пургу,

Сквозь беды и ненастья,

Сомнения и тьму

Найду дорогу к счастью —

Тебя я отыщу!

Свет маяка в потёмках

Не зря во все века

Вселял надежду стойко

В тревожные сердца.

И ясен жизни `фетиш —

Ведь я непобедим,

Пока в невзгодах светишь

Ты мне лучом своим!

Ну, поехали!

Ты мне скажешь вдруг: Ну, поехали!

Хорошо — в ответ я скажу,

Ну поехали, так поехали,

Хоть на край земли, хоть во тьму!

Всё равно куда, ведь уверен ты —

Мне с тобой везде по пути,

Ну поехали, так поехали,

Ехать всё-таки — не идти!

Собираться нам — дело плёвое,

Мы легки ещё на подъём:

Счастья чемодан, мысли новые —

С собой лишнего не возьмём!

Паковать ведь нам не вагон вещей:

Всё, что надо нам — всё при нас,

А что нажили прежней жизнью всей

Пусть останется про запас!

Оставляем всё малоценное,

Колебанья, сомненья и дрожь,

Берём самое сокровенное —

Ты меня с собою берёшь!

Ну поехали, ну поехали,

Так чего ж ещё тут сказать,

Ну поехали, так поехали —

Чему быть — то не миновать!

Не особо приметная женщина

С головой захлестнула, опешила,

Ил сомнений смела в глубине

Не особо приметная женщина,

Не приметная всем, но не мне.

Для меня она самая-самая.

И на радость ли мне, на беду

Повстречались мы с нею нечаянно —

Как теперь не поверить в судьбу?

Нет нисколечко шика столичного

И модельного лоска совсем.

Простотой своей — столь необычная:

Ей не надо, чтоб нравилась всем.

Как уютны глаза ее добрые:

Утону в них — не тянет всплывать:

И печальные, и веселые,

И уставшие все понимать.

Благодарен судьбе бесконечно я,

Как зимой благодарен весне,

Что нашел распрекрасную женщину,

Не приметную всем, но не мне.

Кто тебя приласкает

Вот опять расцветает сирень —

Аромат опьяняет.

Ожидает душа каждый день,

Кто её приласкает.

Как прекрасны романы в кино —

В дрожь и трепет бросает.

Как тебе не хватает того,

Кто тебя приласкает.

Может рядом он где-то пройдёт,

Но тебя не узнает.

Ну, когда ж тебя счастье найдёт,

Позовёт, приласкает.

Так проходят в тоске вечера,

Так и жизнь пролетает —

Посмотри ж ты скорей на меня,

Кто тебя приласкает.

Если принца из сказки ты ждёшь —

Он у нас не бывает

И совсем на того не похож,

Кто тебя приласкает.

Вот уже облетает листва,

И цветы увядают.

Посмотри, посмотри ж на меня —

Я тебя приласкаю.

Третий — лишний

Когда в запой читаешь книжки,

Мечтая о большой любви,

Всегда выходит — третий лишний,

А третий в этих книжках — ты.

Когда в природе пробужденье:

Пьянит весна, цветёт жасмин,

Когда кругом бурлит веселье —

Ты третий лишний, ты — один.

Когда все парами гуляют,

И рвут любви запретный плод —

У лишнего лишь годы тают,

И сохнет он, а не цветёт.

И чтобы жизнь не пролетела

Под книжным пологом таким —

Люби: ведь нет важнее дела —

И стань не третьим, а вторым!

Признание

Как нелегко признаться

В любви бывает нам.

Скрывая нежность, тайно

Вздыхаем по ночам.

Стесняемся, стыдимся

Те чувства показать:

Свою родную милую —

Любимою назвать.

Суровость показная

В душе скрывает то,

Что выказать бы надо

Уже давным давно

И прекратить терзанья

Чужие и свои,

А не тянуть их годы,

И месяцы, и дни.

Напиши что-нибудь, пожалуйста

Затянуло газоны проседью.

Поселилась на сердце хмарь,

И белесой знобящей осенью

В душу лезет тоска-печаль.

На проспектах прямых плутаю я

Без тебя в городской глуши:

Напиши мне письмо, пожалуйста,

Ну, пожалуйста, напиши.

В этом городе неустроенном

Среди тысяч других людей

Одиночеством веет и холодом

Без тебя с каждым днем сильней.

Расставание столь безжалостно

Оглушает меня в тиши:

Напиши что-нибудь, пожалуйста,

Ну, пожалуйста, напиши.

На краешке лета

Повстречавшись на краешке лета,

Встали мы на пороге любви.

Пропустивши весну свою где-то,

Ближе к осени мы зацвели.

Хоть тепло мы ещё захватили,

Но природы ход не повернёшь.

Мы на краешке лета забыли:

Впереди будет осень и дождь.

Проглядели весну свою где-то,

Только краешек лета при нас —

Переступим ступенечку эту:

Что там — годы любви или час?

И где ж это самое счастье?

Уходит любимая, не разлюбив —

Спешит осчастливить другого,

Меняет влекущий, но смутный призыв

На чёткий мотив Мендельсона.

Прекрасный расклад, ясно всё наперёд —

Удачи сверкающий глянец.

Но что-то озноб временами берёт,

И щёки терзает румянец.

Премудрая штука — обычная жизнь.

Где в ней это самое счастье?

То прямо под боком привычно лежит,

А то упорхнёт в одночасье.

Украденная любовь

Я мог бы тебе признаться,

Я мог бы найти слова,

Но стоит ли напрягаться —

К чему эта вся игра?

Игра слов, намёков, взглядов

Напрасно волнует кровь:

Уже не вернуть, не надо

Украденную любовь!

Украденную когда-то,

Но, видно, не навсегда,

Украденную, ребята,

В чудесные те года.

В то время, когда закаты

Стремглав превращались в рассвет,

Был шёпот, как грома раскаты,

Был глаз ослепительный свет.

И не было сил расстаться,

Шла кругом тогда голова,

И невозможно дождаться

Вновь вечера было тогда.

Ушли в голубые дали

Прекрасные те времена.

Всё кончилось тем, что украли,

Украли любовь у меня.

Напрасно намёки ловит

Раскованный взгляд опять:

Не возродить всё снова,

Украденного — не потерять.

Пароходик счастья

На пустынном стою берегу,

И волна нагоняет тоску.

Пароходик плывёт вдалеке,

Увозя что-то близкое мне.

Пароходик плывёт на закат,

И туда же плывут облака.

Может тоже туда поплыву,

За буи поплыву, в глубину.

Пароходик плывёт и плывёт,

А на сердце и давит и жмёт —

Это счастье вчерашнего дня

Уплывает сейчас от меня.

Пароходик растаял во мгле,

И луна отразилась в воде —

Ей как мне, видно, грустно сейчас:

Одиночество мучает нас.

Непросто счастье удержать

В краю непуганых закатов

И необъезженных ветров

Водились птицы-жар когда-то,

Красою будоража кровь.

Но ненароком, в одночасье

Спугнули птиц с обжитых мест,

И потревоженное счастье

Покинуло волшебный лес.

Ушло царившее веселье,

Ведь больше жаром не горят

Их удивительные перья —

И сразу потускнел закат.

И ветер прыть свою умерил,

А прежде не знавал границ,

Поразбежались чудо-звери —

Всё изменилось без жар-птиц.

Легко гармонию нарушить,

Волшебный свет легко прогнать,

Легко нагнать тревогу в душу,

Но сложно счастье удержать.

Закрытие сезона

Поглощает слякоть летние надежды.

Засыпают листья старые следы.

И уже не греет то, что грело прежде,

Не выводят в рощах трели соловьи.

Пасмурно на сердце, и в душе тоскливо —

Теплоты ушедшей осенью не ждёшь.

Высохла малина, полегла крапива —

Боль и наслажденье размывает дождь.

Если что и было: плохо, хорошо ли —

То туман и морось унесут с собой.

Закрывает осень летние гастроли,

Засыпает грёзы бурою листвой.

Сладкое облачко грусти

Светлой грустью осыплет черемуха,

Облетит побледневший жасмин,

И шиповника сладкое облако

Улетит лепестками как дым.

Потускнеют отцветшие лютики,

Земляничный сойдет аромат.

Голосочек знакомой кукушечки

Не поманит смотреть на закат.

Ляжет на сердце странная оторопь.

Не желает душа принимать

Невозвратность жасминовых всполохов,

Превратившийся в грусть аромат.

Сумерки

Где-то бродит ночь в свете фонарей,

Где-то яркий день с красками аллей.

Мы как день и ночь — встреч лишь череда:

Вроде не враги, но и не друзья.

Ночь сменяет день, день сменяет ночь.

Неизбежность встреч — гонит их же прочь.

В отблесках закат, в сумраке рассвет.

Здравствуй и прощай, ну пока, привет.

Замкнутая цепь, бесконечный круг —

Эту карусель не разрушить вдруг.

День встречает ночь — сумерки тогда:

И не явь, не сон, и ни нет, ни да.

Что-то в сумерках мы потеряли

Как придирчивый глаз

Вечер смотрит на нас

С погрустневшим осенним укором.

Всё, что было — не в счет,

Расставанье грядет,

И, по-видимому, очень скоро.

Ясно это без слов,

И намёк тот не нов,

Что исходит с вечерним прищуром.

Сумрак ночи в душе

Не развеет уже

Мягкий свет под луны абажуром.

Расставанье — пустяк,

Значит что-то не так,

Что-то в сумерках мы потеряли.

Из нечаянных встреч

Ничего не извлечь:

Мы и сами не те, что в начале.

Не сберечь, не спасти

Прежних дней теплоты

Под студеным осенним напором.

Бабье лето — не в счет,

Зимний холод грядет,

И совсем уже, видимо, скоро.

Мы привыкаем к разъединенью

Было когда-то целое счастье —

Им не могли мы налюбоваться,

В страсти казалось: так будет вечно —

И за свою поплатились беспечность.

Счастье, оно только целое — счастье:

Не поделить, не разрушив, на части.

Словно хрустальная эта вещица:

Станешь делить — на куски разлетится.

А разлетится — снова не сложить:

Больше не греет общее ложе,

Спать на осколках — сущая пытка,

Не озарит больше сумрак улыбка.

В разных постелях ищем спасенья

И привыкаем к разъединенью.

В этой привычке — боль и отрада:

Сломанной вещи снова не надо.

Счастье приходит к нам не навечно

И не прощает нашу беспечность.

Может и к счастью бьется посуда,

Восстановить ее — явное чудо.

Брошенный букет

На затоптанном перроне —

Нежных роз букет.

В удаляющемся звоне —

Сбывшийся навет.

Не сложилась чудо-песня,

Лопнула струна:

Красота цветов нездешних

Больше не нужна.

На асфальте болью жгучей

Дивный цвет затих.

Стон отчаянья беззвучно

Превратился в крик.

На счастливом семафоре

Выключили свет.

На затоптанном перроне —

Колких роз букет.

Защемило в груди

Защемило в груди, защипало в глазах,

А на сердце — тревожно и жарко.

Может быть, что-то делаем всё же не так?

Расставаться обидно и жалко!

Может быть, надо просто немного остыть,

Не рубить сгоряча по живому.

Может быть, постараться понять и простить,

Чтобы жизнь вновь пошла по иному.

Что ушло — не вернёшь, чему быть — то и пусть:

Не сшивают разрыв на дорогу.

Защипало в глазах, залегла в сердце грусть —

И обидно, и жалко, ей богу!

Когда отступит пелена

Когда отступит пелена,

И лунный свет наполнит воздух —

Всё снова станет как тогда,

Но слишком поздно, да слишком поздно.

К чему красивые слова,

Зачем себя напрасно мучить,

Ведь через час опять луна

Зайдёт за тучи, зайдёт за тучи.

Не говори ты вновь речей,

Которыми так сердце дышит —

Ведь я уже не твой, ничей:

Я не услышу их, я не услышу.

И я свободен делать всё,

И делай ты, что пожелаешь —

Ведь всё закончилось давно:

Я это знаю, ты это знаешь.

Так для чего, скажи, опять

Дуть на костёр, едва чадящий,

И вновь дрова с плеча ломать —

Не настоящий он, не настоящий.

Краса неземная

Твои глаза, как врата рая,

Блаженство вечное сулят,

И ты такая неземная —

Все в след восторженно глядят!

Глядят, как лёгкою походкой

Ты как на облаке плывёшь,

И облако небесной лодкой

Тебя из сказки нам несёт!

Быть может, это только снится,

И стоит вновь открыть глаза,

Как тут же чудо испарится,

Исчезнет дивная краса!

Вот почему в таком волненьи,

Чтоб ненароком не спугнуть,

Все смотрят как на приведенье,

Боясь вздохнуть или моргнуть!

Ты вся как само совершенство-

Нельзя ведь лучше изваять!

Какое всё-таки блаженство

Тебя хотя бы увидать!

А, может, лишь воображенье

Тебя рисует нам такой?

На самом деле при общеньи

Ты вдруг окажешься земной!

Нет, пусть останется как было —

Нельзя мечту нам приземлять!

Когда душа и чувства взмыли,

Не надо крыльев их лишать!

Поэтому, все и застыли,

Чтобы виденье не спугнуть:

Когда придётся в этом мире

На ангела ещё взглянуть!

Грезы молодости моей

Ты лишила покоя и разума,

Забытья беспокойного сна,

Непрочитанная, нерассказанная,

Неизведанная моя.

Затянула в глубины омута,

В кипяток ледяной воды,

Бессердечная, безупречная

И не знающая вины.

Растревожила и стреножила,

Надломила и напрягла,

Неизвестная и прелестная,

Неосознанная моя.

Для меня ты как солнце жгучее

И холодная сень луны,

Непривычная, необычная,

Не имеющая цены.

Ускользающая и играющая

Бликом солнечным на стене,

Ты мечта моя и печаль моя,

И журавлик мой в вышине.

Хороши снегири с синицами,

Но журавлик мне всё ж милей —

Улетают вдаль синей птицею

Грёзы молодости моей.

Дым твоих волос

И с дымкою берёз

Приходит жизни вечер

И с шёпотом листвы,

Шуршащей под ногой,

Где дым твоих волос

Спускается на плечи,

Как аромат весны

Осеннею порой.

И сладкий этот дым

С щемящим вкусом вечным

Поможет вновь разжечь

Притухшие угли:

И вечером сырым,

Как в юности беспечной,

Растопим жизни печь

Поленьями любви.

Вновь с дымкою берёз

Воспрянут чувства снова,

И с сумерек войдём

В манящий дивный свет,

Где дым твоих волос,

Всех перемен основа,

Неведомым путём

Вернёт закат в рассвет.

У природы нет плохой погоды

Весна

Весной всё просыпается и оживает вновь,

Идёт сокодвижение деревьев и кустов,

И воробьи чирикают, мяукают коты,

И все освобождаются от зимней хворобы!

И солнце очень яркое, нет туч и облаков,

И небо сине-синее, и верба вновь цветёт,

И на берёзах майские сидят уже жуки,

Подснежники и ландыши выходят из земли!

И от земли проснувшейся пьянящий дух идёт,

Строчки, сморчки над листьями продвинулись вперёд,

Букашки разом ожили, и бабочки, шмели,

И вышли с муравейников трудяги муравьи!

И люди встрепенулись все, сняв куртки, пиджаки,

И плечи порасправили, втянули животы,

Их лица оживились вдруг улыбкой озорной,

И взгляд неосторожный их выдаёт с лихвой!

А виновата в этом обычная весна,

И солнце, море света, и небо, и река,

Бурлящая с приходом весенних талых вод —

Идёт сокодвижение и будоражит кровь!

Весенний настрой

Холод ушёл — и ладно,

День всё теплей-светлей.

В нежно-зелёных взглядах

Искорки у полей,

Где осмелевшим всходам

Ласковый ветерок

Шалую дал свободу,

Сняв ледяной полог.

Скоро и в нас растает

Мрачный сугроб обид,

Тягостных мыслей стая

Больше не прилетит.

Холода слов не надо —

В сердце любовь согрей:

В повеселевших взглядах —

Искорки у людей.

К нам наше лето обязательно придёт

«Крепитесь, люди! Скоро лето!

К нам наше лето обязательно придёт!» (О. Митяев)

По скукоженным за зиму листьям,

Что прилипли на мёрзлый асфальт,

С придыханием скандалиста

Пробирался гриппующий март.

В затянувшейся хмари наркоза,

В грязи лужиц с осколками льда

Загостилась в авитоминозе

Надоевшая в зиму хандра.

И на этом безрадостном фоне

Солнце начало всё оживлять.

Птиц простуженные саксофоны

Перешли на лирический лад.

И, оттаяв под пташечек пенье,

Приосанился вешний народ:

Продержались — теперь непременно

Лето красное снова придёт!

Март

Осели наледи, местами

Уже не прочен их покров —

Сугробы, талыми ручьями,

Спешат в овраги с бугорков.

Озимые проснулись в поле

Под плёнкой тонкого ледка,

И сосны снег стряхнули с хвои

И греют стылые бока.

Кустарник моется в низинах

Живой весеннею водой,

И к дубу тянется рябина —

Зимы закончился покой.

Пичуги дружно трель выводят

С утра до самой темноты,

А ночью хороводы водят

Любвеобильные коты.

Особый воздух, море света,

Души загадочный полёт —

Теперь уж точно, люди, лето

К нам обязательно придёт!

Веснушки

Вновь солнце согрело леса по опушкам,

Осколки от радуг сверкают во мхах.

На сосенках вдруг появились веснушки

Из рыжей хвои, что на тёмных боках.

Развесили платья мохнатые ели —

Их бал новогодний закончен в лесу.

Берёзы, умывшись, веснушки надели

Из жёлтых серёжек, что так им к лицу.

С приходом весны сон ушёл из подушки —

Неведомый трепет и радость в мечтах.

И вот у тебя появились веснушки —

Весенние искры на милых щеках.

Весенняя капель

Звенит капелью мартовский снежок.

Безоблачное небо голубеет.

И свежести весенней ветерок

Покой зимы сдувает из аллеи.

Убрали дети санки и коньки:

Сосульки — нынче лучшие игрушки.

К девчонкам потянулись пареньки.

И греются на солнышке старушки.

Мимоз приезжих нежные цветы

Встречают пробуждение природы,

А женский праздник норовят коты

Отметить разудалым хороводом.

Пичуги радостно выводят трель,

Берёзки наряжаются в серёжки…

А виновата в этом лишь капель.

Ну, и весна, наверное, немножко.

Подснежник

Пригорок, солнышком согретый,

Чуть дальше — ноздреватый снег:

Подснежник, в белое одетый,

Весну встречает раньше всех.

Раскрыл он белые ладошки

Своих пушистых лепестков.

Берёз улыбчивых серёжки

Свисают будто с облаков.

И свежесть тающего снега,

И солнца свет, и блеск звезды,

И аромат земли и неба

Впитал подснежник у весны.

Тот аромат непревзойдённый,

Природой созданных духов,

Пьянит, волнует негой томной

И будоражит в жилах кровь.

И полной грудью мы вбираем

И неба синь, и солнца свет,

И красоту родного края —

Всех оживляет первоцвет!

Верба

Беззащитные сломаны ветки

Злой, безжалостной чьей-то рукой,

И пушистых комочков розетки,

Не раскрывшись, ушли в мир иной.

Не слетят к ним мохнатые пчёлы,

Не порадует их щебет птиц,

Почки их никогда не откроют

Своих трепетно нежных ресниц.

Как недолга их жизнь и нелепа,

И покорна судьбе роковой,

Что невинные ветви так слепо

Обломала бездушной рукой.

Ни весны им, ни лета не будет,

И не будет, конечно, зимы —

Не губите, не портите, люди,

Вербу вы, просто так, без нужды!

Лазурный вечер

Сиреневый вечер, лазурный закат,

В чарующей дымке деревьев наряд,

И облака пёрышки к звёздам ушли,

Ловя там последние солнца лучи.

Как в сказке, природы волшебная кисть

Волнующих красок добавила в высь

Бездонного неба, что скоро в ночи

Украсят лишь звёзды, и серпик луны.

Так день уходящий, спеша на покой,

Неясные чувства приносит с собой,

Что в свете закатном подспудно влекут

В черёмухи шаль, в соловьиный уют.

Ну разве уснёшь в дивный вечер такой,

Когда вдохновенье сменяет покой.

Пусть утро мудрее — ведь так говорят,

Но чем-то милее лазурный закат!

Лес после дождя

Как хорошо в лесу после дождя:

Травинка каждая умылась и сверкает,

И улыбается, и развернулась вся,

И в рост пошла, и сочно источает

Тот аромат, присущий только ей.

Ни комаров, ни мошек, ни людей —

Отдохновенье и успокоенье!

Прохлада, свежесть, умиротворенье,

И терпкое дыхание земли,

Питающее стебли и стволы

Всего растущего энергией движенья.

Парное над землёю испаренье,

И пряный запах листьев и грибов,

Травы, лишайников, сопревших пней и мхов.

Трехмерная карта маршрутов островков в поджелудочной железе здорового человека

В этом исследовании поджелудочная железа здорового человека от донора использовалась для оценки характеристик островков и их пространственного распределения. Первоначально первые измеряемые параметры состояли из длины ( 25 см ) и объема ( 45 см 3 ). Далее были приняты во внимание четыре области поджелудочной железы, а именно головка (обозначенная как B1), шейка (B2), тело (B3) и хвост (B4).Из каждого среза поджелудочной железы мы использовали один репрезентативный поперечный срез, который был разделен на 16 гистологических слайдов. На каждом предметном стекле проводили полуавтоматические морфометрические измерения с целью выявления особенностей панкреатических островков. Мы проанализировали в общей сложности 5423 островка , принадлежащих к четырем интересующим отделам, а именно головке (910 островков), шейке (813 островков), телу (2057 островков) и хвосту (1643 островка) поджелудочной железы (таблица 1). . В таблице 1 показано количество обнаруженных островков для каждого гистологического предметного стекла (B1[P1–P16]–B4[P1–P16]).Максимальное количество островков, обнаруженных на предметном стекле, было обнаружено в срезе тела поджелудочной железы (233 островка), а именно на предметном стекле B3[P5], тогда как минимальное количество островков было обнаружено в срезе шейки на предметном стекле B2[P4]. горка. С точки зрения продольной перспективы срезов поджелудочной железы (общее количество островков, обнаруженных во всех срезах на предметных стеклах B1–4[Px]), максимальное количество островков было обнаружено на предметных стеклах B1–4[P15] (473 островка), а минимальное количество островков на предметных стеклах B1–4[P12], всего 156 островков (таблица 1).Анализ морфометрических измерений показал, что общая площадь 2D островков составляет на каждом срезе (таблица 2). Таким образом, 16 гистологических препаратов среза головы (B1) показали общей площади островков из 9,252 мм 2 и среднюю площадь островков 0,578 мм 2 (±0,467), в то время как площадь шейки среза (B2) показал общей площади островков из 6,960 мм 2 и среднюю площадь островков 0,435 мм 2 (±0.359). Срезы тела и хвоста показывают наибольшее покрытие поверхности (таблица 2). 16 гистологических препаратов среза тела (B3) показали общую площадь островков (и среднюю площадь островков) 14,004 мм 2 (в среднем 0,875 мм 2 ±0,391), что было аналогично общая площадь островков, обнаруженная в срезе хвоста (B4), а именно 14,186 мм 2 (в среднем 0,887 мм 2 ± 0,633). Интересно, что хотя два среза (B3 и B4) показывают одинаковые значения общей площади островков, они показывают различное распределение островков на поверхности двух срезов (рис.1А). С точки зрения 2D, общая площадь островков на всех ( 64 слайда ) гистологических препаратах показывает значение приблизительно 44,4 мм 2 (44 401 127,94 мкм 2 ) со средней площадью 020 07 мм 2,775 0,467) и среднее значение средней площади островков на предметном стекле 0,694 мм 2 ±0,201 (таблица 2). Подробное сравнение площади островка и периметра островка показывает относительные различия в пропорциях между двумя морфометрическими параметрами (дополнительная таблица S1 онлайн).Кроме того, было проведено численное распределение между средней площадью и количеством островков для каждого предметного стекла микроскопа (дополнительная таблица S2 онлайн). На следующем этапе нас интересовало определение ряда параметров, а именно диаметра островков, среднего объема островков, общего количества островков внутри поджелудочной железы, общего объема, занимаемого островками внутри поджелудочной железы, и общей трехмерной поверхности островков. .

Таблица 1 Количество островков поджелудочной железы, обнаруженных на каждом гистологическом предметном стекле/срезе поджелудочной железы. Таблица 2 Общая площадь (мм 2 ) панкреатических островков в каждом отделе (B1–B4). Рисунок 1

Распределение панкреатических островков.

( A ) двухмерное распределение панкреатических островков на каждом участке (B1–B4) поджелудочной железы. Также представлены поджелудочная железа от донора и схема организации срезов. Дорсальная часть поджелудочной железы представлена ​​слайдами Bx[P1-P4], тогда как вентральная часть поджелудочной железы представлена ​​слайдами Bx[P13–P16].( B ) доля островков вдоль четырех секций. Распределение островков поджелудочной железы на каждом гистологическом препарате в зависимости от количества островков и их средней площади (мкм 2 ) показано для: ( C ) области головки (B1), ( D ) области перешейка (B2 ), ( E ) область тела (B3), ( F ) область хвоста (B4). Средняя площадь поверхности (мкм 2 ) островков представлена ​​на оси X, тогда как количество островков представлено на оси Y.Количество островков и их средняя площадь на срез (В1–В4) приведены для: ( J ) области головы (В1), ( I ) области перешейка (В2), ( G ) области тела ( B3), ( H ) хвостовая часть (B4). Линии тренда на панелях с C по H используют полином третьего порядка. ( K ) распределение островков, упорядоченное по размеру. Для каждого среза (B1–4) количество островков представлено по оси X, тогда как площадь поверхности (мкм 2 ) островков представлена ​​по оси Y.Точки в форме ромба представляют собой островки в области головы. Точки квадратной формы представляют собой островки в области шеи, а точки треугольной формы представляют собой островки в области тела. Точки круглой формы представляют собой островки в области хвоста. ( L ) глобальное распределение 5423 островков в зависимости от их периметра и площади. Пунктирная линия тренда панели L использует порядок полинома 4. Прямая пунктирная линия и стрелки в полукруге на панели K и L представляют собой барьер, над которым наблюдались скопления островков.

Диаметр островков

Для расчета среднего значения диаметра островков использовались два метода из-за различных форм наблюдаемых островков, которые создают относительную непропорциональность между их площадью и их периметром (т.е. звезда -островок в форме будет иметь непропорциональный периметр площади поверхности, в то время как островок круглой формы будет демонстрировать пропорциональность между периметром и площадью поверхности). Первый метод учитывал средний периметр ( p м ) островков, измеренный на гистологическом предметном стекле, и рассчитывали средний диаметр островков (1).Таким образом, было обнаружено, что средний диаметр островков (диаметр островков по периметру — d ip ) всей поджелудочной железы имеет значение 113,83 мкм (±7,05). Второй метод, используемый для расчета диаметра островков поджелудочной железы, учитывает их измеренную площадь поверхности ( a m ) по гистологическому предметному стеклу, а средний диаметр островков рассчитывают по формуле (2). Таким образом, с помощью этой второй версии формулы было обнаружено, что средний диаметр островков (диаметр островков с использованием площади — d ia ) всей поджелудочной железы имеет значение 104.02 мкм (±5,67). Путем усреднения двух результатов мы рассчитали средний диаметр (средний диаметр — d м ) между двумя значениями (3), который считается более близким к фактическому среднему значению диаметра островка. Радиус (средний радиус островка — r i ) также был определен (4). Таким образом, средний диаметр островка ( d м ) между двумя методами оценки составил 108,92  мкм (±6.27) с радиусом ( r i ) 54,46 мкм (±3,13).

Islet Volume

для полной трехмерной перспективы, средний Islud ( V P ) был рассчитан в соответствии со средним диаметром островков ( d м ) классическая формула объема (5). Таким образом, средний объем островков ( V p ) показал значение 0.00068 мм 3 (686 994,29 ± 107 297,82 мкм 3 ) или 0,00069 мкл (±0,00011). Средняя трехмерная площадь поверхности островков ( A im ) показала значение 0,037 мм 2 (37 464,69 ± 4 109,69 мкм 2 ) и была рассчитана по формуле (6).

Общее количество островков и их объем внутри поджелудочной железы

Аппроксимация общего количества островков и объема, который они занимают, была сделана посредством виртуализации.Рассматривали виртуальную модель, в которой поджелудочная железа была разделена на срезы толщиной, равной среднему региональному диаметру островка ( d i ). Далее мы считали, что каждый виртуальный срез включает в себя количество островков соответствующего региона. Таким образом, количество островков из каждого виртуального среза суммировали, чтобы выяснить общее количество островков в поджелудочной железе (7). Следовательно, количество островков в поджелудочной железе приблизилось к 3 204 588 островкам ( ~ 3.2 миллиона островков ). Выведенный по тому же правилу, что и выше, общий объем островков (8) показал значение 2 см 3 , среднее между четырьмя секциями (B1–4) при 0,5 ±0,1 см 3 ( Таблица 3). Общая площадь Islet 3D 3D оценивалась на уровне 1132 см 2 (или 0,1 м 2 9004 (или 0,1 м 2 9004), усреднение между четырьмя разделами при 283 ± 93 см 2 (Таблица 3). Наконец, наша оценка процента островков от общего объема поджелудочной железы (45 см 3 ) показала приблизительное значение 4 .487% . Средний процент островков между секциями (B1–B4) составил 1,12 ± 0,3% (см. Таблицу 3).

Таблица 3 Абсолютные и относительные значения основных параметров островков по регионам поджелудочной железы.

Распределение островков

Распределение островков внутри поджелудочной железы было одной из основных целей данного исследования. Используя тепловые карты для обзора структуры ткани поджелудочной железы, нам удалось проследить более плотные или менее плотные участки срезов (рис. 1А и рис.2Д). Мы также использовали тепловые карты для определения площади поверхности, занятой островками на каждом предметном стекле (рис. 2C). При сравнении 2D-распределения четырех срезов первое важное наблюдение заключалось в том, что островки сгруппированы в головке поджелудочной железы. Эти группы островков постепенно распространяются по поджелудочной железе вплоть до области хвоста (рис. 1А и 2С, D). Обратите внимание, что начиная с головки и до хвоста поджелудочной железы темно-синяя область (низкая плотность) уменьшается в пользу светло-голубой области (более высокой плотности — рис.2С,Г). Доля островков вдоль поджелудочной железы также представляет интерес (рис. 1В). Особое наблюдение в этом случае указывает на то, что среднее количество островков на B1–4[P12] было очень небольшим по сравнению со средним количеством островков на других предметных стеклах B1–4[Px]. Не менее интересно, что среднее количество островков, присутствующих на предметных стеклах B1–4[P4] и B1–4[P15], показало самые большие значения. Кроме того, для каждого среза было выполнено как распределение количества островков и средней площади островков/препарата, так и распределение площади и периметра отдельных островков (рис.1С–Г). Таким образом, кластеризация распределения, наблюдаемая на рис. 1Е, указывает на почти равномерное рассеяние островков в теле поджелудочной железы. Глобальная тепловая карта, представляющая перекрывающиеся распределения четырех срезов, дополнительно показывает общее количество островков (рис. 2F) и сумму всех площадей островков (рис. 2А) на B1–4 [Px]. Оба распределения, рассматриваемые с боковой стороны, показывают схожую картину. Однако, если смотреть сверху, оба распределения показывают разные модели. Если боковая картина показывает линейную зависимость между общим количеством островков и суммой всех площадей островков, вид сверху показывает большую площадь островков на левой стороне срезов и большее количество островков на правой стороне срезов. (Рис.2А,Е).

Рисунок 2

Тепловая карта распределения островков поджелудочной железы по их количеству и площади поверхности.

( A ) Глобальная тепловая карта, представляющая перекрывающиеся распределения панели C (сумма всех плотностей от B1 до B4). Желтые области представляют более высокую плотность островков, а красный цвет представляет области с более низкой плотностью, ( B ) общая площадь островков по срезам (B1–4), ( C ) тепловая карта, которая указывает площадь поверхности, занятую островками. , ( D ) тепловая карта, представляющая плотность островков в секциях B1–B4.Желтые области представляют более высокую плотность островков, а синий цвет представляет области с более низкой плотностью, ( E ) общее количество островков в каждой секции, а именно B1–B4, ( F ) глобальная тепловая карта, представляющая перекрывающиеся распределения из панели D (сумма всех площадей поверхностей B1–4). Желтые области представляют более высокую занятость поверхности островками, а красный цвет указывает на более низкую занятость поверхности.

Предпочтения по размеру островков

В соответствии с эволюционными параметрами каждого вида структура поджелудочной железы указывает на оптимальный размер ее внутренних компонентов, эндокринных или экзокринных.Наши данные свидетельствуют о том, что поджелудочная железа человека, по-видимому, «предпочитает» определенные размеры, когда речь идет об островках (таблица 4). С представленностью 67% (3614 островков) являются островки с площадью поверхности от 1000 до 10000 мкм 2 (рис. 3A, C, E, G, I и таблица 4). За этим большинством следуют островки с долей 24% (1305 островков) площадью от 10 000 до 100 000 мкм 2 (рис. 3A, B, D, F-I). Интересно, но не удивительно, что только 9% (493 островка) островков имеют площадь до 1000 мкм 2 (рис.3С). Наконец, менее 1% представлено отдельными скоплениями островков (рис. 3I).

Таблица 4 Классификация панкреатических островков по площади их поверхности. Рисунок 3

Пропорции островков поджелудочной железы человека.

( A ) Группа островков (топ-остров -6356 мкм 2 , нижний Islet-54,291 мкм 2 , левый Islet -6700 мкм 2 ) Входит в категорию 1000-10 000 мкм 2 и 10 000-100 000 мкМ 2 (поле зрения 20x), ( B ) Islet Пример (41,708 мкм 2 ), включенный в категорию 10000 мкм 2 -100 000 мкм 2 (поле View 20x) , ( C ) выборка островков (верхний островок −386 мкм 2 , нижний островок −8814 мкм 2 ), входящих в категорию <1000 мкм 2 и 1000–10000 07 мкм (поле зрения 10000 07 мкм 40X), ( D ) островок (20,368 мкм 2 ) относящийся к категории 10,000–100,000 мкм 2 (поле зрения 20X), ( E ) 0 7 0 0 0 0 2 0 0 2 пример островка включен (6282 в категории 1000–10 000 мкм 2 (поле зрения 40X), ( F ) островковый образец (8805 мкм 2 ) включен в категорию 10 000–100 ,000 мкм 2 (поле зрения 40X), ( G ) группа островков (верхний левый островок −14 930 мкм 2 , нижний островок −136 мкм 2 , нижний правый островок −840902 2 ) в диапазоне от 1000 до 10 000 мкм 2 до 10 000-100 000 мкм 2 (поле зрения 20x), ( H ) Пример острова (29 975 мкм 2 ) входит в категорию 10 000-100 000 мкм 2 (поле зрения 20X), ( I ) процент островков по размеру, ( K ) средняя площадь островков (темно-серый на правой оси) и средний периметр островков (светло-серый на левой оси) по срезам (В1–4).

Формы островков

Форма островков обеспечивает уникальное расположение клеток 9 . Недавние данные свидетельствуют о том, что многие изменения в структуре и функции островков, связанные с диабетом, связаны только с гипергликемией и исчезают при нормализации уровня глюкозы в крови 26 . Таким образом, уникальность этой гетерогенной конформации имеет глубокое функциональное значение. Островки поджелудочной железы имеют различную форму и обычно трудно поддаются определению в этом отношении. В нашем случае рассматривались два основных вопроса: 1) насколько островки Лангерганса близки к идеальной сферической структуре в различных областях поджелудочной железы человека? 2) если панкреатические островки слишком далеки от идеальной сферической структуры, то насколько они неправильны по форме? Что касается первого вопроса, мы разработали индекс сферичности ( I s ) с учетом двух параметров островков (9).Абсолютное значение периметра островка ( P м ), измеренное на двумерных гистологических предметных стеклах, и относительный параметр, а именно средний диаметр островка ( d м ). Однако в качестве первой точки отсчета мы использовали отношение между периметром окружности ( Cp ) и диаметром ( Cd ), а именно π (7). Затем те же шаги были применены для соотношения ( I π ) между средним периметром островка и средним диаметром островка (8).Расстояние от идеальных пропорций было количественно определено через индекс сферичности ( I s ), в данном случае как отношение между π и I π (9). Таким образом, мы грубо измерили, насколько форма островка отличается от идеальной формы круга (и, следовательно, от идеальной сферы). Учитывали средний периметр и диаметр островка для каждого среза (B1–4) поджелудочной железы и оценивали расстояния от идеальных пропорций круга (π) (таблица 5).Так, для островков неправильной формы характерна диспропорция между периметром и диаметром ( I s имеет тенденцию к удалению от 1 к более высоким положительным значениям), а островки круглой формы приближаются к пропорциям периметра и диаметра окружности ( I s больше склоняется к 1). Островки хвоста поджелудочной железы показывают отношение ( I π  = 3,2526) ближе к π, что позволяет предположить, что в среднем островки хвоста поджелудочной железы ближе к идеальной сферической структуре по сравнению с другими участками ( I с  = 1.0353). Этот метод также предполагает, что островки, расположенные в шейке поджелудочной железы, имеют пропорции ( I π  = 3,3268), которые наиболее далеки от идеальных (π) и демонстрируют различные неправильные формы островков ( I s  = 1,0589).

Таблица 5 Оценка сферичности островков.

Скопления островков

Что касается нашего исследования, возможно, одним из самых интересных наблюдений было обнаружение скоплений островков.Распределение островков по площади поверхности, по-видимому, указывает на «пороговый» размер выше 100 000 мкм 2 (рис. 1K, L). Похоже, что более крупные островки, площадь которых превышает 100 000 мкм 2 , обычно представляют собой скопления островков (рис. 4A–D). По нашим наблюдениям, структуры, находящиеся выше этих размеров, представляют собой скопления островков. Двойные слепые морфометрические измерения выявили в общей сложности 11 скоплений островков на всех четырех срезах (рис. 1K, L). Шесть кластеров были обнаружены в срезе головки (B1) поджелудочной железы, три в срезе шеи (B2) и два в срезе хвоста (B3).В срезе тела (Б4) поджелудочной железы отсутствовали кластероподобные островковые структуры (рис. 1Л, М). Более того, эти скопления островков, по-видимому, располагаются на периферии поджелудочной железы. Соответствующий пример кластера островков находится в шейке поджелудочной железы и представлен слайдом B2[P14], где ацинарная ткань и кровеносные сосуды интеркалированы среди групп островков (рис. 4B, D). При ближайшем рассмотрении можно наблюдать границы инкапсуляции между островками, расположенными в кластере (рис. 4Г). Учитывая известную неоднородность этого органа, мы задались вопросом, являются ли эти скопления обычно частью поджелудочной железы здорового человека (у лиц без семейной предрасположенности к СД1 или СД2) или они являются просто особенностью, характерной только для этого конкретного поджелудочная железа.В будущем мы намерены изучить этот орган у других доноров-людей, чтобы увидеть, регулярно ли эти структуры обнаруживаются в поджелудочной железе здорового человека. Кроме того, кластеры островков могут иметь решающее значение для процедур трансплантации островков. Наши данные показывают, что скопления островков состоят из небольших островков, которые плотно собираются вдоль более крупных кровеносных сосудов (рис. 4B, D). Маленькие островки человека менее уязвимы к гипоксии и состоят из большего количества β-клеток с более высоким содержанием инсулина, чем большие островки 27,28 . Хотя тело и хвост поджелудочной железы содержат множество мелких одиночных островков, которые можно легко выделить, при пересадке в воротную вену печени они лишены интимных связей с магистральным кровотоком.С другой стороны, наши данные показывают, что скопления островков чаще появляются в головке и шейке поджелудочной железы (рис. 1K). Таким образом, кластеры островков содержат более крупные кровеносные сосуды, которые могут быть непосредственно связаны микрохирургическими методами с кровотоком пациента (рис. 4B, D). Возможно, их микрохирургическая изоляция также будет проблематичной, учитывая, что эти анатомические структуры могут быть особенно редкими и трудно найти in vivo . Тем не менее, гетерогенность поджелудочной железы, возможно, превосходит только перипанкреатическая жировая ткань, где в этом случае были сделаны другие наблюдения.Внутри поджелудочной железы иммунные реакции отсутствовали. В перипанкреатической жировой ткани эти иммунные ответы были захвачены кровеносными сосудами (рис. 4F). Кроме того, в перипанкреатической жировой ткани наблюдалось множество различных лимфоидных структур (рис. 4Е). Таким образом, представляется, что воспалительный процесс в перипанкреатической ткани может быть постоянным, динамичным и общим процессом, окружающим поджелудочную железу здорового человека. Эти два наблюдения заставляют нас полагать, что перипанкреатическая жировая ткань активно участвует в механизмах инициации как СД1, так и СД2 (в отношении генетической предрасположенности к тому или иному фенотипу).Эти наблюдения заставляют нас задаться вопросом, возможно ли, что иммунный ответ на бета-клетки на самом деле инициируется посредством индукции из перипанкреатической ткани.

Рисунок 4

Скопления островков и существующий воспалительный процесс в перипанкреатической жировой ткани.

( A ) относительное расположение скопления островков на предметном стекле B2 (P14) (шейка поджелудочной железы). На панели также показано относительное расположение шейки поджелудочной железы и полученная на ее основе тепловая карта, которая дополнительно указывает площадь поверхности, занятую островками.( B ) границы скопления островков (черная пунктирная линия) на предметном стекле B2 (P14) (поле зрения 4x), ( C ) окно в нижней части скопления островков (красная пунктирная линия), ( D ) крупный план островков внутри скопления (поле зрения 20x), ( E ) лимфоидная организованная ткань внутри перипанкреатической жировой ткани, взятая из головного среза поджелудочной железы (поле зрения 10x). Красноватое пятно слева представляет собой ошибку обработки. ( F ) Воспалительный процесс, захваченный на кровеносном сосуде, взятом из перипанкреатической жировой ткани хвостового среза поджелудочной железы (поле зрения 20х).Кровеносный сосуд заполнен эритроцитами и воспалительными клетками (нейтрофилами, лимфоцитами, эозинофилами).

Пересмотренное практическое руководство по выделению и оценке островков грызунов | Биологические процедуры онлайн

  • Лангерганс П., Моррисон Х. Вклад в микроскопическую анатомию поджелудочной железы. Bull Inst Hist Med. 1937; 5 (3): 259–97.

    Google ученый

  • Stylianou C, Kelnar C. Внедрение успешного лечения сахарного диабета инсулином.JR Soc Med. 2009;102(7):298–303.

    ПабМед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Volk BW, Arquilla ER. Диабетическая поджелудочная железа. 2-е изд. Plenum Medical Book Company: Нью-Йорк и Лондон; 1985.

    Книга Google ученый

  • Минковски О. Историческое развитие теории диабета поджелудочной железы Оскара Минковски, 1929: введение и перевод Рахмиэля Левина.Сахарный диабет. 1989;38(1):1–6.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Рамирес-Домингес М. Исторические предпосылки изоляции островков поджелудочной железы. Adv Exp Med Biol. 2016; 938:1–9.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Ховард Дж. М., Хесс В. История поджелудочной железы: Тайны скрытого органа. Бостон. Массачусетс: Спрингер; 2002.

    Книга Google ученый

  • Бенсли Р.Исследования поджелудочной железы морской свинки. Ам Дж Анат. 1911; 12 (3): 297–387.

    Артикул Google ученый

  • Hellerstroem C. МЕТОД МИКРОДСЕКЦИИ ИНТАКТНЫХ ОСТРОВКОВ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ КРЕАТЫ МЛЕКОПИТАЮЩИХ. Акта Эндокринол (Копенг). 1964; 45: 122–32.

    КАС Статья Google ученый

  • Москалевский С. ВЫДЕЛЕНИЕ И КУЛЬТИВИРОВАНИЕ ОСТРОВКОВ ЛАНГЕРГАНСА МОРСКОЙ СВИНКИ.Джен Комп Эндокринол. 1965; 5: 342–53.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Лейси П.Е., Костяновский М. Способ выделения интактных островков Лангерганса из поджелудочной железы крысы. Сахарный диабет. 1967; 16 (1): 35–9.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Линдалл А., Стеффес М., Соренсон Р. Иммуноанализируемое содержание инсулина в субклеточных фракциях островков крыс.Эндокринология. 1969; 85 (2): 218–23.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Гото М., Маки Т., Киёидзуми Т., Сатоми С., Монако А.П. Усовершенствованный метод выделения островков поджелудочной железы мышей. Трансплантация. 1985;40(4):437-8.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Картер Д.Д., Дула С.Б., Корбин К.Л., Ву Р., Нунемейкер К.С. Практическое руководство по изоляции и оценке островков грызунов.Биол Проведено онлайн. 2009; 11:3–31.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Андрадес П., Асьеду С., Рэй П., Родригес С., Гудвин Дж., Маккарн Дж., Томас Дж.М. Выход островков после различных способов доставки либеразы поджелудочной железы. Пересадка Proc. 2007;39(1):183–4.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Брандхорст Х., Раемш-Гюнтер Н., Раемш К., Фридрих О., Курфюрст М., Корсгрен О., Брандхорст Д.Деградированная коллагеназа ухудшает жизнеспособность островков. Пересадка Proc. 2008;40(2):370–1.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Stull ND, Breite A, McCarthy R, Tersey SA, Mirmira RG. Выделение мышиных островков Лангерганса с использованием комбинации очищенной коллагеназы и нейтральной протеазы. J Vis Exp. 2012;67. https://doi.org/10.3791/4137.

  • О’Дауд Дж.Ф. Выделение и очистка островков Лангерганса поджелудочной железы грызунов.Методы Mol Biol Clifton NJ. 2009; 560:37–42.

    Артикул КАС Google ученый

  • Hara Y, Taniguchi H, Ishihara K, Ejiri K, Tsutou A, Narutaki K, Baba S. Сложный метод сетчатой ​​фильтрации для крупномасштабной изоляции островков и их функции. Diabetes Res Clin Pract. 1989;6(2):103–8.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Мита А., Рикорди С., Мессингер С., Мики А., Мисава Р., Баркер С., Молано Р.Д., Харттер Р., Хан А., Миягава С., Пилегги А., Инверарди Л., Алехандро Р., Херинг Б.Дж., Ичии Х.Противовоспалительное действие очистки градиента плотности на основе йодиксанола (OptiPrep) на препараты островков человека. Трансплантация клеток. 2010;19(12):1537–46.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Zongyi Y, Funian Z, Hao L, Ying C, Jialin Z, Baifeng L. Быстрое, эффективное и экономичное устройство и метод для выделения и очистки островковых клеток мыши. PloS Один. 2017;12(2):e0171618.

    ПабМед ПабМед Центральный Статья КАС Google ученый

  • Сальваладжио ПРО, Дэн С., Ариян К.Э., Милле И., Завалич В.С., Басадонна Г.П., Ротштейн Д.М.Фильтрация островков: простая и быстрая новая процедура очистки, позволяющая избежать фиколла и улучшить массу и функцию островков. Трансплантация. 2002;74(6):877–9.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Ramírez-Domínguez M, Castaño L. Фильтрация — это эффективный по времени вариант Histopaque, обеспечивающий выделение островков хорошего качества при выделении островков мыши. Цитотехнология. 2015;67(2):199–206.

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Чан К-М, Райквар С.П., Завазава Н.Стратегии дифференцировки эмбриональных стволовых клеток (ЭСК) в клетки, продуцирующие инсулин, и разработка неинвазивных методов визуализации с использованием биолюминесценции. Иммунол Рез. 2007;39(1–3):261–70.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Лян Дж., Нг К.И., Ченг К., Ся И., Ван К.С., Люн П.С. Совместное культивирование стромальных клеток печени плода человека усиливает дифференцировку клеток-предшественников поджелудочной железы в кластеры островковых клеток.Stem Cell Rev Rep. 2014;10(2):280–94.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Kieffer TJ, Woltjen K, Osafune K, Yabe D, Inagaki N. Стратегии замещения бета-клеток при диабете. J Исследование диабета. 2017. https://doi.org/10.1111/jdi.12758.

  • Лебретон Ф., Лавальяр В., Беллофатто К., Боннет Р., Вассмер К.Х., Перес Л., Каландадзе В., Фолленци А., Бульвен М., Керр-Конте Дж., Гудман Д.Дж., Боско Д., Берни Т., Беришвили Э.Инсулинпродуцирующие органоиды, созданные из островковых и амниотических эпителиальных клеток для лечения диабета. Нац коммун. 2019;10(1):4491.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Petersson B. Выделение и характеристика различных типов островковых клеток поджелудочной железы у морских свинок. Акта Эндокринол (Копе). 1966; 53 (3): 480–8.

    КАС Статья Google ученый

  • Ballinger WF, Lacy PE.Трансплантация интактных островков поджелудочной железы крысам. Операция. 1972;72(2):175–86.

    КАС пабмед Google ученый

  • Змуда Э.Дж., Пауэлл К.А., Хай Т. Метод выделения мышиных островков и субкапсулярной трансплантации почки. J Vis Exp. 2011;50. https://doi.org/10.3791/2096.

  • Neuman JC, Truchan NA, Joseph JW, Kimple ME. Способ выделения островков поджелудочной железы мыши и определения внутриклеточного цАМФ.J Vis Exp. 2014;88:e50374.

    Google ученый

  • Миток К.А., Фрейбергер Э.К., Шулер К.Л., Рабалья М.Е., Стэплтон Д.С., Квисиен Н.В., Малек П.А., Хеберт А.С., Броман А.Т., Кеннеди Р.Т., Келлер М.П., ​​Кун Дж.Дж., Атти А.Д. Протеомика островков выявляет генетические вариации в продукции дофамина, приводящие к изменению секреции инсулина. Дж. Биол. Хим. 2018;293(16):5860–77.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Хани Х, Ибрагим ТАТ, Осман А.М., Лила М-А.М., бт Аллаудин З.Н.Выделение, очистка по плотности и поддержание культур in vitro функциональных островков Лангерганса коз в качестве альтернативного источника островков для изучения диабета. Ксенотрансплантация. 2010;17(6):469–80.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Зини Э., Осто М., Франкини М., Гушетти Ф., Донат М.Ю., Перрен А., Хеллер Р.С., Линшайд П., Боуман М., Акерманн М., Лутц Т.А., Ройш К.Э. Гипергликемия, но не гиперлипидемия, вызывает дисфункцию бета-клеток и потерю бета-клеток у домашней кошки.Диабетология. 2009;52(2):336–46.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Баламуруган А.Н., Рамакришна Б., Гунасекаран С. Инсулиносекреторные характеристики островков поджелудочной железы обезьян: простой метод выделения островков и влияние различных градиентов плотности на разделение. Diabetes Res Clin Pract. 2004;66(1):13–21.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Андрадес П., Асиеду К.К., Гансувд Б., Инуса С., Гудвин К.Дж., Декард Л.А., Джаргал У., Томас Дж.М.Переменные изоляции островков поджелудочной железы у нечеловеческих приматов (макаки-резусы). Диабетология. 2008;51(7):1236–44.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Lorenz D, Reding R, Petermann J, Beckert R, Worm V, Tietz W, Rosenbaum KD, Lippert H, Dorn A, Koch G. Трансплантация изолированных островков Лангерганса в печень собак с диабетом (авторский перевод) . Центральный Чир. 1976; 101 (22): 1359–68.

    КАС пабмед Google ученый

  • Розенберг Л., Ван Р., Параскевас С., Майзингер Д.Структурные и функциональные изменения, возникающие в результате изоляции островков, приводят к гибели островковых клеток. Операция. 1999;126(2):393–8.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Салиба Ю., Фарес Н. Выделение, очистка и культивирование островков Лангерганса поджелудочной железы мышей. Методы Mol Biol Clifton NJ. 2019; 1940: 255–65.

    КАС Статья Google ученый

  • Гото М., Озато Х., Портер Дж., Маки Т., Монако А.П.Решающая роль инъекции коллагеназы в протоки поджелудочной железы для изоляции островков поджелудочной железы. Horm Metab Res Suppl Ser. 1990; 25:10–6.

    КАС Google ученый

  • Шапиро А.М., Хао Э., Райотт Р.В., Кнетеман Н.М. Высокий выход островков грызунов с внутрипротоковой коллагеназой и стационарным пищеварением — сравнение со стандартной методикой. Трансплантация клеток. 1996;5(6):631–638.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Ли Д-С, Юань Ю-Х, Ту Х-Дж, Лян К-Л, Дай Л-Дж.Протокол выделения островков из поджелудочной железы мыши. Нат Проток. 2009;4(11):1649–52.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Bertera S, Balamurugan AN, Bottino R, He J, Trucco M. Увеличение выхода и улучшение результатов трансплантации островков мышей с помощью бычьего сывороточного альбумина. J Трансплантат. 2012;2012:856386.

    ПабМед ПабМед Центральный Статья КАС Google ученый

  • Атанес П., Руз-Мальдонадо И., Оланиру О.Э., Персо С.Дж.Оценка функции островков мыши. Методы Mol Biol Clifton NJ. 2020;2128:241–68.

    КАС Статья Google ученый

  • Савада Т., Мацумото И., Накано М., Кирххоф Н., Сазерленд DER, Херинг Б.Дж. Улучшение выхода и функции островков при протоковой инъекции раствора Университета Висконсина перед сохранением поджелудочной железы. Трансплантация. 2003; 75 (12): 1965–9.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Симода М., Ито Т., Сугимото К., Ивахаши С., Такита М., Чуджо Д., Сорелле Дж.А., Назируддин Б., Леви М.Ф., Грейберн П.А., Мацумото С.Улучшение распределения коллагеназы с сохранением протоков для выделения островков человека. Островки. 2012;4(2):130–7.

    ПабМед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Гото М., Маки Т., Сатоми С., Портер Дж., Боннер-Вейр С., О’Хара С.Дж., Монако AP. Воспроизводимый высокий выход крысиных островков путем стационарного переваривания in vitro после инъекции коллагеназы в протоки поджелудочной железы или портальной вены. Трансплантация. 1987;43(5):725–30.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Сот Г.Л., Кудриа П., Блюстоун Дж.А. Выделение островков поджелудочной железы мышей. J Vis Exp. 2007; 7:255.

    Google ученый

  • Do OH, Low JT, Thorn P. Lepr (db) мышиная модель диабета 2 типа: выделение островков поджелудочной железы и 2-фотонная визуализация интактных островков живыми клетками. J Vis Exp. 2015;99:e52632.

    Google ученый

  • Вильярреал Д., Прадхан Г., Ву К.С., Оллред К.Д., Го С., Сунь Ю.Простой высокоэффективный протокол изоляции островков поджелудочной железы от мышей. J Vis Exp. 2019;150. https://doi.org/10.3791/57048.

  • Дженнисон М.В. Бактериальная коллагеназа. J Бактериол. 1945; 50 (3): 369–70.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Харпер Э. Коллагеназы. Анну Рев Биохим. 1980; 49: 1063–78.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Гросс Дж., Лапьер К.М.Коллагенолитическая активность в тканях амфибий: анализ культуры тканей. Proc Natl Acad Sci U S A. 1962; 48:1014–22.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Вудс Дж. Ф., Николс Г. Распределение коллагеназы в тканях крыс. Природа. 1965; 208 (5017): 1325–6.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Мандл И., Макленнан Д.Д., Хоус Э.Л.Выделение и характеристика протеиназы и коллагеназы из Cl. гистолитикум. Джей Клин Инвест. 1953; 32 (12): 1323–9.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Bond MD, Van Wart HE. Характеристика отдельных коллагеназ из Clostridium histolyticum. Биохимия. 1984;23(13):3085–91.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Bond MD, Van Wart HE.Связь между отдельными коллагеназами Clostridium histolyticum: свидетельство эволюции путем дупликации генов. Биохимия. 1984; 23(13):3092–9.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Грант Н.Х., Олберн Х.Е. Исследования коллагеназ Clostridium histolyticum. Арх Биохим Биофиз. 1959;82(2):245–55.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Йошида Э., Нода Х.Выделение и характеристика коллагеназ I и II из Clostridium histolyticum. Биохим Биофиз Акта. 1965; 105 (3): 562–74.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Коно Т. Очистка и частичная характеристика коллагенолитических ферментов из Clostridium histolyticum. Биохимия. 1968; 7 (3): 1106–14.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Харпер Э., Канг А.Х.Изучение специфичности бактериальной коллагеназы. Biochem Biophys Res Commun. 1970; 41 (2): 482–7.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Lwebuga-Mukasa JS, Harper E, Taylor P. Ферменты коллагеназы из Clostridium: характеристика отдельных ферментов. Биохимия. 1976; 15 (21): 4736–41.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Фудзио А., Мураяма К., Ямагата Ю., Ватанабэ К., Имура Т., Инагаки А., Обаяси Н., Сима Х., Секигучи С., Фухимори К., Игараши К., Охучи Н., Сатоми С., Гото М.Коллагеназа H имеет решающее значение для выделения островков поджелудочной железы крыс. Трансплантация клеток. 2014;23(10):1187–98.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Мацусита О., Юнг К.М., Катаяма С., Минами Дж., Такахаши Ю., Окабе А. Дупликация генов и множественность коллагеназ в Clostridium histolyticum. J Бактериол. 1999;181(3):923–33.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Вольтерс Г.Х., Вос-Шеперкейтер Г.Х., ван Дейнен Дж.Х., ван Шильфгарде Р.Анализ роли коллагеназы и протеазы в ферментативной диссоциации поджелудочной железы крысы для выделения островков. Диабетология. 1992;35(8):735–42.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Wolters GH, Vos-Scheperkeuter GH, Lin HC, van Schilfgaarde R. Различные роли коллагеназы Clostridium histolyticum класса I и класса II в изоляции островков поджелудочной железы крыс. Сахарный диабет. 1995;44(2):227–33.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • де Хаан Б.Дж., Фаас М.М., Спийкер Х., ван Виллиген Д.В., де Хаан А., де Вос П.Факторы, влияющие на изоляцию функциональных островков поджелудочной железы крыс. Поджелудочная железа. 2004;29(1):e15–22.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Брандхорст Х., Фриберг А., Андерссон Х.Х., Феллдин М., Фосс А., Салмела К., Лундгрен Т., Тибелл А., Тафвесон Г., Корсгрен О., Брандхорст Д. Важность триптоподобной активности в очищенных ферментных смесях для эффективного островковая изоляция. Трансплантация. 2009;87(3):370–5.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Брандхорст Д., Хюттлер С., Альт А., Раемш-Гюнтер Н., Курфюрст М., Бретцель Р.Г., Брандхорст Х.Регулировка соотношения между коллагеназами класса II и I улучшает результат изоляции островков. Пересадка Proc. 2005;37(8):3450–1.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Яр Х., Пфайффер Г., Херинг Б.Дж., Федерлин К., Бретцель Р.Г. Опосредованная эндотоксинами активация продукции цитокинов в РВМС человека коллагеназой и фиколлом. J Mol Med Berl Ger. 1999;77(1):118–20.

    КАС Статья Google ученый

  • Кабальеро-Корбалан Дж., Фриберг А.С., Брандхорст Х., Нильссон Б., Андерссон Х.Х., Феллдин М., Фосс А., Салмела К., Тибелл А., Туфвесон Г., Корсгрен О., Брандхорст Д.Vitacyte коллагеназа HA: новая смесь ферментов для эффективного выделения островков человека. Трансплантация. 2009;88(12):1400–2.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Брандхорст Д., Брандхорст Х., Джонсон PRV. Разработка ферментов для изоляции островков человека: пять десятилетий прогресса или стагнация? Преподобный Диабет Стад. 2017;14(1):22–38.

    ПабМед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Ци М., Валиенте Л., Макфадден Б., Омори К., Бильбао С., Хуан Дж., Роусон Дж., Скотт С., Феррери К., Маллен И., Эль-Шахави М., Дефо Д., Кандил Ф., Аль-Абдулла И.Х.Выбор фермента для пищеварения поджелудочной железы человека является критическим фактором для повышения успеха изоляции островков. Прямая трансплантация. 2015;1(4). https://doi.org/10.1097/TXD.0000000000000522.

  • Berney T, Molano RD, Cattan P, Pileggi A, Vizzardelli C, Oliver R, Ricordi C, Inverardi L. Эндотоксин-опосредованная отсроченная функция островкового трансплантата связана с повышенной продукцией внутриостровковых цитокинов и апоптозом островковых клеток. Трансплантация. 2001;71(1):125–32.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Варгас Ф., Вивес-Пи М., Сомоса Н., Арменгол П., Алькальд Л., Марти М., Коста М., Серраделл Л., Домингес О., Фернандес-Лламасарес Х., Джулиан Х.Ф., Санмарти А., Пухоль-Боррель Р.Загрязнение эндотоксином может быть причиной необъяснимой неудачи трансплантации островков поджелудочной железы человека. Трансплантация. 1998;65(5):722–7.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Кесслер Л., Джессер С., Белкорт А., Пингет М. Влияние загрязнения ацинарной ткани на инкапсулированные островки поджелудочной железы: морфологические и функциональные исследования. Трансплантация. 1997;63(10):1537–40.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • McCall MD, Maciver AH, Pawlick R, Edgar R, Shapiro AMJ.Histopaque обеспечивает оптимальную кинетику очистки островков мыши: сравнительное исследование с фиколлом, йодиксанолом и декстраном. Островки. 2011;3(4):144–9.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Bock T, Pakkenberg B, Buschard K. Генетический фон определяет размер и структуру эндокринной части поджелудочной железы. Сахарный диабет. 2005;54(1):133–7.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Бок Т., Паккенберг Б., Бушард К.Увеличение объема островков, но неизменное количество островков у мышей ob/ob. Сахарный диабет. 2003;52(7):1716–22.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Инува И.М., Эль Марди А.С. Корреляция между объемной долей и объемно-взвешенным средним объемом, а также между общим числом и общей массой островков у крыс после отъема и у молодых крыс Вистар. Дж Анат. 2005;206(2):185–92.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Лифсон Н., Ласса К.В., Диксит П.К.Связь между кровотоком и морфологией островкового органа поджелудочной железы крысы. Am J Physiol. 1985; 249 (1 часть 1): E43–8.

    КАС пабмед Google ученый

  • Хеллман Б. Численное распределение островков Лангерганса в разном возрасте крыс. Акта Эндокринол (Копенг). 1959; 32: 63–77.

    КАС Статья Google ученый

  • де Гроот М., де Хаан Б.Дж., Кейзер П.П.М., Шурс Т.А., ван Шильфгарде Р., Леувенинк ХГД.Выход и функция изолированных островков крысы зависят от штамма донора. Лаборатория Аним. 2004;38(2):200–6.

    ПабМед Статья Google ученый

  • Доленшек Дж., Рупник М.С., Стожер А. Структурные сходства и различия между поджелудочной железой человека и мыши. Островки. 2015;7(1):e1024405.

    ПабМед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Street CN, Lakey JR, Shapiro AM, Imes S, Rajotte RV, Ryan EA, Lyon JG, Kin T, Avila J, Tsujimura T, Korbutt GS.Оценка островкового трансплантата в Эдмонтонском протоколе: значение для прогнозирования долгосрочного клинического результата. Сахарный диабет. 2004;53(12):3107–14.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Хуанг Х-Х, Харрингтон С., Стехно-Биттел Л. Недостатки и будущее измерений объема островков. Трансплантация клеток. 2018;27(7):1017–26.

    ПабМед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Андерссон А.Изолированные островки поджелудочной железы мыши в культуре: влияние сыворотки и различных культуральных сред на выработку инсулина островками. Диабетология. 1978;14(6):397–404.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Ефанова И.Б., Зайцев С.В., Животовский Б., Колер М., Эфендик С., Оррениус С., Берггрен П.О. Глюкоза и толбутамид вызывают апоптоз в бета-клетках поджелудочной железы. Процесс, зависящий от внутриклеточной концентрации Ca2+.Дж. Биол. Хим. 1998;273(50):33501–7.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Robertson RP, Harmon J, Tran PO, Tanaka Y, Takahashi H. Токсичность глюкозы в -клетках: диабет 2 типа, хорошие радикалы стали плохими и связь с глутатионом. Сахарный диабет. 2003;52(3):581–7.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Эбрахими А.Г., Холлистер-Лок Дж., Салливан Б.А., Цучида Р., Боннер-Вейр С., Вейр Г.К.Изменения идентичности бета-клеток при легкой гипергликемии: последствия для функции, роста и уязвимости. Мол метаб. 2020;35:100959.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Холмс М.А., Клейтон Х.А., Чедвик Д.Р., Белл П.Р., Лондон, Нью-Джерси, Джеймс РФ. Функциональные исследования островков поджелудочной железы крыс, свиней и человека, культивируемых в десяти коммерчески доступных средах. Трансплантация. 1995;60(8):854–60.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Габер АО, Фрага Д.Достижения в долгосрочной островной культуре: опыт Мемфиса. Клеточная биохимия Биофиз. 2004; 40 (3 Приложение): 49–54.

    ПабМед Google ученый

  • Gilon P, Jonas JC, Henquin JC. Продолжительность и условия культивирования влияют на колебания концентрации цитоплазматического кальция, индуцированные глюкозой, в островках поджелудочной железы мышей. Диабетология. 1994;37(10):1007–14.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Benninger RKP, Head WS, Zhang M, Satin LS, поршень DW.Щелевые контакты и другие механизмы межклеточной коммуникации регулируют базальную секрецию инсулина в панкреатических островках. Дж. Физиол. 2011; 589 (часть 22): 5453–66.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Лоппини А., Педерсен М.Г. Щелевое соединение может продлить период всплеска бета-клеток на порядок за счет фантомного всплеска. Хаос Вудбери Н. 2018;28(6):063111.

    Артикул Google ученый

  • Benninger RKP, Hutchens T, Head WS, McCaughey MJ, Zhang M, Le Marchand SJ, Satin LS, Piston DW.Внутренняя неоднородность островков и связь щелевых контактов определяют пространственно-временную динамику волны Ca 2+ . Биофиз Дж. 2014;107(11):2723–33.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Родригес-Диас Р., Молано Р.Д., Вайц Дж.Р., Абдулреда М.Х., Берман Д.М., Лейбигер Б., Лейбигер И.Б., Кеньон Н.С., Рикорди С., Пиледжи А., Кайседо А., Берггрен П.О. Паракринные взаимодействия в панкреатических островках определяют контрольную точку гликемии.Клеточный метаб. 2018;27(3):549–558.e4.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Аррохо Э., Дриго Р., Джейкоб С., Гарсия-Прието С.Ф., Чжэн Х, Фукуда М., Нху ХТТ, Стельмашенко О., Песанья Ф.Л.М., Родригес-Диас Р., Бушонг Э., Диринк Т., Фан С., Али Ю., Лейбигер И., Чуа М., Будье Т., Сонг С.Х., Граф М., Августин Г.Дж., Эллисман М.Х., Берггрен П.О. Структурные основы паракринной регуляции дельта-клеток островков поджелудочной железы.Нац коммун. 2019;10(1):3700.

    Артикул КАС Google ученый

  • Scarl RT, Corbin KL, Vann NW, Smith HM, Satin LS, Sherman A, Nunemaker CS. Интактные островки поджелудочной железы и диспергированные бета-клетки генерируют внутриклеточные колебания кальция, но различаются по своей реакции на глюкозу. Клеточный кальций. 2019;83:102081.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Scarl RT, Koch, WJ, Corbin, KL, Nunemaker CS.Выделение и оценка панкреатических островков по сравнению с рассеянными бета-клетками: простой подход к изучению межклеточной коммуникации. В: Межклеточная связь: методы и протоколы. 2-е изд. Методы Мол Биол. 2020 г. https://doi.org/10.1007/7651_2020_338. Онлайн перед печатью. PMID: 33319334

  • Cui Y-F, Ma M, Wang G-Y, Han D-E, Vollmar B, Menger MD. Предотвращение повреждения клеток ядра в изолированных островках Лангерганса путем низкотемпературного предварительного кондиционирования. Мир J Гастроэнтерол.2005;11(4):545–50.

    ПабМед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Yasunami Y, Lacy PE, Davie JM, Finke EH. Продление выживания ксенотрансплантата островков (от крысы к мыши) с помощью культивирования in vitro при 37°С. Трансплантация. 1983;35(4):281–4.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Барнетт М.Дж., МакГи-Уилсон Д., Шапиро А.М.Дж., Лейки Дж.Р.Т. Различия в жизнеспособности островков человека на основе различных окрасок целостности мембран.Трансплантация клеток. 2004;13(5):481–8.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Vermes I, Haanen C, Steffens-Nakken H, Reutelingsperger C. Новый анализ апоптоза. Проточно-цитометрическое определение экспрессии фосфатидилсерина на ранних апоптотических клетках с использованием меченого флуоресцеином аннексина V. J Immunol Methods. 1995;184(1):39–51.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Миямото М., Моримото Ю., Нодзава Ю., Баламуруган А.Н., Сюй Б., Иноуэ К.Создание анализа диацетата флуоресцеина и бромистого этидия (FDAEB) для оценки качества изолированных островков. Трансплантация клеток. 2000;9(5):681–6.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Юрларо Р., Муньос-Пинедо С. Гибель клеток, вызванная стрессом эндоплазматического ретикулума. FEBS J. 2016;283(14):2640–52.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Барбу А., Уэлш Н., Салдин Дж.Цитокин-индуцированному апоптозу и некрозу предшествует нарушение потенциала митохондриальной мембраны (Deltapsi(m)) в RINm5F-клетках поджелудочной железы: предотвращение с помощью Bcl-2. Мол Селл Эндокринол. 2002; 190(1–2):75–82.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Хьюз К.Дж., Чемберс К.Т., Мирс Г.П., Корбетт Д.А. Оксиды азота опосредуют переход от раннего некроза к позднему апоптозу в бета-клетках, обработанных цитокинами, что связано с необратимым повреждением ДНК.Am J Physiol Metab. 2009; 297(5):E1187–96.

    КАС Google ученый

  • Дула С.Б., Джекменика М., Ву Р., Джаханшахи П., Веррилли Г.М., Картер Д.Д., Брайман К.Л., Нунемейкер С.С. Доказательства того, что слабовыраженное системное воспаление может вызывать дисфункцию островков, что измеряется нарушением обработки кальция. Клеточный кальций. 2010;48(2–3):133–42.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • О’Нил К.М., Лу С., Корбин К.Л., Шарма П.Р., Дула С.Б., Картер Д.Д., Рамадан Д.В., Синь В., Ли Д.К., Нунемейкер К.С.Циркулирующие уровни IL-1B+IL-6 вызывают стресс и дисфункцию ER в островках самцов мышей с преддиабетом. Эндокринология. 2013;154(9):3077–88.

    ПабМед ПабМед Центральный Статья КАС Google ученый

  • Гелин Л., Ли Дж., Корбин К.Л., Джахан И., Нунемейкер С.С. Метформин ингибирует секрецию инсулина островками мышей и изменяет внутриклеточный кальций в зависимости от концентрации и продолжительности действия вблизи циркулирующего диапазона.J Diabetes Res 2018; 2018: 52.

  • Эйзирик Д.Л., Паскуали Л., Кноп М. Бета-клетки поджелудочной железы при сахарном диабете 1 и 2 типа: разные пути к отказу. Нат Рев Эндокринол. 2020;16(7):349–62.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Инглиш А, Ирвин Н. Неклассические пептиды островков: панкреатическое и внепанкреатическое действие. Clin Med Insights Endocrinol Diab. 2019;12:1179551419888871.

    Google ученый

  • Нолан А.Л., О’Дауд Дж.Ф.Измерение секреции инсулина изолированными островками Лангерганса у грызунов. Методы Mol Biol Clifton NJ. 2009; 560:43–51.

    КАС Статья Google ученый

  • Truchan NA, Brar HK, Gallagher SJ, Neuman JC, Kimple ME. Анализ микропланшета с одним островком для измерения секреции инсулина островками мыши и человека. Островки. 2015;7(3):e1076607.

    ПабМед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Слепченко К.Г., Корбин К.Л., Нунемакер К.С.Сравнение методов нормализации секреции инсулина показывает, что этот процесс может и не понадобиться. Дж. Эндокринол. 2019. https://doi.org/10.1530/JOE-18-0542.

  • Rutter GA, Hodson DJ, Chabosseau P, Haythorne E, Pullen TJ, Leclerc I. Локальный и региональный контроль динамики кальция в островке поджелудочной железы. Сахарный диабет Ожирение Metab. 2017; 19 (Прил. 1): 30–41.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Такахаши А., Камачо П., Лехлейтер Д.Д., Герман Б.Измерение внутриклеточного кальция. Physiol Rev. 1999;79(4):1089–125.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Паредес Р.М., Эцлер Дж.К., Уоттс Л.Т., Чжэн В., Лехляйтер Д.Д. Химические индикаторы кальция. Методы Сан-Диего, Калифорния, 2008;46(3):143–51.

    КАС Статья Google ученый

  • Demaurex N, Frieden M. Измерение концентрации свободного люминального ER Ca(2+) с помощью целевых флуоресцентных белков «cameleon».Клеточный кальций. 2003;34(2):109–19.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Чжоу Ю, Ван Ю, Гилл Д.Л. Оценка молекулярной природы интерфейса связывания STIM1/Orai1 с использованием подходов FRET. В: Козак Дж. А., Путни Дж. В., редакторы. Каналы входа кальция в невозбудимых клетках. Бока-Ратон (Флорида): CRC Press/Taylor & Francis; 2018. Доступно по адресу: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK531425/. По состоянию на 16 июля 2020 г.

    Google ученый

  • Рамадан Дж.В., Штайнер С.Р., О’Нил К.М., Нунемейкер К.С.Центральная роль кальция в влиянии цитокинов на функцию бета-клеток: значение для диабета 1 и 2 типа. Клеточный кальций. 2011;50(6):481–90.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Gilon P, Chae HY, Rutter GA, Ravier MA. Передача сигналов кальция в бета-клетках поджелудочной железы в норме и при диабете 2 типа. Клеточный кальций. 2014.

  • Идевалл-Хагрен О., Тенгхольм А. Метаболическая регуляция передачи сигналов кальция в бета-клетках.Semin Cell Dev Biol. 2020;103:20–30.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Корбин К.Л., Холл Т.Е., Хайле Р., Нунемейкер С.С. Новый подход к флуоресцентной визуализации для сравнительных измерений функции островков поджелудочной железы in vitro. Островки. 2011;3(1):14–20.

    ПабМед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Куреши FM, Дежене Э.А., Корбин К.Л., Нунемейкер С.С.Вызванные стрессом диссоциации между внутриклеточной передачей сигналов кальция и секрецией инсулина в островках поджелудочной железы. Клеточный кальций. 2015;57(5–6):366–75.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Henquin JC, Bozem M, Schmeer W, Nenquin M. Различные механизмы для двух систем усиления высвобождения инсулина. Биохим Дж. 1987;246(2):393–9.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Аммала С., Эшкрофт Ф.М., Рорсман П.Независимая от кальция потенциация высвобождения инсулина циклическим АМФ в одиночных бета-клетках. Природа. 1993;363(6427):356–8.

    КАС пабмед Статья Google ученый

  • Калват Массачусетс, Кобб М.Х. Механизмы амплифицирующего пути секреции инсулина в бета-клетке. Фармакол Тер. 2017; 179:17–30.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Статья Google ученый

  • Трансплантация островковых клеток | Калифорнийский университет в Лос-Анджелесе, здоровье

    UCLA — одна из немногих программ в мире, предлагающих трансплантацию аутологичных (ауто) островковых клеток.Эта новаторская процедура может вернуть пациентов к жизни без болей при хроническом панкреатите или инсулиновой зависимости.

    Трансплантация островковых клеток

    позволяет вылечить панкреатит с меньшим риском развития диабета после операции. С помощью трансплантации островковых клеток мы удаляем поджелудочную железу, но вы сохраняете островковые клетки, вырабатывающие инсулин. Поскольку вы сохраняете свои собственные островковые клетки, аутотрансплантация островков не имеет риска отторжения.


    Почему стоит выбрать UCLA Health для трансплантации островковых клеток?

    Наша программа входит в число примерно 20 программ в США.S. предложить трансплантацию аутоостровковых клеток. UCLA Health предлагает:

    • Обезболивание с меньшим риском диабета: Панкреатэктомия (операция по удалению поджелудочной железы) облегчает сильную боль при хроническом панкреатите. Пересадив островки поджелудочной железы обратно в свое тело, вы можете продолжать вырабатывать инсулин. Трансплантация снижает риск развития сахарного диабета.
    • Комплексный подход: Панкреатит — это хроническое болезненное состояние.Мы понимаем, что многие люди справляются с сильной болью, возможно, в течение многих лет. Наша команда поможет вам справиться как с вашей болью, так и с лекарствами, используемыми для ее лечения.

    Что такое островки?

    Островки Лангерганса представляют собой небольшие скопления клеток в поджелудочной железе. Островковые клетки вырабатывают инсулин, гормон, который помогает регулировать уровень сахара в крови. Эти клетки также производят ферменты, помогающие вашему организму переваривать пищу.


    Что такое аутотрансплантация островковых клеток?

    Трансплантация островковых клеток может быть вариантом, если вам нужна панкреатэктомия.Панкреатэктомия обычно удаляет панкреатические островки. Но без островковых клеток вы не можете производить инсулин. В результате у вас развивается диабет 1 типа.

    Мы проводим трансплантацию аутологичных островков. Аутологичная трансплантация означает, что мы возвращаем вам ваши собственные островковые клетки.

    После трансплантации островковых клеток ваше тело может продолжать вырабатывать инсулин. Панкреатэктомия облегчает боль при хроническом панкреатите путем удаления всей или части поджелудочной железы. Трансплантация островковых клеток сводит к минимуму или устраняет риск развития диабета после панкреатэктомии.


    Как работает пересадка островковых клеток?

    При трансплантации аутологичных островковых клеток:

    1. Вы проходите предоперационное обследование и выбираете дату операции.
    2. Ваш хирург удаляет поджелудочную железу.
    3. Команда Калифорнийского университета в Лос-Анджелесе собирает островковые клетки из поджелудочной железы и пересаживает ваши собственные островковые клетки в печень, где они постепенно восстанавливают свою функцию. У вас только одна операция.
    4. Вы остаетесь в больнице на неделю или две.Наша команда экспертов по обезболиванию поможет вам отказаться от обезболивающих препаратов при панкреатите, если это необходимо.

    Чего ожидать после трансплантации островковых клеток

    После выписки из больницы вы продолжите последующее наблюдение эндокринолога Калифорнийского университета в Лос-Анджелесе (специалиста по гормонам). Этот врач проведет ваше первоначальное лечение инсулином, пока пересаженные островки «отдыхают» после процедуры. Со временем, когда островки восстановятся и начнут вырабатывать инсулин, вы, надеюсь, сможете прекратить принимать инсулин.

    В отличие от других видов трансплантации после операции вам не нужно принимать иммунодепрессанты. Поскольку островковые клетки являются вашими собственными, риск отторжения отсутствует.


    Предотвращает ли трансплантация островковых клеток диабет?

    После панкреатэктомии у людей уменьшается боль при панкреатите. Но поскольку стандартная панкреатэктомия также удаляет островковые клетки, у людей больше не вырабатывается инсулин. У них развивается так называемый хирургический диабет — диабет, возникший в результате операции.

    Трансплантация островковых клеток

    может предотвратить развитие диабета у некоторых людей после панкреатэктомии. Как правило, трансплантация островковых клеток дает лучшие результаты у людей, у которых панкреатит был в течение более короткого периода времени. Со временем хроническое воспаление поджелудочной железы может повредить островковые клетки, и они перестанут вырабатывать инсулин.

    Наши результаты отражают результаты программ трансплантации островковых клеток по всему миру:

    • Примерно 1 из 3 реципиентов трансплантата островковых клеток в какой-то момент после процедуры не нуждается в инсулине.
    • Еще 1 из 3 реципиентов нуждается в некотором количестве инсулина.
    • Некоторые пациенты не могут вырабатывать достаточное количество инсулина после операции. Они должны принимать типичное количество инсулина.

    Даже у тех, кто нуждается в инсулине после процедуры, боль в конечном итоге значительно уменьшится или исчезнет.


    Кому показана трансплантация островковых клеток?

    Мы предлагаем трансплантацию островковых клеток для взрослых и детей с сильными хроническими болями, вызванными хроническим панкреатитом.Наша группа по пересадке островковых клеток оценивает ваше право на участие в программе. Мы рассмотрим симптомы хронического панкреатита, включая хроническую боль, и оценим ваше общее состояние здоровья. У вас также есть оценка общей хирургии.

    Вам не нужно ставиться в лист ожидания на трансплантацию островковых клеток. Островковые клетки, которые вы получаете, являются вашими собственными, поэтому вам не нужно ждать донора.


    Связаться с нами

    Чтобы записаться на прием в программу трансплантации UCLA, позвоните по телефону 310-206-6889 или свяжитесь с нами, чтобы назначить осмотр.

    Увеличение объема островков, но неизменное количество островков у мышей ob/ob | Диабет

    Для нашего понимания островков поджелудочной железы важно изучить, способны ли новые островки образовываться в интактной поджелудочной железе. Мы разработали новый метод для определения общего числа и среднего объема панкреатических островков и использовали этот метод для изучения увеличения островковой массы у ob/ob мышей ( n = 8), используя ob /+ мышей ( n = 8) в качестве контроля.Общий объем островков был увеличен в 3,6 раза у мышей ob/ob по сравнению с мышами ob /+, тогда как, что важно, общее количество островков не различалось у мышей ob/ob и мышей ob . /+ мышей (3193 ± 160 островков у мышей ob/ob против 3184 ± 142 островков у мышей ob/ob /+, P = 0,97). Коэффициент вариации в распределении островков по объему был одинаковым в двух группах, показывая, что у мышей ob/ob существующие островки увеличивают свой объем в той же пропорции без чистого образования новых островков.Мы предлагаем рассматривать панкреатические островки как анатомически настолько сложные структуры, что неогенез островков не происходит спонтанно в интактной поджелудочной железе. Клетки внутри существующих островков, по-видимому, являются наиболее важными источниками гиперплазии островковых клеток во время увеличения общей массы островков.

    Принципиальным и до сих пор оставшимся без ответа вопросом в понимании патогенеза диабета 2 типа является ограничение образования достаточного количества дополнительных β-клеток для поддержания нормогликемии при повышенной потребности в инсулине; даже у людей со значительной резистентностью к инсулину не развивается диабет, если у них есть соответствующее количество функционирующих β-клеток, что подчеркивает патофизиологическое значение общей массы β-клеток.

    Мышь ob/ob широко изучалась в качестве модели диабета 2 типа (1). Эти мыши страдают ожирением, у них развивается резистентность к инсулину и диабет из-за наследственной неспособности вырабатывать лептин (2), несмотря на заметное увеличение общей массы панкреатических островков. В литературе утверждается, что как гиперплазия островков, так и гипертрофия островков ответственны за увеличение общей массы островков у мышей ob/ob (3,4), но среди немногих исследований, которые действительно рассматривали этот вопрос с применением методов который теоретически мог бы измерить общее количество островков (5,6), на самом деле результаты расходятся.Ранее мы обнаружили линейную корреляцию между общим объемом островков и средним объемом, взвешенным по объему, у крыс (7). масса при физиологическом росте у крыс обусловлена ​​ростом существующих островков без образования новых островков. Поэтому мы разработали метод, основанный на последних стереологических методах, для определения общего количества и среднего объема островков поджелудочной железы, и мы использовали этот метод для исследования увеличения массы островков у мышей ob/ob .Понимание того, способны ли новые островки образовываться в интактной поджелудочной железе, важно для понимания островков как анатомической структуры, и, кроме того, это может быть важно для понимания того, какие клетки в поджелудочной железе важны для расширения всего островка. масса во время физиологических или патологических состояний.

    Используя длину шага 900 мкм в направлении x x ) и 700 мкм в направлении y y ), все первичные срезы каждой поджелудочной железы были систематически исследованы, как показано на рис. Инжир.2. Была применена счетная сетка с 99 точками, 1 из которых обведена кружком. Проходя через все первичные срезы поджелудочной железы, как показано на рис. 2, мы подсчитывали, сколько раз 1 из 99 точек попадала в островок. Островок определяли как скопление клеток с минимум тремя видимыми ядрами, демонстрирующими нормальные характеристики островковых эндокринных клеток (бледная цитоплазма с приблизительно сферическими ядрами). Параллельно подсчитывали, сколько раз обведенная точка попадала в ткань поджелудочной железы (экзокринную ткань поджелудочной железы, протоки, сосуды, островки и т.{3}{\times}{\sum}\mathrm{P}(\mathrm{pan})\]

    , где V(pan) — общий объем поджелудочной железы, a/p(pan) — площадь на точку (в данном случае Δ x × Δ y , поскольку для подсчета точек, хит поджелудочной железы), N sect (pp) — количество срезов между первичными срезами (в данном случае 50 срезов), T sect — толщина среза (5 мкм), ΣP(pan) — общее количество точек, поражающих поджелудочную железу.{3}{\times}{\sum}\mathrm{P}(\mathrm{isl})\]

    , где V(isl) — общий объем островков, a/p(isl) — площадь на точку (в данном случае Δ x × Δ y /99, поскольку для подсчета использовалось 99 точек в сетке точек, попадающих в островки), а ΣP(isl) — общее количество точек, попадающих в островки.

    В другом сеансе отбор проб в первичных секциях был выполнен, как описано выше и изображено на рис.2, но несмещенная счетная рамка (внизу слева на рис. 2) теперь была прикреплена к столу. Правила счетной рамки определяют объекты полностью вне рамки или объекты, которые касаются линий исключения (сплошные линии на рисунке), как находящиеся вне рамки, тогда как объекты, которые полностью находятся внутри рамки или касаются только линий включения (штриховые линии). линии на рисунке) определяются как находящиеся внутри рамки.{{-}}(\mathrm{isl}){=}34.{{-}}(\mathrm{isl})\]

    , где N(isl) — общее количество островков в поджелудочной железе, N sect (pp) — количество секций между первичными секциями, N sect (p-r) — количество секций между первичной секцией и соответствующий опорный участок (в данном случае два), Δ x и Δ y — длины шагов, A(frame) — площадь счетной рамки с поправкой на увеличение (450 736 мкм 2 ), ΣQ (isl) – общее количество островков, подсчитанных в одной поджелудочной железе.

    При исследовании срезов с прикрепленной к столу счетной рамкой мы также подсчитывали количество профилей островков, отобранных в счетных рамках (островки B, C и D на рис. 3). Затем было рассчитано количество профилей островков на площадь поджелудочной железы:

    \[\ mathrm {N} _ {\ mathrm {prf, A}} (\ mathrm {isl, pan}) {=} \ \ frac {\ left (\ \ frac {{\ Delta} x {\ times} {\ Delta} y {\ mathrm {A} (\ mathrm {frame})} {\ times} {\ sum} \ mathrm {N} _ {\ mathrm {prf}} (\ mathrm {isl}) \ \ справа) }{\ влево (\ mathrm {a}/\ mathrm {p} (\ mathrm {pan}) {\ times} {\ sum} \ mathrm {P} (\ mathrm {pan}) \ right)} { =}\ \ frac {1} {450 736 {\ mu} \ mathrm {m} ^ {2}} {\ times} \ \ frac {{\ sum} \ mathrm {N} _ {\ mathrm {prf}} ( \ mathrm {isl})} {{\ sum} \ mathrm {P} (\ mathrm {pan})} \]

    , где N prf,A (isl,pan) — количество профилей островков на площадь поджелудочной железы, ΣN prf (isl) — общее количество профилей островков, подсчитанных в счетных рамках во всех первичных отделах одной поджелудочной железы , а остальные факторы определены в предыдущих параграфах. {2} {\ times} \ \ \ frac {{\ sum} \ mathrm {P} (\ mathrm {isl})} {{\ sum} \ mathrm {N } _ {\ mathrm {prf}} (\ mathrm {isl})} \]

    , где prf (isl) представляет собой среднюю площадь профиля островков, а остальные коэффициенты определены в предыдущих параграфах.

    В некоторых предыдущих исследованиях количество профилей островков на площадь поджелудочной железы рассматривалось как показатель общего количества островков, и параллельно средняя площадь профиля островков рассматривалась как показатель среднего объема островков. Как показано ниже, ни один из этих подходов не может быть подтвержден теоретически. В предыдущей публикации (7) мы показали, что количество профилей островков на площадь поджелудочной железы и среднюю площадь островков можно, используя формулу, первоначально данную Аберкромби (11), выразить как:

    \[\ mathrm {N} _ {\ mathrm {prf, A}} (\ mathrm {isl, pan}) {=} \ \ frac {\ mathrm {N} (\ mathrm {isl}) {\ times} (\ mathrm {h} {+} \ mathrm {T} _ {\ mathrm {секта}})} {\ mathrm {v} (\ mathrm {pan})} \]

    \[\mathrm{a}_{\mathrm{prf}}(\mathrm{isl}){=}\ \\frac{\mathrm{v}_{\mathrm{N}}(\mathrm{isl}) }{(\ mathrm{h}{+}\mathrm{T}_{\mathrm{sect}})}\]

    , где N prf,A (isl,pan) — количество профилей островков на площадь поджелудочной железы, N(isl) — общее количество островков в поджелудочной железе, h — средняя протяженность островков, измеренная перпендикулярно направление среза (средняя высота островка), T sect – толщина среза, V(pan) – общий объем поджелудочной железы, a prf (isl) – средняя площадь профиля островка, v N (isl ) — средний объем островка.

    Уравнение 9 показывает, что количество профилей на площадь поджелудочной железы в одном или нескольких срезах не является надежным отражением изменений общего числа островков, так как оно, помимо общего числа островков, также зависит от объема поджелудочной железы, т.е. средняя высота островков и толщина среза. Как видно из уравнения 10, средняя площадь профиля островков прямо пропорциональна среднему объему островков, но обратно пропорциональна сумме средней высоты островков и толщины среза.Это дисквалифицирует этот параметр как надежный отражатель абсолютного значения или изменений среднего объема островков. Тем не менее, чтобы можно было сравнить выводы, сделанные с использованием теоретически подтвержденного набора стереологических методов, описанных выше, и выводы, которые были бы сделаны, если бы выводы были основаны на измерениях количества профилей на площадь поджелудочной железы и средней площади островков. , мы также измерили последние два параметра в этом исследовании.

    Как и ожидалось, средняя масса тела и средний уровень глюкозы в крови были значительно выше у мышей ob/ob по сравнению с мышами ob /+ (рис.4А и Б), тогда как общий объем поджелудочной железы (рис. 4С) был одинаковым в обеих группах. Общий объем островков (рис. 4D) был в 3,67 раза выше у мышей ob/ob (2,09 ± 0,19 мм 3 у мышей ob/ob против 0,57 ± 0,03 мм 3 у мышей ob /+). мыши, P < 10 -5 ). Как видно из рис. 4E, общее количество островков было поразительно одинаковым в двух группах (3193 ± 160 у мышей ob/ob и 3184 ± 142 у мышей ob/ob /+, P = 0.97), а 95% ДИ варьировал от +468 до -450 островков у мышей ob/ob по сравнению с мышами ob//+. Обычный средний объем островков (рис. 4F) составлял 6,57 ± 0,52 × 10 5 мкм 3 у мышей ob/ob против 1,81 ± 0,12 × 10 5 мкм 3 0 у мышей ob/ob . мыши ( P < 10 -6 ). Таким образом, выраженное увеличение общего объема островков у мышей линии ob/ob было вызвано исключительно гипертрофией островков без участия общего образования новых островков.

    Средневзвешенный объем островков (рис. 4G) составил 2,00 ± 0,25 × 10 7 мкм 3 у мышей ob/ob против 0,52 ± 0,05 × 10 7 мкм 1 /+ мышей ( P < 10 -4 ). Другими словами, взвешенный по объему средний объем островков и средневзвешенный по количеству объем островков были увеличены у мышей ob/ob примерно в один и тот же коэффициент (3.88 для средневзвешенного объема островков и 3,63 для средневзвешенного объема островков). Как следствие (уравнение 6), коэффициент вариации в распределении объемов островков (рис. 4H) был сходным в двух группах (5,39 ± 0,29 у мышей ob/ob против 5,27 ± 0,29 у мышей ob/). /+ мыши, P = 0,76). Это показывает, что не только количество островков не изменилось у мышей ob/ob , но и форма распределения объемов островков, по-видимому, одинакова в двух группах.Таким образом, стереологическое исследование показало, что увеличенный общий объем островков, обнаруженный у мышей ob/ob , был результатом гипертрофии островков без заметного вклада гиперплазии островков, и гипертрофию островков можно было бы объяснить, как если бы теоретически все островки во столько же раз увеличили их объем.

    Количество островков на площадь поджелудочной железы (рис. 5А) составляло 1,52 ± 0,10 мм -1 у мышей ob/ob и 0.82 ± 0,04 мм -1 у мышей ob /+ ( P < 10 -4 ), тогда как средняя площадь островков (рис. 5В) составляла 1,18 ± 0,07 × 10 4 мкм 1 мкм 2 у мышей ob/ob против 0,64 ± 0,04 × 10 4 мкм 2 у мышей ob /+ ( P < 10 -5 ). Если бы число островков на площадь поджелудочной железы и средняя площадь островков интерпретировались как надежные параметры общего числа островков и среднего объема островков, соответственно, то (ошибочный) вывод состоял бы в том, что гиперплазия и гипертрофия островков вносят примерно равный вклад. к увеличению общего объема островков, потому что количество островков на площадь поджелудочной железы и средняя площадь островков увеличились примерно в один и тот же раз (1.85 для числа островков на площадь поджелудочной железы и 1,84 для средней площади островков) у мышей ob/ob по сравнению с мышами ob /+.

    Основываясь на стереологических методах, таких как фракционная выборка и подсчет диссекторов (методы, основанные на принципах современной стереологии, основанной на проверенных математических и статистических принципах), мы обнаружили заметное увеличение общего объема островков у мышей ob/ob . по сравнению с ob /+ мышами, увеличение, которое было полностью вызвано гипертрофией островков, тогда как общее количество островков было одинаковым в двух группах с достаточно узким доверительным интервалом для различия средних значений.

    При определении островка как группы эндокринных клеток, содержащих не менее трех видимых ядер, мы обнаружили, что окрашивание H&E предпочтительнее, поскольку оно позволяет однозначно идентифицировать островки; 2 ) легко воспроизводим, дает одинаковую интенсивность окрашивания на всех срезах; и 3 ) внешний вид островковых клеток при окрашивании H&E одинаков у животных с диабетом и без него.Альтернативой может быть использование иммунохимически окрашенных срезов, то есть использование коктейля первичных антител, направленных против островковых гормонов. По сравнению с окрашиванием гематоксилин-эозином это теоретически позволяет установить определение островка только на одной или нескольких эндокринных клетках. С другой стороны, недостатком иммунохимического окрашивания является то, что β-клетки, наиболее часто встречающийся тип клеток в островках, постепенно дегранулируются по мере прогрессирования диабетического состояния, что делает этот подход чувствительным к, по крайней мере, теоретической возможности того, что единичные или небольшие кластеры β-клеток могли не попасть в пробу в поджелудочной железе мышей ob/ob .Таким образом, хотя как иммунохимическое, так и физико-химическое окрашивание имеют свои преимущества и недостатки, мы посчитали последнее наиболее надежным для методов, применяемых при сравнении лиц с диабетом и без него.

    В этом исследовании мы обнаружили очень значительное увеличение числа профилей островков на площадь поджелудочной железы у мышей ob/ob . Этот результат, однако, не противоречит обнаружению неизменного общего числа островков, и это действительно то, чего следует ожидать, поскольку средняя высота островков (h в уравнении9) увеличивается с увеличением среднего объема островков. Конфликт возникает только в том случае, если увеличенное количество профилей островков на площадь поджелудочной железы приводит к выводу, что общее число островков увеличено, что, как описано, было бы необоснованным заключением. Мы обнаружили, что средняя площадь островков у мышей ob/ob увеличилась в 1,8 раза, тогда как средний объем островков увеличился в 3,6 раза. Таким образом, если бы вывод об увеличении среднего объема островков был основан на измерении средней площади профиля островков, этот вывод был бы правильным в том смысле, что средний объем островков действительно увеличился, хотя впечатление о величине увеличения было бы неправильный.

    В литературе указано, что количество и размер островков увеличены у мышей ob/ob (3,4), со ссылками на более ранние публикации таких авторов, как Bleisch et al. (12), Хеллман и др. (5), а Гептс и соавт. (6). Блейш и др. (12) использовали количество островков на площадь поджелудочной железы и среднюю площадь островков, чтобы сделать вывод, что островки у мышей ob/ob были более многочисленными и большими по сравнению с нормальными швейцарскими мышами.Критическое обсуждение этих методов дано выше. Хеллман и др. (5) и Гептс и соавт. (6) оба использовали метод, описанный Wicksell (13,14), который основан на предположении о сферической или эллипсоидальной трехмерной форме островков. В то время, когда проводились эти исследования, этот метод был современным, но теперь он был вытеснен последними достижениями в области стереологии. Хеллман и др. (5) был сосредоточен в первую очередь на распределении островков по размерам (что имеет смысл, поскольку именно в этом заключается сила метода, основанного на Викселле), а общее количество островков не рассчитывалось.Однако из данных, приведенных в статье, ясно, что подсчет общего количества островков привел бы к увеличению числа островков у мышей ob/ob . В принципе, Гептс и соавт. (6) использовали тот же метод и, что интересно, обнаружили неизменное общее количество островков у мышей ob/ob по сравнению с однопометниками без ожирения. Однако, не имея возможности объяснить эти явно расходящиеся результаты, следует упомянуть, что основанный на Викселле метод является гораздо более сильным инструментом для описания распределения объектов по размерам, а не для оценки их общего количества.

    Ранее мы сообщали о линейной корреляции между взвешенным по объему средним объемом островков и общим объемом островков у крыс (7), наблюдение, которое предполагает, что увеличение общего объема островков во время физиологического роста у крыс старше 30 дней связано с гипертрофия островков без участия гиперплазии островков, что мы и обнаружили в этом исследовании, используя прямое стереологическое измерение общего числа островков у мышей ob/ob .С другой стороны, ясно, что новые островки действительно развиваются при определенных экспериментальных условиях, например, после частичной панкреатэктомии, где было четко продемонстрировано образование новых островков (15). Однако увеличение массы островков в интактной поджелудочной железе из-за повышенных метаболических потребностей и регенерация поджелудочной железы после частичной панкреатэктомии не могут быть напрямую сопоставимы. Формирование новой ткани поджелудочной железы после резекции поджелудочной железы, по-видимому, повторяет эмбриональное развитие (15) и может включать экспрессию ряда факторов роста, отсутствующих в интактной поджелудочной железе.

    Возникает очевидный вопрос, почему новые островки не образуются даже при предположительно максимальном росте общего объема островков, как это происходит у мышей ob/ob . Другие анатомические структуры, такие как почечные клубочки, также лишены способности к гиперплазии и вместо этого становятся гипертрофированными с повышенным спросом, вероятно, из-за очень специфической структуры нервно-сосудистой и канальцевой систем, необходимой для соответствующей функции.Возможно, архитектура (т. е. внутриостровковая сосудистая структура) островков настолько сложна, что позволяет формировать новые островки только во время формирования, роста или регенерации поджелудочной железы как таковой, как это происходит во время внутриутробной жизни. или после частичной резекции поджелудочной железы. Однако мы не утверждаем, что новообразование островков как таковое не происходит у мышей, а скорее то, что количество новых, в конечном итоге образующихся островков, одинаково у мышей ob/ob и мышей ob /+, несмотря на выраженную разницу в общий объем островков.

    Увеличение общего объема клеточной популяции может быть связано либо с увеличением числа клеток, либо с увеличением среднего клеточного объема, либо с их комбинацией. Однако, учитывая степень общего увеличения массы островков у мышей ob/ob как в предыдущих исследованиях, так и в настоящем исследовании, становится ясно, что подавляющее большинство увеличения массы островков является результатом гиперплазии островковых клеток.Если увеличение общего объема островков полностью вызвано ростом существующих островков, каковы первичные источники новых клеток (в первую очередь β-клеток)? Очевидный ответ — из клеток, уже находящихся внутри островков. Это может быть достигнуто за счет митоза внутри островковых β-клеток, событие, которое определенно происходит на основании наличия митотических фигур во внутриостровковых β-клетках (6,16) и обнаружения включения бромодезоксиуридина (BrdU) в β-клетки. также в нормальных условиях (17), или новые клетки могут быть получены из внутриостровковых стволовых клеток/клеток-предшественников, хотя существование таких клеток все еще обсуждается.Кроме того, важность митоза β-клеток подтверждается наблюдением, что мышей ob/ob имеют повышенное соотношение BrdU-позитивных ядер β-клеток во время увеличения массы β-клеток (18). Клетки протоков также привлекли большое внимание, поскольку клетки способны дифференцироваться в β-клетки (19–21), и в протоках в условиях с увеличением массы β-клеток (22,23). Однако на основании результатов этого исследования можно утверждать, что эти клетки не имеют первостепенного значения для увеличения островковой массы у мышей ob/ob и, в отличие от скорости образования клеток протоков, положительных на PDX- 1 и инсулина, скорость гибели этих клеток подробно не изучалась.Тем не менее, возможность, которую не следует игнорировать, заключается в том, что β-клетки, образующиеся в протоках, могут мигрировать в существующие островки, поскольку большинство островков непосредственно прикрепляются к дереву протоков (24).

    Таким образом, увеличение общей массы островков у мышей ob/ob полностью вызвано гипертрофией островков без образования дополнительных островков по сравнению с мышами ob/ob /+. Это предполагает, что делящиеся внутриостровковые β-клетки и, возможно, внутриостровковые прогениторные/стволовые клетки являются первичными источниками новых β-клеток во время адаптации к повышенным метаболическим потребностям.Это также предполагает, что островки Лангерганса, с анатомической точки зрения, являются еще более уникальными структурами, чем предполагалось ранее, и что неогенез новых островков возможен только в таких условиях, как во время развития/роста поджелудочной железы или после частичной панкреатэктомии.

    РИС. 1.

    На рисунке показан забор гистологических срезов. Поджелудочная железа была тщательно рассечена, и в стереологических исследованиях использовались как срезы, отмеченные как первичные, так и эталонные срезы.

    РИС. 1.

    На рисунке показан забор гистологических срезов. Поджелудочная железа была тщательно рассечена, и в стереологических исследованиях использовались как срезы, отмеченные как первичные, так и эталонные срезы.

    Режим закрытия

    РИС. 2.

    Каждая отобранная первичная секция была систематически исследована, как показано в верхней части рисунка. Это было выполнено в два сеанса, во время которых либо рамка для подсчета (внизу слева на рисунке) была прикреплена к столу для подсчета островков, как описано в тексте, либо сетка для подсчета точек (внизу справа на рисунке) была прикреплена к столу. таблицу для подсчета общего объема островков, общего объема поджелудочной железы и средневзвешенного по объему объема островков, как описано в тексте.

    РИС. 2.

    Каждая отобранная первичная секция была систематически исследована, как показано в верхней части рисунка. Это было выполнено в два сеанса, во время которых либо рамка для подсчета (внизу слева на рисунке) была прикреплена к столу для подсчета островков, как описано в тексте, либо сетка для подсчета точек (внизу справа на рисунке) была прикреплена к столу. таблицу для подсчета общего объема островков, общего объема поджелудочной железы и средневзвешенного по объему объема островков, как описано в тексте.

    Режим закрытия

    РИС. 3.

    Пример подсчета дисекторов. В первичном разделе островки, обозначенные B, C и D, определяются как находящиеся внутри рамки счета, поскольку они не касаются (полных) линий исключения и либо полностью находятся в пределах рамки, либо касаются (пунктирных) линий включения. Островки, обозначенные A, E и F, определяются как находящиеся вне рамки, поскольку они либо полностью находятся вне рамки, либо касаются линий исключения.В справочном разделе, показанном внизу рисунка, островки B и D все еще присутствуют, и поэтому они не учитываются, тогда как островок C отсутствует, и, следовательно, он учитывается (см. текст для более подробной информации).

    РИС. 3.

    Пример подсчета дисекторов. В первичном разделе островки, обозначенные B, C и D, определяются как находящиеся внутри рамки счета, поскольку они не касаются (полных) линий исключения и либо полностью находятся в пределах рамки, либо касаются (пунктирных) линий включения.Островки, обозначенные A, E и F, определяются как находящиеся вне рамки, поскольку они либо полностью находятся вне рамки, либо касаются линий исключения. В справочном разделе, показанном внизу рисунка, островки B и D все еще присутствуют, и поэтому они не учитываются, тогда как островок C отсутствует, и, следовательно, он учитывается (см. текст для более подробной информации).

    Режим закрытия

    РИС. 4.

    Результаты стереологического исследования поджелудочной железы.Данные представлены в виде групповых средних с планками погрешностей, представляющими SE. A : Масса тела. B : Уровень глюкозы в крови натощак. C : Общий объем поджелудочной железы. D : Общий объем островков. E : Общее количество островков. F : Средний объем островков. G : Средний объем островков, взвешенный по объему. H : CV N (исл.). *Статистически значимое различие между группой ob/ob и группой ob /+.Фактические значения P приведены в тексте.

    РИС. 4.

    Результаты стереологического исследования поджелудочной железы. Данные представлены в виде групповых средних с планками погрешностей, представляющими SE. A : Масса тела. B : Уровень глюкозы в крови натощак. C : Общий объем поджелудочной железы. D : Общий объем островков. E : Общее количество островков. F : Средний объем островков. G : Средний объем островков, взвешенный по объему. H : CV N (исл.). *Статистически значимое различие между группой ob/ob и группой ob /+. Фактические значения P приведены в тексте.

    Режим закрытия

    РИС. 5.

    Данные о количестве островков на площадь поджелудочной железы и средней площади островков в срезах. Данные представлены в виде групповых средних с планками погрешностей, представляющими SE. A : Количество островков на область. B : Средняя площадь островка. *Статистически значимое различие между группой ob/ob и группой ob /+. Фактические значения P приведены в тексте.

    РИС. 5.

    Данные о количестве островков на площадь поджелудочной железы и средней площади островков в срезах. Данные представлены в виде групповых средних с планками погрешностей, представляющими SE. A : Количество островков на область. B : Средняя площадь островка.*Статистически значимое различие между группой ob/ob и группой ob /+. Фактические значения P приведены в тексте.

    Режим закрытия

    Трансплантация островковых клеток при диабете 1 типа — Просмотр полного текста

    Диабет 1 типа обычно лечится введением инсулина, либо многократными инъекциями инсулина, либо непрерывной подачей инсулина через носимую помпу. Инсулинотерапия обеспечивает длительную выживаемость у пациентов с диабетом 1 типа; однако это не гарантирует постоянного нормального контроля уровня сахара в крови.Из-за этого у длительно перенесших диабет 1 типа часто развиваются сосудистые осложнения, такие как диабетическая ретинопатия, заболевание глаз, которое может привести к ухудшению зрения и слепоте, и диабетическая нефропатия, заболевание почек, которое может привести к почечной недостаточности. У некоторых людей с диабетом 1 типа развивается неосознанность гипогликемии, опасное для жизни состояние, которое трудно поддается медикаментозному лечению и характеризуется сниженными или отсутствующими предупредительными сигналами гипогликемии. Для таких людей возможным вариантом лечения является трансплантация островков поджелудочной железы.К сожалению, независимость от инсулина среди реципиентов трансплантатов островковых клеток со временем имеет тенденцию к снижению. Новые стратегии, направленные на стимулирование приживления трансплантированных островков, необходимы для улучшения клинических результатов, связанных с этой процедурой. Целью данного исследования является определение безопасности и эффективности трансплантации островковых клеток в сочетании с режимом иммуносупрессивной терапии для лечения диабета 1 типа у лиц, не осознавающих гипогликемию и страдающих тяжелыми эпизодами гипогликемии.Это исследование также будет направлено на улучшение понимания факторов, определяющих успех и неудачу трансплантации островковых клеток при диабете 1 типа.

    Подходящие участники будут случайным образом распределены для участия в этом исследовании или в исследовании по трансплантации островковых клеток фазы 2 для конкретного места. Участники этого исследования получат до трех отдельных трансплантатов островковых клеток и схему приема иммунодепрессантов, состоящую из антитимоцитарного глобулина (АТГ), сиролимуса и такролимуса в низких дозах.

    Трансплантация предполагает пребывание в стационаре и введение островков в ветвь воротной вены.Участникам, которые не достигли или не сохранили независимость от инсулина к 75-му дню после трансплантации, будет предложена повторная трансплантация островковых клеток. Участникам, которые остаются зависимыми от инсулина более 1 месяца после второй трансплантации и у которых наблюдается частичная функция трансплантата, будет предложена третья трансплантация островковых клеток. Базиликсимаб будет использоваться вместо АТГ для второй и третьей трансплантаций, если они необходимы. Участники, которые не соответствуют критериям для последующей трансплантации и не имеют функционирующего трансплантата, получат сокращенный период наблюдения.

    После каждой трансплантации проводится до 19 ознакомительных визитов. Медицинский осмотр, обзор нежелательных явлений и сбор крови будут проводиться при большинстве посещений. Рентген грудной клетки, УЗИ брюшной полости, электрокардиограмма, опросники по качеству жизни, сбор мочи и тестирование скорости клубочковой фильтрации (СКФ) будут проводиться во время некоторых посещений. Участники также будут проверять свой собственный уровень глюкозы в крови не менее пяти раз в день на протяжении всего исследования. 24-месячный период наблюдения будет иметь место после последней трансплантации участника.

    Изоляция и функция островков

    Компонент биологии островковых клеток ядра предлагает изоляцию островков, высокопроизводительную параллельную перфузию островков и динамические исследования секреции гормонов.

    Нажмите здесь, чтобы узнать больше об ядре Центра исследования диабета (DRC).

    Стоимость тарелки:

    Изоляция островка грызунов:

    Одинарная изоляция —

    • Внутренний — 631 долл. США
    • Внешний (некоммерческий) — 1 102 долл. США
    • Внешний — Пожалуйста, запросите предложение

    Цена включает одно условие изоляции (1-2 контрольных крысы или 4 мыши того же генотипа) для одной объединенной партии островков.

    Множественная изоляция —

    • Внутренний — 831 долл. США
    • Внешний (некоммерческий) — 1 462 долл. США
    • Внешний — Пожалуйста, запросите предложение

    Цена включает максимум два выделения в день (2–4 крысы или 8 мышей) для двух отдельных партий объединенных островков из каждого из двух выделений.

    Исследование островков человека или грызунов:

    • Внутренний — 1 705 долл. США
    • Внешний (некоммерческий) — 2 958 долларов США
    • Внешний — Пожалуйста, запросите предложение

    Цена включает либо исследование перфузии интактных островков, либо динамическое статическое исследование инкубации агрегатов островков на секрецию гормонов, а также ½ планшета для ELISA инсулина для предварительных данных исследования островков и обеспечения качества.

    Дополнительные анализы ELISA на гормоны оплачиваются по стоимости в зависимости от типа анализа гормонов и количества планшетов ELISA, необходимых для анализа всех нужных образцов. Типичное исследование перифузии секреции инсулина, стимулированное глюкозой, требует 2 планшетов ELISA на каждое условие исследования, если все критические моменты времени анализируются для первой и второй фаз секреции инсулина. Типичное статическое исследование секреции инсулина, стимулируемое глюкозой, требует ½ планшета ELISA на каждое условие исследования, если выполняется полная кривая ответа на дозу глюкозы.

    Затраты, связанные с заказом и содержанием животных или закупкой и культивированием островков человека, не включены в затраты на выделение или исследование островков и будут оплачиваться отдельно для покрытия расходов, связанных с каждым дополнением.

    Центр островков поджелудочной железы

    Центр подготовки островков поджелудочной железы


     

     

    Центр островков поджелудочной железы Барбары Дэвис изолирует от функциональных мышей.Другие интересующие органы (селезенка, лимфатические узлы поджелудочной железы, вилочковая железа) могут быть собраны одновременно, если это необходимо.
    Несмотря на то, что услуги запрашиваются через iLabs (Центр биоресурсов Барбары Дэвис), фактическое расписание должно быть выполнено путем личного обращения в Центр (по телефону или электронной почте).

    Услуги



    Донорские мыши (Клиентские предоставляемые) гуманно эвтаназированы, коктейль для коллагеназы / нейтральной протеазы вводят

    удаляют общий желчный проток и раздутую ферментами поджелудочную железу.После инкубации при 37°C островки

          очищают от переваренной поджелудочной железы в градиенте плотности, и, в конечном итоге, чистые островки собирают вручную под микроскопом.
          Клиент может запросить отчет о конечном продукте либо как простое количество островков, либо как эквиваленты островков

          (IEQ; 1 IEQ = островок площадью примерно 150 мм).

    Трансплантация островок / тканей


    Увлеченные островки забиты в виде IEQ и трансплантированы под капсулу почек анестезированного получателя (ы)

    .Мыши-получатели также предоставляются клиентом; могут быть приняты меры для размещения

          трансплантированных животных в приюте для животных BDC.
          Эта услуга по трансплантации (капсулы почки) также доступна для других типов тканей (предоставляется клиентом).

    Протокол животных Протокол


    Исследователи, запрашивающие ашнеты поджелудочной железы из ядра, должны сначала обладать текущими, утвержденными Iacuc

    протоколом животных.Обычно требуется поправка к протоколу; Меня нужно добавить в ваш протокол, и вам

          должно быть включено раздел о наших процедурах сбора/трансплантации островков. Я предоставлю вам

          мой PQF и соответствующие протокольные описания.

     

         Островковая программа человека


     

     

          Центр Барбары Дэвис имеет Генеральное соглашение о передаче материалов (MTA) с Diabetes 3 Institute 9006.Предоставив копию своего одобрения Институционального комитета по биобезопасности (IBC), краткое описание своей работы

          и подписавшись на MTA, заинтересованные исследователи получают доступ к человеческим островкам

          по цене 0,10 канадских долларов / IEQ (в настоящее время 75 долларов США). (США)/1000 IEQ плюс стоимость доставки в размере 50 долларов США).

          Островки обычно предлагаются раз в неделю или две. Заказы размещаются через Core и доставляются сюда

          для распространения.

    alexxlab / 07.07.1996 / Разное

    Добавить комментарий

    Почта не будет опубликована / Обязательны для заполнения *